小檗胺对兔急性高眼压视网膜损伤保护作用的实验研究

目的探讨小檗胺(berbamine,BER)对急性高眼压下视网膜损伤的保护作用及其机制。方法 96只大耳白兔随机分6组:正常对照组,阴性对照组,阳性对照组(VER),BER A、B、C组,后5组建立兔缺血-再灌注损伤模型,术后分时段观察视网膜形态、厚度的变化,并测量视网膜细胞内Ca2+含量的变化。结果阳性对照组,BER A、B、C组视网膜早期水肿较轻,晚期视网膜内层厚度明显厚于阴性对照组,术后168h BER C组视网膜内层厚度为(104.82±0.87)μm、阳性对照组为(105.14±0.92)μm,与正常对照组(105.94±0.66)μm相比,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。造模后0h视网膜细胞中Ca2+含量开始升高,随再灌注时间延长呈逐渐增高趋势。BER组随再灌注时间的延长及药物浓度的增加,细胞内Ca2+含量逐渐减少,至术后168h,BER C组Ca2+含量为(45.35±0.48)μg·g-1,与正常对照组(44.61±0.84)μg·g-1相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论视网膜细胞内Ca2+超载,参与了视网膜缺血-再灌注损伤,BER通过抑制Ca2+内流从而保护视网膜细胞,并呈浓度依赖性。     

COX-2蛋白在鼻咽癌中的表达及其临床意义

目的 探讨COX-2(cyclooxygenase-2)蛋白在鼻咽癌组织中的表达及其临床意义。方法 分别应用免疫组化方法（IHC）和蛋白印迹方法（Western Blot）检测47例鼻咽癌组织（其中用IHC33例,Western Blot14例）及24例鼻咽部炎症组织中COX-2蛋白的表达。结果 COX-2蛋白在鼻咽癌组织的阳性表达率为81.8%（27/33）,在鼻咽炎组织的阳性表达率为25%（3/12）,两者表达差异有统计学意义（P=0.001）。Western Blot结果显示,在两种组织中COX-2蛋白表达的相对值分别为1.258±0.034和0.487±0.076,在鼻咽癌组表达显著增高（P=0.000）。结论 COX-2蛋白的高度表达在鼻咽癌的发生、发展中起重要作用,选择性COX-2抑制剂有望成为鼻咽癌化疗的重要药物。     

异黄酮片治疗更年期女性中重度干眼症临床研究

目的 探讨异黄酮片对更年期女性中重度干眼的治疗效果.方法 采用前瞻性随机双盲对照研究方法.将2010年8月至2011年3月在两所医院眼科门诊确诊为中重度干眼症的76例女性患者(76只眼)随机分为两组:口服异黄酮片组38例,口服维生素C安慰剂对照组38例.两组均加用0.05％羧甲基纤维素钠眼液滴眼治疗;分别在治疗前和治疗后3、7、28 d各时间点检测并评定患者干眼主观症状、视力、角膜荧光素染色(Fl)、泪膜破裂时间(BUT)及基础泪液分泌试验(SIT),治疗前后及两组间均进行方差分析和样本均数或中位数差值分析.结果 治疗28d后,异黄酮片组中重度干眼的样本均数差值[ 1.24(视疲劳)、1.32(干涩感)、0.88(异物感)、1.42(烧灼感)、1.28(畏光)、1.64(疼痛)、1.56(眼红)],以及样本中位数差值[0.30(视力)、5.00(FI染色)、5.00 (BUT)、5.00 (SIT)],均较治疗前明显改善[22.60(视疲劳),23.40(干涩感),19.20(异物感),28.90(烧灼感),18.50(畏光),36.80(疼痛),15.20(眼红)、11.50(视力),209.85(F1染色),276.80(BUT),325.42 (SIT);均为P＜0.05差异有统计学意义].在全部28 d观察期间内,安慰剂组中重度干眼的样本均数差值[0.16(视疲劳)、0.22(干涩感)、0.13(异物感)、0.42(烧灼感)、0.28(眼红)],以及样本中位数差值[0.20(视力)、0.50 (F1染色)、0.50 (BUT)、0.50 (SIT)],均较治疗前无明显改善[2.12(视疲劳),1.98(于涩感),1.64(异物感),3.32(烧灼感),3.47(眼红)、1.36(视力),4.08(Fl染色),3.16 (BUT),3.88 (SIT);差异无统计学意义P值均＞0.05].异黄酮片组SIT值较安慰剂组改善差异有统计学意义(F =6.22,P＜0.05),SIT值达正常范围.结论 异黄酮片可显著改善中重度女性更年期干眼的症状和体征,具有重要的临床应用价值.     

