心肌缺血小型猪模型差异蛋白质组学研究

目的:筛选心肌缺血相关的蛋白质,以期发现心肌缺血特征性的差异蛋白质或蛋白质群.方法:对模型动物小型猪施行冠脉Ameroid环缩术,通过对模型动物的动态观察,综合评价,并参照WHO冠心病心绞痛诊断标准,明确术后28天符合心肌缺血诊断.术后28天,动物前腔静脉取血,血样处理后进行荧光差异蛋白电泳(2D-DIGE),对差异蛋白点进行MALDI-TOF/TOF分析,获取蛋白样品的肽质量指纹图.结果:共筛选出31个差异表达蛋白质点,其中17个蛋白质点在4周模型组中下调,14个蛋白点上调.对其中15个蛋白点采用质谱技术成功鉴定.白蛋白、血红素蛋白、烟酸受体在4周模型组中低表达,CH4 and secrete domain of Swine IgM、mutated immunoglobulin heavy chain、肌球蛋白、磷脂酶C、白细胞抗原相关酪蛋白磷酸酶相关蛋白、磷酸核糖焦磷酸相关蛋白-1、Ig gamma 4 chain constant region在4周模型组中高表达.结论:初步发现碱性磷酸酶、肌球蛋白、白细胞抗原相关酪蛋白磷酸酶相关蛋白、磷酸核糖焦磷酸合成酶相关蛋白1、血红素蛋白、烟酸受体可能与心肌缺血发生发展相关.     

健脾化痰汤对大鼠脂肪肝炎症及巨噬细胞分化的影响

目的:从与炎症相关的巨噬细胞分化角度探讨健脾化痰汤防治大鼠肝细胞脂肪变性的分子机制。方法:健康SD大鼠分为,正常对照组、模型组、健脾化痰组和易善复组4组,以高脂饲料联合脂肪乳灌胃复制大鼠脂肪肝模型,观察健脾化痰汤对血清C-反应蛋白、肝组织巨噬细胞(Kuppfer细胞)分化相关的炎症因子的影响。结果:健脾化痰组的肝脏指数、血清ALT、AST、C反应蛋白含量较模型组均有下降;与模型组大鼠比较,健脾化痰组血清TG含量降低、HDL/TC提高;健脾化痰组大鼠肝组织中M2型巨噬细胞的诱导因子(IL-4)及M2型巨噬细胞分泌因子(IL-10)的mRNA表达增高。结论:健脾化痰汤对高脂饮食引起的大鼠脂肪肝、血脂增高及机体炎症状态有一定的缓解作用,对肝脏的保护作用可能与促进巨噬细胞M2分化有关。     

感染与动脉粥样硬化

动脉粥样硬化(atheroselerosis,As)是多种心脑血管疾病的病理基础,严重危害人类健康和生命.如何通过探讨As的病因及发病机制发现有效的防治措施,从而延迟和逆转As病变的进展,降低心脑血管疾病的发病率和病死率,仍是心脑血管研究领域最重要课题之一.     

祛痰化瘀方药对心血管疾病中内皮细胞保护作用的研究评述

痰瘀互结是心血管疾病的重要病因病机,治疗上宜痰瘀同治。内皮细胞具有屏障、血管调节、分泌细胞因子及免疫调节等多种功能,其形态及功能改变在心血管疾病痰瘀互结证发展过程中具有重要作用。目前研究发现,祛痰化瘀药物多用全瓜蒌、薤白、半夏、陈皮、川芎等,其作用主要集中在影响内皮细胞增殖、凋亡,以及调节内皮细胞分泌活性物质如一氧化氮、内皮素、血管内皮生长因子、白介素等方面。本文试从祛痰化瘀方药对高脂血症与动脉粥样硬化、高血压及冠心病等常见心血管疾病中内皮细胞的保护作用做一综述。     

维甲酸诱导HL-60细胞Fas蛋白表达

目的：探讨全反式维甲酸（ＡＴＲＡ）和９顺式维甲酸（９ｃｉｓＲＡ）对ＨＬ６０细胞Ｆａｓ表达水平及维甲酸对抗Ｆａｓ抗体诱导的细胞凋亡敏感性的影响。方法：用流式细胞仪检测ＨＬ６０细胞膜Ｆａｓ蛋白表达水平；分别采用形态学观察、ＤＮＡ电泳和流式细胞仪检测抗Ｆａｓ抗体诱导的细胞凋亡。结果：ＨＬ６０细胞Ｆａｓ弱表达。经１０－６ｍｏｌ／ＬＡＴＲＡ或９ｃｉｓＲＡ分别预处理４天后，ＨＬ６０细胞Ｆａｓ表达水平及对抗Ｆａｓ抗体诱导凋亡的敏感性均显著提高。９ｃｉｓＲＡ提高ＨＬ６０细胞对抗Ｆａｓ抗体诱导凋亡的敏感性的能力强于ＡＴＲＡ。结论：维甲酸可上调ＨＬ６０细胞表达Ｆａｓ，这可能与维甲酸诱导ＨＬ６０细胞分化相关。进一步深入探讨其分子机制，将为肿瘤治疗，特别是自体骨髓移植中骨髓净化提供新方法     

宫颈鳞状上皮癌蜡块中 HPV16 感染检测方法的比较研究

分别用原位杂交（ＩＳＨ）、多聚酶链反应（ＰＣＲ）和原位多聚酶链反应（ＩＳ－ＰＣＲ）方法，检测３９例宫颈鳞状上皮癌石蜡切片中ＨＰＶ的感染。ＩＳＨ的检出率为４６．２％（１７／３９），明显低于ＩＳ－ＰＣＲ的６６．７％（２６／３９，Ｐ＜０．０１）和ＰＣＲ的８４．６％（３３／３９，Ｐ＜０．０１）。用常规ＩＳＨ和地高辛标记探针能检出宫颈鳞状上皮癌ＨＰＶ１６感染的表皮细胞，而用ＩＳ－ＰＣＲ方法在同样标本中可显示出更多的ＨＰＶ１６阳性表皮细胞，并且着色更深。ＰＣＲ方法敏感性最高，但它不能用于组织细胞内的ＨＰＶ１６ＤＮＡ精确定位。     

