习惯性流产患者血清中自身抗体的检测

目的：探讨甲状腺自身抗体、抗卵巢抗体（AoAb）对习惯性流产的影响,进一步揭示习惯性流产的病因。方法：用ELISE法和化学发光法对80例习惯性流产妇女血清AoAb和甲状腺球蛋白抗体（a-TG）、甲状腺过氧化物酶抗体（a-TPO）进行检测,并与40例正常生育妇女血清做对照。结果：流产组a-TPO阳性率为25.0%,高于正常对照组,统计学上有差异。a-TG的阳性率在RSA妇女中18.8%,高于正常对照组,有统计学意义。流产组AoAb阳性率为13.48%,显著高于对照组。结论：a-TG与a-TPO和AoAb均与习惯性流产有密切关系。     

亚甲基四氢叶酸还原酶和甲硫氨酸合成酶还原酶基因多态性研究

目的:探讨编码叶酸代谢通路中关键酶的基因多态性与新生儿神经管缺陷(NTDs)间的关联性,及在部分中国女性人群中的分布特征,从而指导孕期叶酸补充和风险监测。方法:采用循证医学方法对5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)C677T、A1298C和甲硫氨酸合成酶还原酶(MTRR)A66G与NTDs的关联性进行Meta分析,并在中国的北方(山东、河南)和南方(四川、海南)地区进行了1 017例样本的分子流行病学研究。结果:MTHFR C677T位点TT基因型相对于CC型的比值比为3.35(95%CI:1.39～8.13),TT型在北方和南方女性人群中的频率分别为37.35%和10.44%,差异有统计学意义;MTHFR A1298C和MTRR A66G虽然从生物学机制上与NTDs的发生密切相关,但尚需进行大规模的人群研究。结论:基于MTHFR和MTRR多态性检测的孕期叶酸补充指导和监测将是进一步降低新生儿出生缺陷的重要方法。     

多层螺旋CT肺血管成像技术对肺动静脉畸形的诊断

肺动静脉畸形(pulmonary arteriovenous malformations,PAVM)在临床上较少见,以往肺动脉造影(PAI)SA)一直被认为是诊断PAVM的"金标准".随着CT技术的发展,尤其是多层螺旋CT(MSCT)时间分辨率和空间分辨率都显著提高,其强大的后处理功能及血管重建技术可以三维立体显示肺血管的形态、走行和血管腔内情况,在无创性诊断肺血管相关疾病方面起到越来越重要的作用.笔者收集8例PAVM的检查结果,旨在探讨MSCT肺血管成像技术对PAVM的诊断价值.     

用PCR技术研究HBsAg阳性者血清HBV—DNA与e系统的关系

作者应用聚合酶链反应(PCR)对经酶联免疫法检出的211份HBsAg阳性者进行HBV-DNA检测。同时与e系统检测结果比较,发现HBeAg阳性组HBV-DNA阳性率为97.8％,而抗-HBe阳性组HBV-DNA阳性率为39.7％(P<0.01);应用聚合酶链反应检测HBV-DNA对于确切了解HBsAg阳性者HBV感染状况和传染性有一定意义。     

前列腺癌P504s、p63及34βE12的表达与Gleason分级的诊断意义

目的 探讨前列腺癌的病理形态学特征、Gleason分级及α-甲酰基辅酶A消旋酶(P504s)、p63、34βE12联合标记在其诊断和预后中的应用价值.方法 常规光镜观察71例前列腺癌患者的病理组织学形态并进行Gleason分级评分,应用免疫组织化学(SP法)检测P504s、p63、34βE12的表达.结果 71例中,Gleason 2～4分11例,5～6分16例,7分16例,8～10分28例.P504s阳性表达率为97%(69/71),而p63和34βE12均不表达(0/71).本组病例P504s、p63及34βE12在前列腺癌Gleason分组间的表达没有差异,与肿瘤的分化程度及生长方式也没有相关性.结论 前列腺癌的病理诊断和Gleason分级评分主要是依据肿瘤的组织结构和形态学特征,Gleason分级与肿瘤的生物学行为和预后密切相关.P504s、p63、34βE12联合标记对前列腺癌的诊断和鉴别诊断有良好的应用价值.     

桂哌齐特治疗急性心肌梗死患者的疗效及其对血清炎性因子、心率变异性和心功能的影响

目的观察桂哌齐特对急性心肌梗死(AMI)患者的治疗效果及对血清炎性因子(hs-CRP、IL-6)水平,心率变异性、心功能及心肌标志物的影响。方法回顾性分析2014年8月—2016年5月北京市第一中西医结合医院急诊科治疗的急性心肌梗死患者150例的临床资料,根据其治疗方式分为对照组85例(常规治疗)和观察组65例(常规治疗加桂哌齐特静脉滴注)。观察2组患者的治疗效果和不良反应发生率,比较2组治疗前后的血清炎性因子、心率变异性、心功能及心肌标志物的差异。结果观察组总有效率为96.9%高于对照组的87.1%(x^2=4.528,P=0.033);治疗后,2组IL-6、hs-CRP均低于治疗前(P<0.01),且观察组优于对照组(t=7.706、8.291,P<0.01);治疗后,2组的SDNN、SDANN、RMSSD和PNN50(%)高于治疗前(P<0.01),且观察组优于对照组(t=-6.299、-4.657、-7.744、-6.947,P<0.01);治疗后观察组SV和LVEF高于对照组(t=-5.992、-5.940,P<0.01),NT-proBNP、CTnl低于对照组(t=57.370、17.407,P<0.01);2组患者在治疗期间均无肝肾功能损害等不良反应发生。结论桂哌齐特对急性心肌梗死患者有较好的治疗效果,可明显改善患者心功能、降低hs-CRP及IL-6水平,具有临床应用价值。     

