精子冷冻环无保护剂玻璃化冷冻方法的初步研究

目的探讨精子冷冻环无保护剂玻璃化冷冻方法的可行性。方法正常精液标本上游处理后,进行常规冷冻和冷冻环无保护剂的玻璃化冷冻,复苏后分别从活力参数及电镜下超微结构等指标比较两种冷冻方法的效果。结果两种方法冷冻后精子存活率、活动率之间差异无显著性(48%∶48%;44.5%∶43.5%,P>0.05),但均较未冷冻的89%和88.5%明显下降(P<0.001)。超微结构亦较未冷冻时发生了一定的改变,但核结构基本保持完整。结论精子冷冻环无保护剂的玻璃化冷冻是一种简单、方便而行之有效的冷冻方法。     

针对MAGE-1基因RNAi在恶性胶质瘤SHG-44细胞中的作用研究

目的构建抑制黑色素瘤抗原-1(MAGE-1)的siRNA表达载体,鉴定其在人恶性胶质瘤细胞系SHG-44细胞中对MAGE-1基因表达的干涉作用。方法化学合成2对编码短发夹RNA序列的靶向MAGE-1基因寡核苷酸链,克隆到经BglⅡ、HindⅢ双酶切的pSUPER载体上,重组构建RNA干涉(RNAi)质粒载体。利用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)、流式细胞术和荧光显微镜,检测经稳定转染后SHG-44细胞中MAGE-1的表达,以了解siRNA的干扰效果。结果重组构建的pSUPER-MAGE-1载体经双酶切电泳及插入基因片段序列分析,表明寡核苷酸链成功插入到预计位点,并且序列与预期完全一致。稳定转染后G418筛选出的SHG-44多克隆细胞MAGE-1的表达经RT-PCR、流式细胞术和荧光显微镜检测,2对siRNA均有较明显的干涉作用。结论成功构建了针对MAGE-1基因的siRNA表达载体,抑制SHG-44细胞中的MAGE-1分子的表达。     

计算机导航关节镜下前十字韧带重建术

目的介绍计算机导航技术辅助关节镜下前十字韧带重建术的术前规划和手术方法,比较导航技术辅助与单纯关节镜技术中股骨、胫骨隧道位置的优良率。方法根据术前标准正侧位X线片设计股骨、胫骨隧道的理想位置。术中“C”型臂X线机获得正侧位影像后输入计算机,形成虚拟工作界面。膝关节周围分别于股骨、胫骨侧安置“患者追踪器”。前十字韧带胫骨及股骨导向器上分别装配“工具追踪器”。经过注册及校准后,导航系统识别并捕获上述追踪器发射的信号,确定膝关节的位置,实时跟踪手术工具的位置和方向,并将隧道的虚拟路径叠加在工作界面上,供术者实时调整导向器的位置与方向,直至达到术前规划的要求。临床上完成计算机导航关节镜下前十字韧带重建术46例。对其中40例进行术后X线片测量,确定胫骨及股骨隧道的位置,并与同期进行的40例单纯关节镜下重建术隧道位置的测量结果进行比较。结果导航组胫骨隧道位置平均为45.35%±3.827%(37%￣53%),股骨隧道位置平均为62.25%±5.610%(52%￣73%);关节镜组胫骨隧道位置平均为41.05%±6.008%(25%～54%),股骨隧道位置平均为56.62%±7.316%(46%￣77%)。导航组的股骨及胫骨隧道位置较关节镜组偏后,差异有统计学意义(P<0.05),导航组的标准差小于关节镜组。结论计算机导航技术可以使关节镜下前十字韧带重建手术中胫骨及股骨隧道的位置更偏后,提高了手术准确性及可重复性。     

新加坡KK医院儿童急救部的临床路径

介绍临床路径在新加坡KK医院儿童急救部的应用。由于临床路径的开展，缩短了急诊留观时间，促进科室间合作，减少医疗纠纷，为患者提供持续性、整体性医疗服务，提高了整体医疗质量。     

肝硬化门静脉高压症患者心脏泵功能减退

心脏血流动力学参数足反映人体生命信息和心脏泵功能的重要指标.同前,尢创性血流动力学检测已广泛应用于心力衰竭、休克等危重症患者的病情监测、治疗方案的确定等,以便使患者得到科学、有效的治疗[1-2].     