反义c－myc寡脱氧核苷酸抑制血管平滑肌细胞的增殖、迁移和诱导其凋亡作用的研究

反义ｃ－ｍｙｃ寡脱氧核苷酸抑制血管平滑肌细胞的增殖、迁移和诱导其凋亡作用的研究首都医科大学电镜室马雅銮，王家宁，高天祥经皮腔内冠状动脉成形术后再狭窄发生中，平滑肌细胞的增殖、迁移及凋亡起很重要的作用。ｃ－ｍｙｃ是各种有丝分裂原刺激后的早期反应基因。转...     

单结合与非结合胆红素水溶液的电镜动态对比观察及其与胆石形成的关系

目的 通过对单结合胆红素(monoconjugated bilirubin,MCB)水溶液超微形态及早期动态变化进行观察并与非结合胆红素(unconjugated bilirubin,UCB)对照,探讨MCB与胆石形成的关系;为MCB和UCB在胆汁中的超微形态提供参考依据.方法 用透射电镜对MCB与UCB的相对生理水溶液进行了动态观察.结果 发现MCB的动态变化可分为4个阶段:(1)出现微小颗粒组成的圆形聚集物;(2)微小颗粒消失,融合成等大的融合物;(3)融合物进一步聚集成较大融合物;(4)较大融合物周边出现溶化现象,同时析出小规则类似UCB超微形态物.UCB的动态变化可分为3个阶段:(1)出现大小不等块状物;(2)块状物有聚集趋势,没有熔化与融合现象;(3)聚集物进一步聚集增大.结论 MCB的水溶解度较小,容易从胆汁析出并聚集,其理化性质不稳定,早期形态变化活跃,可能在胆石形成的始动期起重要作用;UCB理化性质稳定,在胆汁中也容易聚集、沉淀形成胆石.     

黄连解毒汤对高脂血症小鼠肝脏保护作用的观察

目的 观察黄连解毒汤对高脂饮食导致的载脂蛋白E（apolipoprotein E,ApoE）基因敲除（ApoE－/－）小鼠肝脏损伤的保护作用。方法 野生型小鼠分为野生普食组、野生高脂组,ApoE－/－小鼠分为ApoE－/－普食组、ApoE－/－高脂组、ApoE－/－高脂加中药组,每组5只,分别给予普食和高脂饮食4周。ApoE－/－高脂加中药组同时给予黄连解毒汤5 g/（kg·d）灌胃。检测小鼠血浆总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平,HE染色观察肝脏病理组织变化,流式细胞仪检测肝脏巨噬细胞及其亚型比例和巨噬细胞表面受体CD206、CD36表达水平。结果 ApoE－/－高脂组小鼠肝脏组织呈典型单纯性脂肪肝病理变化,TC、TG、LDL-C升高,巨噬细胞比例增多,巨噬细胞表面受体CD206表达水平降低,与ApoE－/－普食组比较,差异均有统计学意义（P<0.01, P<0.05）;CD206+替代活化型（alternatively activated macrophages,M2型）巨噬细胞比例较野生普食组显著减少（P<0.05）;CD36表达水平无明显变化。黄连解毒汤干预4周后,血脂无明显改善,但肝脏CD206+M2型巨噬细胞比例较ApoE－/－高脂组显著提高（P<0.05）,肝脏脂肪肝病理变化显著减轻。结论 黄连解毒汤的肝脏保护功能可能与M2型巨噬细胞免疫调节、修复损伤组织有关,其免疫调节作用和肝脏保护作用独立于降脂作用。     

高脂血症和动脉粥样硬化不同痰瘀证候患者血浆蛋白质差异表达谱与脏腑功能的关系

目的：探讨高脂血症及动脉粥样硬化不同痰瘀证候患者血浆特异性蛋白质群与脏腑功能之间的相关性。方法：采用中医证候诊断，观察146例高脂血症及动脉粥样硬化不同痰瘀证候病人的脏腑功能状况。获取病人的血浆样品进行二维凝胶电泳，对差异表达蛋白进行二级质谱分析，寻找可区别不同痰瘀证候的特异性标志蛋白群。采用图模型分析方法研究不同痰瘀证候可能的标志蛋白与脏腑功能之间的相关性。结果：区分高脂血症及动脉粥样硬化病人中医痰证与痰瘀互阻证可能的标志蛋白群中纤维蛋白原丫链、白蛋白及载脂蛋白AI前体主要与心气虚、肾气虚及脾气虚有关；区分痰证与血瘀证可能的4种标志蛋白质中，白蛋白和肾上腺髓质素结合蛋白前体与心气虚、肾气虚均有关，结合珠蛋白前体只与肾气虚有关，并通过肾上腺髓质素结合蛋白前体与心气虚相关，补体C4与之均无关；区分血瘀证与痰瘀互阻证可能的标志蛋白群中自蛋白与心气虚、肾气虚及脾气虚均有关，而肾上腺髓质素结合蛋白前体只与脾气虚相关；区分非痰非瘀类与痰瘀类证候可能的标志蛋白纤维蛋白原J3链主要与肾气虚有关，载脂蛋白AI前体主要与肾气虚及心气虚有关。结论：高脂血症及动脉粥样硬化不同痰瘀证候可能的血浆标志蛋白与不同的脏腑功能之间存在不同的关联组合。