过氧麦角甾EP化合物的反相高效液相色谱测定方法的建立

采用国产高效液相色谱柱YwG C18(252mm×4.6mm,10μm),以甲醇水(955)为流动相,流速1.0ml/min,室温操作,检测波长201nm,对粘帚霉属真菌(F菌)中产生的新型生物活性化合物6,22-二烯-3-羟基-5,8-过氧麦角甾(简称EP)进行了分离与测定,其线性范围为0.094～3.76μg(r=0.9995),回收率为(96.8士0.0103)%(n=6),RSD为1.02%.该方法简便、快捷、准确.     

真菌在罗河石斛和铁皮石斛种子萌发中的作用

本实验证明,从兰科植物原球茎中分离的3种真菌对促进石斛种子萌发有显著效果,采用种子伴菌播种方法,罗河石斛种子发芽率达20％,铁皮石斛种子发芽率达64％,而无菌播种则无1粒种子萌发。对铁皮石斛种子接菌萌发中细胞超微结构的变化进行观察,菌丝由胚柄侵入种胚,染菌的胚细胞器消失;菌丝被胚细胞质包围并加厚,菌丝逐渐被分解作为胚萌发的营养物质,邻近染菌细胞的未染菌胚细胞代谢功能旺盛。     

促进天麻等兰科药用植物种子萌发的真菌初生产物分析

本文对促进天麻等兰科药用植物种子萌发的7种真菌,进行了氨基酸、蛋白质、总糖、还原糖及微量元素含量测定。结果表明不同真菌上述物质的含量有差异。结合兰科植物种子萌发的生理特点,阐述了真菌促进种子萌发的物质机制。     

金线莲ISSR反应体系的建立与优化

目的针对台湾金线莲ISSR反应的特点,建立一个稳定性高、重现性好,适合金线莲ISSR遗传差异分析的反应体系。方法确立金线莲ISSR初始反应体系并对引物进行初筛;设定反应体系中各因子的不同浓度并进行PCR扩增,依据稳定性高、重现性好的原则,对该反应体系进行调整与优化,最终建立稳定可靠的ISSR反应体系。结果首次建立了金线莲ISSR反应的最适体系(25μL):1×PCR buffer,2 mmol/L MgCl2,200μmol/L dNTP Mixture,0.2μmol/L引物,1 U Taq酶,DNA模板约20 ng;扩增程序:94℃充分变性7 min,94℃变性30 s,52℃退火45 s,72℃延伸2 min,45个循环后,最后72℃延伸10 min。结论所建立的金线莲ISSR反应体系具有稳定性高、重现性好、标记位点清晰、检测多态性能力强等特点,可以较好地应用于野生金线莲的居群差异研究及经长期组培繁殖后金线莲无菌苗的遗传变异研究。     

雪莲自微乳制剂中芦丁含量测定及理化性质的研究

目的:HPLC法测定天山雪莲自微乳制剂中芦丁的含量。方法:色谱柱:DikmaC18(150mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇-1%醋酸(4:6,pH2.40);检测波长:257nm;流速:1mL.min-1;进样量20μL。结果:芦丁在1-200μg.mL-1内,峰面积与其浓度呈良好线性关系。雪莲-SMEDDS的载药量为6.56%。微乳的平均粒径小于50nm,形态符合要求。结论:HPLC方法测定雪莲自微乳制剂中芦丁含量,结果准确可行。     

铁皮石斛种子接菌共生萌发抑制差减杂交文库的构建及序列分析

 目的 研究铁皮石斛（Dendrobium officinale）种子接菌共生萌发差异基因表达谱特征。方法 采用抑制差减杂交（SSH）技术,分别以接菌及未接菌培养5周的铁皮石斛种子cDNA作为检测子与驱赶子,构建铁皮石斛种子接菌共生萌发抑制性消减cDNA文库。结果 对部分克隆产物测序,经GenBank中BLASTx同源比较后,进行基因功能注释,得到100个具有植物同源性的表达序列标签（EST）,主要涉及细胞与染色体结构、RNA合成、信号转导、能量与代谢、蛋白质合成与降解及细胞防御等。随机挑选5个目标基因,实时荧光定量PCR分析发现这5个基因在共生萌发的种子中均上调表达。结论 铁皮石斛种子接菌共生萌发涉及多种途径相关基因表达调控,本实验为兰科植物种子萌发分子机制研究奠定基础。     

齿瓣石斛化学成分研究

 目的 研究齿瓣石斛的化学成分。方法 应用硅胶、凝胶和制备液相层析等方法分离得到单体化合物,通过理化常数和波谱分析鉴定化合物的结构。结果 从齿瓣石斛体积分数95%乙醇提取物中分离得到25个化合物,分别鉴定为3-羟基-4′,5-二甲氧基联苄(1),3,4′,5-三羟基-3′-甲氧基联苄(2),3,4′,5-三羟基联苄(3),N-反式-香豆酰酪胺(4), N-反式-对羟基苯乙基咖啡酰胺(5), 对羟基苯丙酰酪胺(6),N-顺式-香豆酰酪胺(7), 2,5-二羟基-4-甲氧基-9,10-二氢菲(8),2,4,7-三羟基-9,10-二氢菲(9),柚皮素(10),二氢松柏醇乙酸酯(11),对羟基桂皮酸乙酯(12),对羟基桂皮酸(13),对羟基苯丙酸(14),对羟基苯甲酸(15),原儿茶酸(16),erigeside Ⅱ(17),枸橼苦素(18),二氢丁香苷(19),leonuriside A(20),腺苷(21),β-谷甾醇(22),胡萝卜苷(23),(+)-丁香脂素-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(24),蔗糖(25)。结论 化合物1~21,24~25均为首次从齿瓣石斛中分离得到,其中,化合物1为首次从石斛属植物中分得,化合物5、7、11、12、18为首次从兰科植物中分得。     

植物内生真菌活性成分的研究

综述了近5年来从植物内生真菌中发现的具有生物活性的化合物及其作用机制,为新药研发提供新的天然产物和研究思路。其结构类型主要有萜类、酮类、异香豆素类、醌类、生物碱类、苯并呋喃类、多肽类等,其生物学活性主要为抗菌、抗肿瘤、抗疟、抗结核、抗氧化等作用,就目前植物内生真菌次生代谢产物研究存在问题及今后研究方向进行讨论。     

促进天麻等兰科药用植物种子萌发的真菌酯酶同工酶研究

 用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术，对促进天麻等兰科药用植物种子萌发的6种真菌进行了酯酶同工酶分析，获得了各自稳定的同工酶谱。其中5种真菌的酯酶与已知的紫萁小菇相比，酶带数及迁移率均有差异，故其分类地位有待进一步鉴定。同时对酶谱变化与真菌生物学特性的相关性进行了阐述。     

引种西洋参有效成分含量变化的研究

 本文报道了引种西洋参的参根、参须和美国产西洋参中总皂甙、氨基酸及微量元素的含量变化。结果表明，总皂甙含量：引种西洋参的参根同美国西洋参接近，以参须含量最高；总氨基酸含量：引种西洋参的参根＞参须＞美国西洋参；微量元素含量：参须＞参根＞美国西洋参。引种的西洋参加工时，水煮后干燥的参根比直接干燥的参根总皂甙、氨基酸及微量元素的含量显著降低。