CIK细胞对裸鼠腹膜移植人胃癌细胞增殖和凋亡影响的实验研究

目的研究细胞因子诱导的杀伤细胞(Cytokine inducedkiller,CIK)对裸鼠腹膜移植人胃癌细胞增殖和凋亡的影响。方法体外制备CIK细胞。建立人胃癌细胞裸鼠腹膜移植小鼠模型,模型鼠腹腔注射CIK细胞,透射电镜观察腹膜移植癌组织形态学变化,流式细胞术(FCM)检测癌细胞增殖周期中G0/G1、S、G2/M期细胞比率、增殖指数(proliferationIndex,PI)和细胞凋亡指数(apoptosisIndex,AI)的变化。结果模型鼠腹膜癌组织细胞的超微结构出现不同程度的凋亡形态学改变,FCM检测DNA直方图上呈现有凋亡峰。G0/G1期细胞比率为(70.73±2.02)%～(75.88±2.23)%,AI为(7.50±2.69)%～(13.16±2.58)%,与对照组相比显著增加,P=0.0000,P=0.008,P<0.01;S期细胞比率为(14.96±1.32)%～(15.34±1.30)%,无显著变化,P>0.05;G2/M期细胞比率为(14.31±1.51)%～(8.91±0.86)%,PI为(29.27±2.05)%～(24.12±2.10)%,均显著降低,P=0.000、0.008、0.033、0.043,P<0.01。随CIK细胞注射剂量的增加和作用时间延长,G0/G1期细胞比率和AI逐渐增加,而G2/M期细胞比率和PI下降,差异均有统计学意义,P<0.05或P<0.01。细胞AI与G0/G1期细胞比率正相关,r=0.676,与PI负相关,r=-0.659。结论CIK细胞可以影响胃癌腹膜种植转移细胞的细胞周期,并具有诱导细胞凋亡的作用。     

脂质体转染VEGF-C反义寡核苷酸对人胃癌OCUM-2MD3细胞VEGF-C表达的影响

目的探讨脂质体转染VEGF-C反义寡核苷酸在人胃癌OCUM-2MD3细胞中的转染效率及对VEGF-C表达的影响。方法以VEGF-C基因翻译起始区为靶点合成反义寡核苷酸,脂质体介导转染人胃癌OCUM-2MD3细胞,荧光显微镜观察转染效率,RT-PCR检测转染后VEGF-CmRNA表达水平,流式细胞术检测VEGF-C蛋白表达。结果经脂质体介导可成功将VEGF-C反义寡核苷酸转染至胃癌OCUM-2MD3细胞,12 h达其峰值87.93%。反义组VEGF-CmRNA相对吸光度值为0.38±0.11,显著低于正义组(0.83±0.17)和对照组(0.80±0.14)(P<0.01)。反义组VEGF-C蛋白表达水平(31.26±5.17)%,较正义组(41.83±7.49)%和对照组(38.65±7.11)%亦明显下降(P<0.01)。结论VEGF-C反义寡核苷酸经脂质体介导转染胃癌OCUM-2MD3细胞,可降低胃癌细胞VEGF-CmRNA及其蛋白表达水平。     

CIK细胞对脾虚型人胃癌裸鼠腹膜移植模型抗肿瘤作用及其机制的实验研究

目的 :探讨CIK细胞对脾虚型人胃癌裸鼠腹膜移植模型的抗肿瘤作用及机制。方法 :在成功制备CIK细胞、建立脾虚型人胃癌裸鼠腹膜移植模型的基础上 ,观察CIK细胞对脾虚型人胃癌裸鼠腹膜移植模型的体内抗肿瘤作用。用放射免疫方法 (RIA )、酶联免疫方法(ELISA)检测CIK细胞在体内抗肿瘤过程中血清和腹水中CEA以及血清IL 2、TNF α、IFN γ、GM CSF含量的变化。结果 :NS对照组裸鼠腹水继续生长 ,与其相比 ,CD3AK组体质量、腹围、腹水量均明显减少 ,P <0 0 1。CIK组较CD3AK组上述指标有进一步显著减少 ,腹水均全部消失 ,其腹水抑制率达 10 0 % ,P <0 0 1;NS对照组裸鼠血清、腹水中CEA含量均保持较高水平 ,与其相比 ,CD3AK组明显减少 ,CIK组较CD3AK组血清中CEA含量进一步显著减低 ,P <0 0 1;另外 ,与NS对照组相比 ,CIK组裸鼠血清中IL 2、TNF α、INF γ、GM CSF含量均显著增加 ,P <0 0 1。结论 :CIK细胞对脾虚型人胃癌腹膜移植裸小鼠模型有更强的体内抗肿瘤活性 ;并可显著减少胃癌细胞CEA的分泌 ,继续分泌IL 2、TNF α、INF γ、GM CSF等细胞因子而发挥直接或间接的抗肿瘤作用。     

