白血病细胞TGFβ1及其受体基因表达与白血病患者血清TGFβ1测定及其意义

目的:研究转化生长因子β_1(TGFβ_1)对白血病细胞增殖抑制作用的机制及急性白血病患者血清TGFβ_1变化及意义。方法:应用逆转录-聚合酶链反应方法检测白血病细胞的细胞因子及其受体基因表达;应用白血病细胞集落试验测定TGFβ_1对HL-60、DAMI、K562细胞增殖的作用;应用ELISA方法测定33例急性白血病患者血清TGFβ_1水平。结果:TGFβ_1对HL-60、K562、DAMI细胞增殖具有明显的抑制作用;白血病细胞系(HEL、HL-60、K562、U937、DAMI、MEG-01、HUT78)及CA均表达TGFβ_1及其受体mRNA。外源性TGFβ_1抑制DAMI细胞IL-6、IL-6R、GM-CSFR及IL-3的基因表达,上调DAMI细胞本身TGFβ_1表达,并诱导DAMI细胞凋亡。白血病患者血清TGFβ_1水平明显减低;患者达完全缓解时,该水平恢复正常;复发时,该水平又趋减低。结论:TGFβ_1是白血病细胞抑制性自泌因子;其抑制作用与其调控白血病细胞的细胞因子与受体表达有关;血清TGFβ_1水平是监测白血病病情转归的一项有价值指标;TGFβ_1作为负调控因子在白血病发病机制中可能起重要作用。     

急性髓系白血病HGFA、Matriptase、HAI-1、HAI-2表达水平及临床意义

目的:探讨HGFA、Matriptase、HAI-1、HAI-2在急性髓系白血病患者中的表达水平及其临床意义。方法:收集91例急性髓系白血病初治患者、41例急性髓系白血病缓解患者和32例正常人的骨髓标本,利用实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)法检测髓系白血病细胞HGFA、Matriptase、HAI-1、HAI-2 mRNA表达水平;比较上述基因在人急性髓系白血病患者初治组和缓解组以及健康对照组中的表达情况;分析其表达情况与其临床特征的相关性。结果:在AML初治组HGFA水平高于健康对照组(P=0.010);而HAI-2 mRNA水平则低于健康对照组(P=0.0158),但均与AML缓解组无统计学差异。HAI-1、Matriptase mRNA水平在各组中均无明显差异。在高白细胞组中HAI-2 mRNA表达较低(P=0.03902)。结论:HGF/c-Met信号系统在AML中的异常激活,有可能是其上游的调控因子HGFA表达增高和HAI-2表达降低的结果。     

姜黄素对人白血病K562细胞凋亡的影响

Ｋ５６２细胞对多种化疗药物诱导凋亡具有抗性，本文以ＡＯ／ＥＢ染色法、细胞分光光度术、ＤＮＡ凝胶电泳及电镜观察等方法，发现姜黄素可显著诱导Ｋ５６２细胞凋亡，提示该药对治疗慢性粒细胞性白血病可能有价值。     

姜黄素对K562细胞增殖的影响及其与P210~(bcr/abl)激活的Ras信号途径的关系

目的　研究姜黄素 (Cur)对慢性粒细胞白血病 (CML)细胞株K5 62增殖的影响 ,并且探讨这种影响与P2 10 bcr/abl及其激活的Ras信号途径的关系。方法　应用MTT法检测Cur对细胞增殖的影响 ,应用Westernblot的方法检测蛋白含量的变化。结果　Cur对P2 10 bcr/abl阳性的K5 62细胞抑制作用呈量效、时效关系 ,Cur 10mg·L-1作用 48h对K5 62细胞的抑制率高达 (81 9± 1 0 ) % ;相比之下 ,已知对P2 10 bcr/abl无影响的VP 16作为抗癌药对照 ,对K5 62细胞的抑制作用明显较弱。Cur和VP 16对K5 62细胞的不同作用提示Cur对K5 62细胞作用可能有特异性 ,而这个特异的作用靶点可能就是引起CML对多种化疗药物耐药的CML特征性的P2 10 bcr/abl蛋白。Westernblot的实验结果表明Cur使K5 62细胞P2 10 bcr/abl、MEK 1和c Jun蛋白含量明显减少 ,且呈量效关系 ,相比之下 ,VP 16对K5 62细胞P2 10 bcr/abl的蛋白含量无影响而仅轻微减少MEK 1和c Jun的蛋白含量 ,提示MEK 1和c Jun蛋白含量的减少是非特异性的 ,并且 ,在P2 10 bcr/abl阳性的K5 62细胞 ,Cur除了非特异性地抑制细胞中MEK 1及c Jun的表达外 ,Cur还可能通过特异性地抑制K5 62细胞的特异性靶点P2 10 bcr/abl的表达 ,从而下调其下游的Ras信号途径中的其它信号分子。结论　Cur可特     