苦参碱对体外培养的人角膜成纤维细胞增殖的影响

目的 研究苦参碱对体外培养的人角膜成纤维细胞增殖的影响.方法 将分离培养的人角膜成纤维细胞纯化后,用四唑盐比色试验（MTT比色法）分别测得培养0～8 d的人角膜成纤维细胞的光吸收值（A）,绘制出其生长曲线并计算出群体倍增时间.设立阴性对照组、溶媒对照组及阳性药物对照组（地塞米松160 mg/L）,不同浓度（10、20、40、80、160、320 mg/L）的苦参碱干预体外培养的人角膜成纤维细胞,在用药后的不同时间（24、48、72 h）,用MTT比色法测定各处理组的细胞光吸收值,计算出其抑制率,并分别对相应数据采用单因素方差分析或LSD-t检验进行统计分析.结果 体外培养的人角膜成纤维细胞的生长曲线近似＂S＂形,其群体倍增时间为52.17 h.不同浓度（10、20、40、80、160、320 mg/L）的苦参碱作用于人角膜成纤维细胞后24 h,其抑制率分别为5.08%、10.19%、18.66%、31.89%、48.93%、75.49%;作用48 h后,其抑制率分别为7.66%、15.58%、27.95%、43.45%、64.70%、89.70%;作用72 h后,其抑制率分别为11.57%、22.66%、35.50%、52.75%、70.66%、94.62%：随着作用时间的延长和浓度的增加,其抑制率均逐步增加,其抑制作用呈时间-剂量依赖性,与溶酶对照组两两比较差异均有统计学意义（P〈0.05）.地塞米松作用于人角膜成纤维细胞24、48、72 h后,抑制率分别为37.15%、50.81%、56.99%,显示出时间-效应依赖关系;且各时间段相同浓度（160 mg/L）的地塞米松与苦参碱对人角膜成纤维细胞的抑制率两两比较,苦参碱组均高于地塞米松组（P〈0.05）.结论 在10～320 mg/L浓度范围内,苦参碱对体外培养的人角膜成纤维细胞的增殖具有明显的抑制作用,其抑制作用呈时间-剂量依赖性,且160 mg/L苦参碱对人角膜成纤维细胞增殖的抑制作用强于同浓度的地塞米松.     

儿童眼内炎玻璃体切割术后视网膜脱离的临床研究

目的 探讨儿童眼内炎玻璃体切割(玻切)术后视网膜脱离的临床特点,并分析其影响因素和预后,为临床防治提供指导.方法 回顾分析2002年1月至2007年12月我院114例儿童眼内炎患者行玻切术后视网膜脱离33例33只眼的的临床资料.并根据眼内炎玻切术式不同分为4组,Ⅰ组(巩膜外环扎+玻切+曲安奈德注射+眼内光凝+硅油填充)19只眼,Ⅱ组(巩膜外环扎+玻切+眼内光凝+硅油填充)23只眼,Ⅲ组(巩膜外环扎+玻切+硅油填充)37只眼,Ⅳ组(玻切+巩膜外环扎)35只眼.视网膜脱离复位术后随访≥16月.结果 儿童眼内炎玻切术后视网膜脱离的总发生率为28.95%.各组发生率依次为:10.53%,26.09%,29.73%,40.00%.经χ2分割法检验,Ⅰ组与Ⅳ组,Ⅱ组与Ⅳ组,Ⅲ组与Ⅳ组,Ⅰ组与Ⅱ组,Ⅰ组与Ⅲ组术后视网膜脱离发生率均有统计学意义(P<0.05),Ⅱ组与Ⅲ组术后视网膜脱离发生率无统计学意义(P>0.05).除4只眼放弃治疗外,所有病例炎症得到控制、视网膜复位.结论 儿童眼内炎因其自身特点,玻璃体切割联合巩膜外环扎、曲安奈德注射、眼内光凝、硅油填充术可有效预防眼内炎术后视网膜脱离的发生.     