无张力疝修补术治疗腹股沟嵌顿疝45例体会

目的:探讨无张力疝修补术治疗成人腹股沟嵌顿疝的临床效果。 方法：回顾性分析无张力疝修补术治疗45例腹股沟嵌顿疝患者（包括平片式修补Lichtenstein术12例、疝环充填式Rutkow术31例及经腹股沟切口Kugel腹股沟疝修补术2例）的临床资料。 结果：45例手术过程均顺利。无切口感染和排异反应，无术后死亡。所有患者术后3个月获得门诊随访，未见复发。 结论：无张力疝修补术在治疗成人腹股沟嵌顿疝有良好效果。     

IL-10在过敏性紫癜血管内皮损伤中的作用机制研究

目的　探讨白细胞介素 10 (IL 10 )在过敏性紫癜血管内皮损伤中的作用及机制。方法　建立人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)培养模型 ,ELISA法检测过敏性紫癜患儿外周血单个核细胞 (PB MC)活化后培养上清IL 6、IL 1β、TNF α、IL 10等细胞因子的含量 ;AnnexinV/PI双染色法 ,流式细胞仪检测过敏性紫癜患儿PBMC培养上清所诱导的内皮细胞凋亡率。结果　①过敏性紫癜组PBMC体外刺激活化后IL 6、IL 1β、TNF α、IL 10等细胞因子的分泌量均明显高于对照组 (P <0 0 1) ,其培养上清诱导的内皮细胞凋亡率 (34 7± 10 3) %明显高于对照组 (3 6± 0 9) %。②抗IL 6、IL 1β、TNF α单克隆抗体联合阻断可明显降低过敏性紫癜患儿PBMC培养上清诱导的内皮细胞凋亡率 (2 2 6±5 9) % ,而抗IL 10单克隆抗体阻断则明显增加过敏性紫癜患儿PBMC培养上清诱导的内皮细胞凋亡率 (5 6 9± 16 5 ) %。③于过敏性紫癜患儿PBMC培养上清加入外源性IL 10 ,可明显降低IL 6、IL 1β、INF α等炎性细胞因子的表达 ,并明显降低内皮细胞凋亡率 (11 8± 3 1) %。结论　IL 10作为机体炎症反应负反馈调节过程中的一个重要枢纽 ,在过敏性紫癜炎症因子所介导的血管内皮损伤中起重要的保护作用。     

树枝状静脉移植在手部创伤中的应用

目的探讨手掌严重碾挫伤应用血管移植手术方法的选择。方法对12例手掌碾挫伤伴血管损伤的患者，采用树枝状浅表静脉倒转后多级移植修复缺损的手掌动脉，同时对缺损皮肤一期行植皮或皮瓣修复。结果术后12例创面全部Ⅰ期愈合，手指血循环好。术后随访3～22个月，手功能评定： 优5例，良4例，可2例，差1例，优良率为75％。手掌恢复了良好的外形和功能，能完成手指的捏、握、对掌和对指功能。结论对严重的手掌毁损伤，利用树枝状静脉移植修复缺损的血管，能获得较好的手功能和外形。     

大鼠异体肢体移植术后急性排斥反应阶段血管内皮细胞ICAM-1表达的动态变化

Objective To investigate the dynamic changes of intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) expression in endothelial cells (EC) during hindlimb allograft acute rejection in rats and the inhibitory effect of cyclospofine A (CsA) on the acute rejection. Methods The rat model of hindlimb allograft was developed. The rats were randomly divided into following groups: control group (Wistar→Wistar), rejection group ( Sprague-Dawley→Wistar) and CsA-treated group (Sprague-Dawley→Wistar). At postoperative day 1, day 4 and day 7samples of the femoral artery from the allograft limb were harvested to observe the pathologic changes. ICAM-1 expression in EC was quantified using immunohistochemical assay. Results Slight swelling and weak ICAM-1expression of EC were observed in the control group. In the rejection groups, obvious EC swelling and massive lymphocyte infiltration were seen. ICAM-1 expression in EC was significantly stronger and elevated. In CsA-group only mild infiltration of lymphocytes was seen and ICAM-I expression in EC was also much weaker.Conclusion During rat hindlimb allograft acute rejection the expression of ICAM-1 in EC was closely related to the occurrence and development of acute rejection. CsA could reduce the expression of ICAM-1 in EC and hence inhibit acute rejection of composite allograft.     

头皮冠状切口的并发症及其防治

目的：对采用头皮冠状切口所引发的并发症进行分析，探讨防治策略。方法：对我科2003-01～2006—07应用头皮冠状切口行颅颌面骨折修复重建、颌面部肿瘤切除与缺损修复、先天性颅颌面畸形矫正的221例中发生并发症的40例进行分析总结。结果：18例出现头皮麻木及感觉异常，9例有较宽切口瘢痕，6例出现脱发，4例发生颞窝凹陷，2例发生头皮下血肿，2例出现单侧面神经颞支损伤，1例发生鼻眶区肥厚。结论：头皮冠状切口具有切口隐蔽、面部疤痕不明显，显露充分的优点，但对其并发症也不容忽视。应根据具体情况选择合适的切口类型，术中精细的解剖、神经血管的良好保护以及正确的缝合方法可减少并发症的发生。