高效液相色谱测定大鼠血浆中雷公藤甲素含量的方法改进

目的改进以高效液相色谱测定大鼠血浆中雷公藤甲素含量的方法。方法采用乙酸乙酯萃取的方法处理血浆。色谱柱为Agilent HC C18，流动相为乙腈-水（23：77），流速为1．0ml／min，检测波长为221nm，进样量为20ul。结果雷公藤甲素检测浓度在12．5～200ng／ml范围内线性关系良好（r=0．9997），最低检测限为3ng／ml，方法的相对回收率为88．6％-98.3％，日内和日间41KSD〈10％．样品冻-20℃冰箱10天内稳定性良好。结论本方法操作简便，灵敏度和精确度高．重现性好，适于雷公藤甲素的体内药物浓度测定和药动学研究。     

姜黄素诱导人慢粒白血病K562细胞凋亡与线粒体途径的关系

目的研究姜黄素（Cur）对慢性粒细胞白血病（CML）细胞株K562的作用，并且探讨该作用与线粒体凋亡途径的关系。方法应用MTT法检测Cur对细胞增殖的影响，AO／EB荧光染色法、细胞光度术、DNA凝胶电泳等方法观察细胞凋亡，分光光度法检测Caspase-3的活性，用蛋白免疫印迹法检测细胞色素C的含量。结果Cur对K562细胞抑制作用呈量效、时效关系；Cur对人正常骨髓单个核细胞与K562细胞之间有一定的选择性，对K562细胞的敏感性约为人正常骨髓单个核细胞的5倍，在对K562细胞抑制超过95％时，对人正常骨髓有核细胞几无毒性。Cur5．0，10．00g／mL作用24h，可诱导K562细胞凋亡，促进细胞色素C释放，激活caspase-3。结论Cur可通过线粒体途径诱导人慢性粒细胞白血病K562细胞凋亡。     

纤维连接蛋白在肿瘤及抗感染研究的进展

纤维连接蛋白(FN)是细胞外基质的重要成份,为一种具有多种功能的糖蛋白大分子,参与细胞的黏附、迁移、止血、损伤修复等过程,在抗感染、维持微血管的完整性等方面具有重要作用,曾有“调理性α2表面结合蛋白“、“细胞表面蛋白“及“细胞黏附因子“之称.FN主要由肝细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞、巨噬细胞、成肌细胞、成软骨细胞等产生.FN分子结构中含有各种结构域,能选择性地与细胞外基质中各种大分子,如胶原、肝素、纤维蛋白以及各种细胞表面整合素受体结合,发挥多种生物学效应[1].近年来,对FN的结构、功能研究,尤其在肿瘤及抗感染研究中取得了很大的进展,笔者就此作一综述.……     

深静脉血栓形成的肝素应用

深静脉血栓形成(Deep Vein Theombosis．DVT)习指发生于下肢深静脉的血栓，但DVT也可发生于其他部位。上海中山医院1957-1988年间收冶的173例DVT中，发生于下肢深静脉者136例，上腔静脉者11例，上肢静脉12例。     

细胞因子、类肝素物质对正常巨核细胞生成的作用及巨核细胞白血病细胞因子和受体表达与调控研究

细胞因子、类肝素物质对正常巨核细胞生成的作用及巨核细胞白血病细胞因子和受体表达与调控研究专业血液病学博士研究生陈元仲导师吕联煌教授韩忠朝教授顾学范博士ＣａｅｎＪＰ教授导师组成员（法国巴黎血管血液研究所）研究内容主要包括下述三个方面：（１）以正常鼠巨核...