克隆测序鉴定柯萨奇病毒B3m诱导BALB/c小鼠急性心肌炎模型

小儿病毒性心肌炎发病率的逐年增高,越来越受到专家学者的关注.关于病毒性心肌炎的发病机制及药物防治等基础性与应用性研究都需要一个可靠而稳定的动物模型[1].我们以质粒克隆测定BALB/c心肌炎模型小鼠的心肌组织中CVB3m序列,对测序结果与已知CVB3m cDNA全序列进行了比较,并配合病理观察,鉴定小鼠心肌炎模型. 材料与方法 1. 材料:(1)病毒:CVB3m(上海第二军医大学沈茜教授惠赠),Hela细胞传代,TCID50为3.67×10-4.(2)动物:70只BALB/c小鼠,5～6周龄,雄性,体重18 g左右(中国医科大学动物中心提供,SPF级).(3)仪器:DNA测序仪(ABI PRISMTM 377X)、蛋白核酸分析仪(美国Beckman DU-600)、PCR仪(美国PE-9600),倒置显微镜(德国LEICA)、超薄切片机(LKB-V)、电子显微镜(日本HITACHI H-600)、低温高速离心机(德国Heraeus Biofuge 28RS)、电泳仪(上海天能EPS-300);CMIAS医学图像分析管理系统、天能凝胶分析系统.(4)试剂:TRIZOL总RNA提取试剂(GIBCO公司)、RT-PCR试剂盒(大连宝生物工程有限公司)、AmpliTaq DNA聚合酶循环反应试剂盒(PE公司).(5)引物:CVB3m特异引物为软件设计所得,CVB3m上游引物(2458-2476)为 5＇- GTG GAA GAC GCG ATA ACA - 3＇,下游引物(3286-3269)为5＇- CAT TGT AGT GAT GCT TTG - 3＇,扩增片段计828 bp;测序用引物F(M13-47)与引物R(RV-M),分别为 5＇- CGC CAG GGT TTT CCC AGT CAC GAC- 3＇与5＇- GAG CGG ATA ACA ATT TCA CAC AGG - 3＇.引物由宝生物工程(大连)有限公司合成. 2.实验方法:(1)分组与小鼠CVB3m急性心肌炎模型的建立:70只小鼠按体重随机分为对照组(A组)与模型组(B组).B组经腹腔注射接种0.2 ml含TCID50的CVB3m.A组予以等量不含病毒的Hela 细胞培养上清液.(2)取材:各组分别于感染后3、5、7、10、14 d随机活杀6只鼠,取心肌组织,分别用于克隆测序及病理组织学检查.(3) RT-PCR:①提取总RNA:取心肌组织加TROZOL制成匀浆,经超声破碎、提取,氯仿、异丙醇等分离、沉淀,最后用适量的无RNase水溶解RNA沉淀.②合成 cDNA:将总RNA 反转录合成第一条cDNA .条件:65℃ 1 min、30 ℃ 5 min、15～30 min内匀速升温至 65 ℃、65 ℃ 15～30 min、98 ℃ 5 min、5 ℃ 5 min.③PCR扩增:将反转录的cDNA进一步扩增,扩增参数:94℃ 3 min,94 ℃ 30 s、56 ℃ 30 s、72℃ 1 min,30个循环后72 ℃ 5 min.④产物测定:选取模型组CVB3m引物RT-PCR扩增产物,再次扩增,以蛋白核酸分析仪测吸光度A值(曾称光密度)并计算DNA产量.⑤ RT-PCR产物检测: 5 V/cm电压电泳45 min,确定目标DNA,以天能凝胶分析系统拍摄、分析.(4) RT-PCR扩增产物克隆与测定序列:①回收目的DNA:切取目的DNA片段,加入Nacl溶液,加热融化,缓冲液反复洗,离心,回收上清液即得.②连接与转化:将DNA、载体(pMD18)及连接酶混匀, 16℃恒温1 h;与JM109感受态细胞冰浴1 h;加葡萄糖和SOB,37 ℃摇床1 h;取20 μl涂平板,培养过夜.③质粒扩增与纯化:将培养的质粒再次扩增,并用碱裂解法提取质粒,限制性内切酶切割,得到纯化的质粒.(5)序列测定与比较:应用DNA测序仪测定克隆序列,将测定序列结果与已知CVB3m cDNA全序列比较[2].     

中药对低密度脂蛋白受体基因表达的影响

目的 :探讨中药对低密度脂蛋白受体基因表达的影响。方法 :应用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术检测 30例高脂血症患者外周血淋巴细胞低密度脂蛋白受体 (L DL R)信使核糖核酸 (m RNA)水平在用药前后的变化。结果 :中药组 15例患者用药后的 L DL R m RNA水平 (0 .6 2 5 4± 0 .16 6 9)较用药前 (0 .2 46 5±0 .1316 )明显升高 (P<0 .0 1)。结论 :中药复方颗粒剂可增强高脂血症患者外周血淋巴细胞 L DL R基因表达水平 ,在分子水平上 ,为中药降脂作用的机制研究提供科学依据。