加速时间指数鉴别良、恶性乳腺肿物的临床研究

目的利用加速时间指数（acceleration time index,ATI）鉴别乳腺癌及乳腺良性肿物,并通过受试者工作特征（receiver operating characteristic,ROC）曲线评价其可靠性。方法 ATI=加速时间/心动周期。所检测血流样本均来自肿物内部,不包括周边的血流信号。以病理结果为标准。利用ROC曲线评估ATI的诊断价值。结果 106个病变中,良性67个（纤维腺瘤34个,乳腺增生26个,乳腺腺病7个）,恶性39个（非浸润性癌24个,浸润性癌15个）。良性肿物的ATI值（0.064～0.159,平均0.105）低于恶性肿物（0.084～0.250,平均0.176）。对于乳腺良、恶性肿物,ATI差异有统计学意义（P〈0.01）。ROC曲线下面积为0.956,诊断价值高。以ATI=0.155作为最佳临界值具有较高的灵敏度（90%）和特异度（99%）。结论 ATI在鉴别乳腺良、恶性肿物方面具有极大优势。     

E-钙粘素、β1整合素与胃癌腹膜种植转移

胃癌的转移复发是其发生和演进过程中最危险阶段。随着人们对胃癌转移规律的深入了解 ,并由此开展胃癌扩大性淋巴结清扫术、联合脏器切除术以来 ,术后淋巴结转移性复发和局部复发率有了较大程度的降低。但与此同时 ,胃癌术后因腹膜遭癌细胞种植而复发的严重性却日渐突出 ,并成为治疗中最大障碍之一。文献报道在胃癌术后复发的诸类型中 ,腹膜种植性复发约占 5 0 %之多 ,且系多数复发患者致死的直接因素[1] 。胃癌腹膜种植转移的机制尚不十分清楚[2 ] 。一般认为其途径是癌细胞浸润胃壁浆膜层并脱离癌组织母体进入腹腔 ,成为有生物活性的脱落…     

阿托伐他汀联合活血降浊汤对绝经后乳腺癌经内分泌治疗患者血脂、心血管事件及骨密度的影响

目的观察阿托伐他汀联合活血降浊汤对绝经后乳腺癌经内分泌治疗患者血脂、心血管事件及骨密度的影响。方法将183例绝经后乳腺癌术后患者随机分为观察组92例及对照组91例,对照组给予来曲唑治疗,观察组在对照组治疗基础上给予阿托伐他汀联合活血降浊汤治疗,2组疗程均为2年。观察2组治疗前后血脂、骨密度、主要症状积分变化情况,并统计2组主要心血管事件(MACE)与不良反应发生情况。结果治疗6个月、12个月、18个月、24个月后,2组三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平均显著升高(P均0.05),但观察组升高水平显著低于对照组(P均0.05);2组总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平均无明显变化(P均0.05)。治疗12个月、24个月后2组腰椎、股骨颈处骨密度均明显降低(P均0.05),但观察组腰椎、股骨颈处骨密度均显著高于对照组(P均0.05);2组主要症状积分均显著增加(P均0.05),但观察组显著低于对照组(P0.05)。观察组MACE发生率显著低于对照组(P0.05);2组均未出现明显不良反应。结论阿托伐他汀联合活血降浊汤可显著改善绝经后乳腺癌经内分泌治疗患者临床症状与血脂水平,减轻因雌激素水平下降对骨密度的影响,并可降低主要心血管事件发生率,值得临床推广应用。     

