脐带间充质干细胞对角膜内皮细胞增殖能力的影响

目的:探讨并优化人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)体外获取及培养增殖的方法并鉴定;观察兔角膜内皮细胞(cornea endothelial cells,CEC)与hUCMSCs共培养后增殖能力及细胞周期的变化.方法:用酶消化法体外分离培养hUCMSCs,流式细胞仪检测hUCMSCs免疫表型:将CEC分别与hUCMSCs、兔角膜基质细胞在Transwell体系中共培养,通过流式细胞术观察内皮细胞增殖能力及细胞周期的变化.结果:采用酶消化法能有效分离纯化hUCMSCs.接种24 h,贴壁细胞形态多为长梭形、多边形或成纤维细胞样形态,大小均一.流式细胞仪分析第3代细胞均表达CD29、CD44、CD105,不表达造血干细胞标记CD34、CD45和HLA-DR.与空白对照组CEC周期比较脐带间充质干细胞组与基质细胞组角膜内皮细胞S期细胞比例增加.G1期细胞比例下降,干细胞组增加幅度高于基质细胞组.干细胞组角膜内皮细胞S期细胞比例比空白对照组的平均增加近17%,增殖能力显著提高.结论:经鉴定用酶消化法体外能成功分离培养出hUCMSCs,将其与CEC共培养能促进CEC增殖.     

肾纤维囊为载体培养角膜内皮细胞的实验研究

目的探索以脱细胞的肾纤维囊作为载体培养角膜内皮细胞并研究角膜内皮细胞特性。方法将培养扩增的角膜内皮细胞分别接种到培养板和肾纤维囊上进行体外培养,采用倒置显微镜、免疫荧光、HE染色和扫描电镜的方法进行检测,观察角膜内皮细胞在培养板和肾纤维囊上的生长情况。结果角膜内皮细胞在肾纤维囊上快速贴壁生长并增殖,细胞形态为多角形或六边形,多次传代后细胞仍维持原有的形态和功能,细胞能长期培养。在培养板上培养的角膜内皮细胞贴壁生长和增殖情况稍差。结论角膜内皮细胞在脱细胞的肾纤维囊载体上生长良好,细胞形态结构明显。本研究为角膜内皮细胞的体外培养提供了简单和高效的方法。     

经鼻内窥镜视神经管减压术的解剖和临床研究

测量了160侧成人颅骨标本鼻前林到视神经管眶口内侧壁中点和蝶筛胆突角的距离及角度分别为60.16mm、44．1°和63．17mm、42．9°；视神经营眶口、颅口的横径和纵径分别为3．98，4．64，4．85，4．08mm；视神经管内侧壁的长度为9．64mm。观察了视神经管内侧壁与后组筛窦、蝶窦外侧壁之间毗邻关系和视种经管与颈内动脉、眼动脉与视神经走行之间的关系，为经鼻内窥镜视神经管减压术提供了较确切的解剖参考依据，有利于提高手术疗效和防止并发症。采用经鼻内窥镜鼻内筛蝶窦进路视神经营减压水10例，其中6例病人术后视力明显提高，分别从本前的无光感、眼前手动、50cm指数、眼前手动、无光感、无光感提高到本后的0．2、0．3、0．3 2、0．4、0.06、0．3，随访时间2月～1年。认为该手术过程简单，术中出血少，损伤小，手术时间明显缩短，具有更多的实用性，应作为目前治疗视神经外伤的首选手术方法。     

兔角膜重度碱烧伤后异种猫前板层角膜移植重建角膜眼表

目的研究猫新鲜前板层角膜移植治疗兔右眼角膜重度碱烧伤的疗效。方法将16只5个月龄的健康雄性新西兰白兔右眼制作重度角膜碱烧伤模型,随机分成A、B两组,每组各8只兔,其中A组为猫(4只)→兔异种前板层角膜移植组,植片直径为11.0mm,植床直径为10.0mm;B组未行手术。A组兔术后及B组造模后用500g.L-1葡萄糖及复方氯霉素滴术眼直至处死,记录两组疗效指数,并分别于术后1个月、2个月、3个月取材进行术眼角膜病理学及扫描电镜检查。结果3个月内A组8只角膜碱烧伤兔经异种猫前板层角膜移植后,7只移植角膜保持透明,1只出现局限性角膜混浊和角膜新生血管;而B组未手术的8只兔中出现角膜白斑、新生血管4只,角膜溃疡、穿孔3只,角膜溶解穿孔1只,并且有4只发生睑球粘连等并发症。A、B两组治疗后1个月、2个月、3个月平均疗效指数差异均有统计学意义(均为P<0.05)。A组透明角膜中组织学及扫描电镜下的结构特征清晰;B组兔角膜中有明显的角膜水肿和炎性细胞浸润,组织学及扫描电镜下的结构特征显示细胞连接混乱、消失。B组扫描电镜还提示随着时间的延长,上皮细胞部分生长、增多,细胞连接差,角膜上皮排列紊乱;角膜内皮细胞数量明显减少或无,...     