复方野菊花眼贴对蓝光诱导小鼠睑板腺功能异常的防治作用及其机制

目的探讨复方野菊花眼贴对蓝光诱导小鼠睑板腺功能异常的防治作用及其机制。方法将64只15周龄雄性C57BL/6J小鼠按照随机数字表法分成2个部分, 每部分32只, 分别进行预防实验和治疗实验。预防实验和治疗实验各32只小鼠分别按照随机数字随机分为正常组、蓝光组、溶剂组和眼贴组, 每组8只。预防实验中, 除正常组外, 各组小鼠采用波长460 nm、光照度2 000 lx的蓝光, 每天暴露6 h, 连续暴露15 d建立小鼠睑板腺功能异常模型;溶剂组和眼贴组每天在蓝光暴露前和暴露后, 分别用相对应眼贴敷贴预防25 min, 连续15 d, 蓝光组仅接受蓝光暴露15 d处理, 并于第15天行睑板腺开口照相观察小鼠睑板腺功能。治疗实验中, 除正常组外, 各组小鼠均采用上述方法建立小鼠睑板腺功能异常模型, 溶剂组和眼贴组在结束15 d的蓝光暴露后, 每天早上和下午分别用相对应眼贴敷贴治疗25 min, 连续15 d, 蓝光组置于标准环境中观察15 d, 并在第15天行睑板腺开口照相观察小鼠睑板腺功能变化。预防实验及治疗实验的各组小鼠在处理完成后进行离体睑板腺拍照、油红O染色、苏木精-伊红染色观察小鼠...     

自体角膜缘干细胞及羊膜移植治疗假性胬肉

目的 评价自体角膜缘干细胞移植联合羊膜移植治疗假性胬肉的临床应用及疗效.方法 将145例(162眼)假性胬肉随机分成2组:A组75例(82眼)行假性胬肉切除自体角膜缘干细胞移植联合羊膜移植术;B组70例(80眼)行假性胬肉切除羊膜移植术.术后均随访6月以上.结果 145例(162眼)术后随访时间平均(24.30±12.15)月.A组75例(82眼),术后随访时间平均(23.84±12.47)月,有5眼复发,复发率为6.10%;B组70例(80眼),术后随访时间平均(24.75±11.62)月,有14眼复发,复发率为17.50%.两组比较,复发率差异有统计学意义(X2=5.085,P＜0.05).角膜创面上皮愈合时间自体干细胞移植联合羊膜移植组平均为(4.25±1.02)d;单纯羊膜移植组平均为(6.42±1.36)d,两组比较,角膜创面上皮愈合时间差异有统计学意义(μ=11.417,P＜0.05).全部病例均无感染、排斥、复视或眼球运动障碍等并发症.结论 自体角膜缘干细胞移植联合羊膜移植术治疗假性胬肉复发率低,是一种较好的手术方法 .     