胃癌患者血清VEGF水平与T淋巴细胞嗜银蛋白含量的相关性及临床意义

目的检测胃癌患者血清血管内皮生长因子(VEGF)水平和外周血T淋巴细胞嗜银蛋白(Ag-NORs)含量,探讨二者间的相关性及临床意义。方法采用酶联免疫双抗夹心法(ELISA)定量检测74例胃癌患者和32例健康人血清VEGF水平,同时检测外周血T淋巴细胞嗜银蛋白含量并进行相关分析。结果胃癌患者血清VEGF水平(383.33±121.67)pg/ml明显高于健康人(142.86±71.29)pg/ml(P<0.01),其水平与肿瘤大小、浸润深度、分化程度、有无转移、TNM分期有关(P<0.05或0.01);而胃癌患者外周血T淋巴细胞Ag-NORs含量(4.30±1.21)%明显低于健康人(7.65±1.38)%(P<0.01),其含量与胃癌分化程度、有无转移、TNM分期有关(P<0.05或0.01)。胃癌患者血清VEGF水平与外周血T淋巴细胞嗜银蛋白含量呈显著负相关(r=-0.659,P<0.01)。结论胃癌患者血清VEGF水平和外周血T淋巴细胞Ag-NORs含量是评估胃癌恶性生物学行为的重要指标。二者密切相关,对评价机体肿瘤免疫功能具有重要的临床参考价值。     

胃癌患者手术前后T淋巴细胞嗜银蛋白含量变化及参芪扶正注射液对其影响

目的探讨胃癌患者外周血T淋巴细胞嗜银蛋白含量在手术前后的变化以及免疫调节剂参芪扶正注射液(简称参芪液)对其的影响。方法根据85例患者是否行根治术分为两组,每组再根据是否静脉滴注参芪液随机分两组,分别对其手术前后和12名健康人进行外周血T淋巴细胞嗜银蛋白含量的检测。结果胃癌患者T淋巴细胞嗜银蛋白含量较健康人显著降低(P<0．01);根治组(64例)术后T淋巴细胞嗜银蛋白含量较术前明显升高(P<0．05或P<0．01),应用参芪液治疗的患者(36例)升高更加显著(P<0．05);非根治组(21例)手术前后无明显变化,但应用参芪液治疗的患者(13例)升高显著(P<0．05)。结论胃癌患者T淋巴细胞免疫功能低下,在其手术后辅助性应用参芪液可明显改善其细胞免疫功能。     

健脾益气中药对胃癌患者脾虚症与生物学行为的影响

背景中医学理论认为脾虚症能反映疾病的本质,现代医学实验和临床研究表明中医脾虚症与胃癌的发生发展有着密切的关系.目的研究中医脾虚症与胃癌患者临床生物学行为之间的关系,以及健脾益气中药参芪扶正注射液对其影响.设计以诊断为依据的病例对照研究.单位河北医科大学第四医院外三科、妇产科.对象选择2000-10/2002-05在本院外科住院进行手术治疗的进展期胃癌患者102例(同期该类患者450例),男59例,女43例;年龄31～74岁,平均55.6岁.根据中医辨证标准,将102例患者分为胃癌无脾虚症和有脾虚症两组,并将有脾虚症组患者分为单纯手术组与手术+健脾治疗组.方法所有患者均行手术治疗,手术+健脾治疗组在手术后第1天开始,静脉滴注健脾益气中药参芪扶正注射液250 mL(广东省利民制药厂生产,主要成分党参、黄芪),1次/d,共8 d.术后第9天静脉抽抗凝血2mL用于相关免疫指标测定.主要观察指标分析统计胃癌浸润深度、分化程度、淋巴结转移以及TNM分期等.检测红细胞C3b受体花环(RBC-C3bRR)、免疫复合物花环(RBC-ICR)、T淋巴细胞嗜银蛋白含量以及NK细胞活性.结果102例胃癌患者中有63例(61.8%)合并不同程度的脾虚症.有脾虚症组与无脾虚症组患者相比,其肿瘤浸润深度、分化程度、淋巴结转移以及TNM分期的构成比不同,有脾虚症组T3～T4,低分化腺癌以及3,4站淋巴结转移患者较多,TNM分期Ⅲ,Ⅳ期者较多(P＜0.05).有脾虚症组胃癌患者手术+健脾治疗组较单纯手术组RBC-C3bRR,T淋巴细胞嗜银蛋白含量,NK细胞活性显著升高,RBC-ICR显著降低(P＜0.05).结论胃癌患者脾虚症与其临床生物学行为之间有较密切的关系,合并脾虚症患者的预后比不合并脾虚症患者差.脾虚型胃癌患者术后合并应用健脾益气中药可明显改善其免疫功能.     

hB7-1基因转染对人胃癌OCUM-2MD3细胞生长特性及MHCⅠb、HLA-DR抗原表达的影响

胃癌是最常见的消化道恶性肿瘤,其腹膜种植转移是影响预后的重要因素,本实验通过对胃癌高侵袭转移细胞株表面hB7-1,MHCⅠ、Ⅱ的表达以及hB7-1基因转染对其生长特性和免疫原性影响的研究,为进一步开展基因治疗提供免疫学依据。