大鼠角膜碱、酸、热烧伤后ICAM-1、VCAM-1、CD44及E-selectin mRNA的表达

目的 利用RT-PCR法检测大鼠角膜烧伤后角膜局部ICAM-1、VCAM-1、CD44及E-selectin的mRNA表达情况,探讨黏附分子在角膜烧伤中的变化,以进一步完善角膜烧伤的免疫机制.方法 制备Wistar大鼠角膜碱、酸、热烧伤模型.提取大鼠烧伤后3 d和2周角膜RNA,反转录扩增ICAM-1、VCAM-1、CD44及E-selectin,根据DNA条带的光密度值确定DNA含量.观察烧伤后3 d和2周以上各指标的变化.结果 角膜烧伤后3 d,与正常对照组(1.658±0.722)相比,3个烧伤组ICAM-1 mRNA表达量增加(5.699±0.934、3.182±0.830、3.403±0.916),差异均有显著统计学意义(均为P<0.01);2周时,3个烧伤组ICAM-1 mRNA较3 d时明显减少,其中碱烧伤组伤后3 d和2周ICAM-1 mRNA的表达量均较酸和热烧伤组明显增多,差异均有显著统计学意义(均为P<0.01).同正常对照组(2.172±0.368)相比,烧伤后2周时,碱烧伤组VCAM-1 mRNA表达量(8.591±1.021)增多,差异有极显著统计学意义(P<0.001),而酸和热烧伤组差异均无显著统计学意义.同正常对照组(1.402±0.439)相比,伤后3 d时3个烧伤组CD44 mRNA表达量无显著变化,2周时碱烧伤组CD44 mRNA表达量(5.587±0.753)增加,与对照组比较,差异有显著统计学意义(P<0.01),酸和热烧伤组CD44 mRNA表达量增加,但差异无统计学意义.3 d时角膜各烧伤组E-selectin的表达量低于正常对照组,差异均有显著统计学意义(均为P<0.01);2周时各烧伤组E-selectin mRNA的表达量明显增加,高于正常对照组,差异均有显著统计学意义(均为P<0.01),3个烧伤组间差异无显著统计学意义.结论 在角膜烧伤的急性期,ICAM-1介导中性粒细胞与血管内皮细胞的黏附,表达增加.CD44及其配体在角膜烧伤特别是角膜碱烧伤的愈合过程中发挥重要作用.作为介导白细胞与血管内皮细胞最初黏附过程的黏附分子,E-selectin在角膜烧伤的病理发生中的作用机制有待于进一步研究.     

天麻种子萌发动态及紫萁小菇菌丝侵入的细胞学观察

天麻种子靠消化侵入胚细胞的真菌——紫萁小菇等一类萌发菌获得营养而发芽。紫萁小菇以菌丝形态由胚柄细胞侵入胚,被原胚体细胞消化、吸收,分生细胞即开始分裂。初步被消化的菌丝由菌丝结集细胞侵入大型细胞,被最终消化。分生细胞不断获得营养,旺盛分裂,胚体长大突破种皮而发芽。     

干冻硬脑膜在眼睑整形中的应用

眼睑疤痕组织如与骨膜粘连,则出现局限性塌陷,手术时除了松解疤痕性牵引外,还要切除疤痕组织,使组织缺损更多,如果不加充填,更不美观。常用的充填物有:自身肌肉、筋膜、软骨、硅胶或其他生物制品。干冻硬脑膜就是其中之一种。最近我们试用西德干冻硬脑膜作为充填物,效果尚满意,介绍如下:例1 罗××女18岁广州市人住院号9731 4岁时因右下睑生脓疮,破溃流脓,治愈后,右下睑结膜外翻。1984年11月1日来院就诊。全身检查:身材矮小,体重28kg,小儿面容,营养中等,神志清,检查合作,其他无异常。     

用角膜上皮片移植治疗大面积睑球粘连

我科自1983年治疗睑球粘连9例(10眼)其中用同种和异种角膜上皮片移植治疗大面积睑球粘连4例(4眼)获较满意的效果,移植片愈合良好,眼球运动自如,改善了美容。材料与手术方法1. 取材:用新鲜的尸体角膜常规处置,放4℃冰箱中保存36小时内,甘油保存1～3月供体人角膜或鸡角膜片。2.手术方法:局麻分离睑球粘连,在睑球粘连较重部位将其分离至结膜穹窿深部。睑结膜面反转作褥式缝合固定结膜穹窿     

异种角膜基质的研究现状及问题

在角膜3层(上皮层+Bowman's膜、基质层、内皮层+Descemet's膜)膜中,按等量计算,基质层的免疫原性是最低的.应用脱细胞的异种角膜基质移植后,神经和基质细胞可以再生,术后未见排斥反应,植片获得透明.因此,异种角膜基质有望成为板层角膜移植的供体和组织工程角膜的载体.现就异种角膜基质的研究现状及问题综述如下.