姜黄素对高糖诱导的人视网膜血管内皮细胞增殖、迁移和成管的影响

目的 研究姜黄素对体外高糖诱导的人视网膜血管内皮细胞(HRCECs)增殖、迁移和管腔形成能力的影响。方法 将HRCECs分为5组进行培养：正常对照组(正常糖浓度的DMEM培养基下培养)、高糖对照组(高糖DMEM培养基下培养)、高糖+不同浓度姜黄素3个组(高糖DMEM培养基中分别加入20、40、80μmol/L姜黄素),采用CCK-8法检测姜黄素干预12、24、48 h后各组细胞的增殖能力,采用Transwell法和Matrigel法分别检测姜黄素干预24 h后各组细胞的垂直迁移和管腔形成能力。结果 (1)细胞增殖：与正常对照组比较,高糖对照组细胞增殖能力明显增强(P<0.01),各浓度姜黄素组作用不同时间(12、24、48 h)后与高糖对照组比较,细胞增殖抑制率明显上升(P<0.01),且呈浓度与时间依赖性,各实验组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.01)。(2)细胞迁移：与正常对照组相比,高糖对照组细胞垂直迁移率显著增高(P<0.01);与高糖对照组相比,各浓度姜黄素组细胞垂直迁移率均显著降低(P<0.01),且随着药物浓度增加迁移率逐渐降低。(3)...     

基质金属蛋白酶3在晶状体上皮细胞中的表达及其意义

背景 后发性白内障是现代白内障囊外摘出术后导致视力下降的常见并发症.基质金属蛋白酶(MMPs)是参与降解除多糖以外全部细胞外基质(ECM)的重要蛋白酶,探讨MMP-3对后发性白内障的基因治疗一直是研究热点,而纤连蛋白(FN)是MMP-3的主要降解底物,能间接反映MMP-3的表达情况.目的 构建pEGFP-N1-MMP-3真核重组质粒并转染晶状体上皮细胞(LECs),观察MMP-3在LECs中的表达,探讨后发性白内障基因治疗的可能性.方法 取6只新鲜猪晶状体,将囊膜用组织块法进行原代培养,获得LECs.用E.coli DH5α MMP-3和E.coli DH5α pEGFP-N1质粒构建MMP-3的真核表达重组质粒pEGFP-N1-MMP-3,通过双酶切,DNA测序分析鉴定人MMP-3片段的准确性.将构建的pEGFP-N1-MMP-3转染至猪LECs中,通过绿色荧光蛋白(GFP)间接观察MMP-3在猪LECs中的表达,用Western blot法检测pEGFP-N1-MMP-3真核重组质粒转染后LECs表达产物FN的相对表达量,间接评估MMP-3的表达量. 结果 双酶切鉴定结果符合质粒pEGFP-N1及目的片段MMP-3大小.软件分析测序结果表明,重组质粒pEGFP-N1-MMP-3中的MMP-3基因与GenBank中的人MMP基因序列相似性达99.6％,表示目的片段已正确插入pEGFP-N1载体.原代培养猪LECs,将重组质粒pEGFP-N1-MMP-3转染入猪LECs,荧光显微镜下可见明显的GFP绿色荧光.Western blot检测表明,FN在pEGFP-N1 -MMP-3真核重组质粒转染组的表达量为0.666±0.008,空质粒转染组FN的表达量为0.326±0.071,差异有统计学意义(P=0.000). 结论 成功构建了pEGFP-N1-MMP-3质粒,并能够在猪LECs中表达,为进一步研究该蛋白在LECs中的表达与功能奠定了基础.     

组织支持感与心理授权对护士工作生活质量的影响

目的 探讨组织支持感、心理授权对护士工作生活质量的影响.方法 使用整群抽样法对衡阳市3所三级甲等综合医院522名护士进行调查.结果 护士工作生活质量得分为(2.951±0.576)分,以升迁制度和工作福利两个维度得分最低.组织支持感、心理授权与护士工作生活质量存在显著正相关,心理授权在组织支持感对护士工作生活质量的影响中起部分中介作用.结论 管理者应重视护士工作生活质量,创造良好的组织支持系统,以利于护士心理授权环境的形成,进而提升护士工作生活质量.