反义技术及其抗HBV研究进展

反义技术是采用反义核酸分子抑制、封闭或破坏靶基因组的技术手段,包括反义DNA、反义RNA及核酸等。反义分子通过与靶基因异性互补配对结合,阴断靶基因的复制、转录或翻译过程,从而发挥抗病毒作用。本文就反义核酸抗HBV研究进展作一综述,就反义核酸抗HBV存在的问题及发展趋势作一讨论。     

定量PCR技术研究概述

本文就定量PCR检测时的参照物及定量PCR的方法作一慨述。     

两种HBV DNA检测法对干扰素治疗慢性乙肝的疗效评估

目的以斑点杂交法及PCR定量检测法评价干扰素抗HBV的疗效。方法90例慢性乙肝患者干扰素治疗前后均同时用两种方法检测血清HBVDNA。结果HBVDNA定量在总体上呈下降趋势。治疗后 2个月末与 4个月末其病毒拷贝数分别为 5 .83± 1.0 5 ,5 .75± 1.2 1,与治疗前 6 .74± 1.6 8相比差异均有显著性 (P <0 .0 5 )。HBVDNA定量PCR较斑点杂交更能反映干扰素治疗过程中患者外围血内病毒拷贝数的增长。结论两种方法均能灵敏地反映干扰素抗HBV的疗效 ,但在实际中定量PCR更灵敏。     

胸腺素及干扰素基因表达对乙型肝炎基因疫苗的免疫增强效应

目的观察胸腺素及干扰素基因表达对乙型肝炎基因疫苗pVAX1-S2S的免疫增强效应。方法从乙型肝炎患者血清中扩增S2S基因，构建表达质粒PVAX1—S2S。从成人外周血白细胞总RNA中，逆转录聚合酶链反应扩增干扰素α基因Ⅰ，将其与S2S相连接，构建重组表达质粒PVAX1—I／S2S；将干扰素α基因Ⅰ与人工合成的胸腺素α基因T相连接，构建重组表达质粒pVAX—T／I。将上述表达质粒分组肌肉接种BALB／c小鼠：单独免疫组接种pVAX1-S2S 100μg；联合免疫组1：接种pVAX1—I／S2S 100μg；联合免疫组2：每只小鼠同时接种pVAX1—T／I与pVAX1-S2S各50μg。上述各组于2、4周后分别加强免疫1次。然后动态检测小鼠血清抗-HBS和前S2抗体。结果接种后3、5、8周，小鼠血清抗-HBS阳转率：联合免疫组1分别为12．5％、12．5％、62．5％；联合免疫组2分别为25％、50％、50％，二者总体上均优于pVAX1—S2S单独免疫组。联合免疫组2的前S2抗体水平则高于其它两组。结论胸腺素α1和(或)干扰素α8基因的表达具有分子免疫佐剂的效应，能够增强乙型肝炎基因疫苗的特异性体液免疫诱生效力。     

HBeAg、HBV DNA斑点杂交以及定量PCR检测在评价干扰素抗HBV疗效的价值探讨

目的：免疫学检测HBeAg斑点杂交法及PCR定量检测法检测HBV DNA评价干扰素HBV的疗效。方法：对纳入治疗组的慢性乙肝患者治疗前后均同时检测乙肝两对半用两种方法检测血清HBV DNA。结果：干扰素完全应答者HBV DNA转阴较HBeAg发生早；HBV DNA定量在总体上呈下降趋势。HBV DNA定量PCR较斑点杂交更能反映干扰素治疗过程中患者外围血内病毒拷贝数据的增长。结论：两种方法均能灵敏地反映干扰素抗HBV的疗效，但在实际中各有所长。     

合肥市安庆路街道常住老年居民健康状况及卫生服务需求调查

目的　了解合肥市安庆路街道老年人慢性病的患病状况 ,探讨社区卫生服务内容 ,为社区综合防治提供依据。方法　对 11个居委会 6 0岁以上老年居民采用调查表进行面对面的调查。结果　调查 1831位社区老年居民 ,患有慢性病前 10位病种依次为高血压、冠心病、高血脂、白内障、慢支、糖尿病、胆道疾病、前列腺疾病、骨质增生、胃肠疾病 ,老年居民最需要的社区卫生服务依次为健康咨询、家庭病床、上门护理康复服务。结论　针对社区老年居民的健康状况和卫生需求 ,应立足社区开展全方位老年社区卫生服务 ,广泛开展健康教育和健康促进 ,努力提高社区居民的健康水平和生活质量     

分子佐剂小鼠补体C3d基因的克隆与序列分析

目的 构建C3d的真核表达质粒，以期将其作为分子佐剂，提高核酸疫苗的免疫效能。方法 采用PCR技术扩增小鼠补体C3d基因（897bp)，并将其克隆至pGEM-T 载体上；经鉴定其DNA序列正确；再将其亚克隆至真核表达载体pVAX1上。结果 经DNA测序证实了该克隆片段为小鼠补体C3dA基因，可进一步用于基因表达和基因治疗的研究。结论 构建了C3d真核表达质粒，为高效核酸疫苗的研究打下了良好的基础。     

合肥市社区家庭户主对社区卫生服务的态度、意愿及行为调查分析

目的了解合肥市家庭户主对社区卫生服务（CHS）的态度意愿及行为。方法在合肥市39所CHS中心服务辖区内随机选择40户家庭户主为调查对象,采用人户访谈获取资料。结果1．家庭户主对CHS“了解”程度较低,“了解”程度与性别（P=0．007,OR=0．646）、文化程度（P〈0．001,OR：1．663）有关;2．在了解CHS的基础上,70．6％的家庭户主对CHS的态度趋向积极、正向;3．家庭户主对CHS“满意度”评价偏低;4．家庭户主需要卫生服务时首选CHS机构与性别、文化程度及CHS了解程度有关。结论1．加强CHS的宣传教育;2．采取适当的策略改进社区居民对CHS态度;3．不断丰富、完善优质CHS的内涵。     

合肥市社区卫生服务机构发展现况分析

目的了解合肥市社区卫生服务(CHS)机构发展现况及缺陷。方法问卷调查合肥市115所CHS机构的建立时间、经营方式、业务用房来源及面积、科室设置、药品种数、工作人员数等。结果CHS中心和站平均服务半径为3.8km和1.8km;平均业务用房面积分别为1359m2和175m2;平均有卫生技术人员29.4人和6.0人。大多数CHS机构被列为医保定点单位;CHS中心平均提供西药和中成药471种,CHS站平均提供411种;CHS中心平均设置床位30张,CHS站平均设置观察病床3.7张。结论CHS中心(站)的工作人员数、床位数、药品品种和数量等均达标;但需加强网络构建,完善"六位一体"服务功能,加强对民营或私营CHS机构的监管。