RNAi沉默CD133基因表达对结肠癌细胞株HT-29影响的研究

目的:探讨通过RNA干扰沉默CD133基因对结肠癌细胞株HT-29的增殖和侵袭力的影响。方法:将CD133siRNA用脂质体转染入HT-29细胞,以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测CD133mRNA的变化,蛋白质印迹法检测转染前后蛋白的表达水平,用MTT比色法和Transwell小孔实验分别检测癌细胞的增殖及侵袭力变化。结果:CD133siRNA转染成功,与正常对照组相比,转染组CD133mRNA及蛋白的表达水平均有明显的抑制,并呈现浓度时间依赖性。MTT实验证明转染组细胞随时间延长,增殖逐渐受到抑制,P<0.05。Tran-swell小孔实验中经转染处理的穿膜细胞数明显减少(P<0.05),RNA干扰降低了细胞的侵袭性。结论:CD133在HT-29癌细胞增殖及侵袭过程中起重要作用,RNA干扰可以有效抑制其CD133的表达,并能有效降低癌细胞的增殖及侵袭力。     

Hedgehog信号传导通路在乳腺癌中表达增强

目的：研究乳腺癌细胞中,Hedgehog信号传导通路是否表现为持续的激活状态。方法：用免疫组化方法在64例乳癌标本中检测决定Hedgehog信号传导通路的组成部分,包括Shh,patched1和Gli1,SMO的表达。结果：在64例肿瘤样本中,强阳性表达Shh ,Ptch1和Glil,Smo的分别为64（100％）,61（95.3％）,62（96.9％）,和61（95.3％）,相反,各自对应相邻的正常乳腺上皮在可探测到的水平上不表达或低表达的这些蛋白,乳腺癌中的Hh通路的激活状态是普遍的,与病人的淋巴结转移无关,与癌肿的大小也无关。但与乳腺癌的特殊的病理类型可能有关。所有的64例肿瘤标本与周围正常组织相比都表现为Gli1强阳性染色,核染色Glil阳性/所有的肿瘤细胞的百分比从2%～95%不等,中位数为40.87%。Gli的核染色与雌激素受体阳性相关（P<0.05）,与孕激素受体阳性无关。结论：Hedgehog(Hh)信号传导通路可以作为潜在的乳腺癌治疗的新颖靶点。     

血管黏附蛋白1在临床疾病中的研究进展

血管黏附蛋白1(VAP-1)是一种在哺乳动物体内广泛存在的多功能蛋白。VAP-1既是一种黏附分子,又是一种胞外酶,其在白细胞渗出、黏附级联反应、糖代谢调节、血管损伤等方面都发挥了重要的作用。在炎症性疾病、糖代谢相关疾病、肿瘤、脑卒中等众多临床疾病中,VAP-1的表达及功能都有着重要的意义,而使用VAP-1抗体和抑制剂已经在许多临床疾病的动物模型上显示了显著的治疗作用。     

肠缺血性休克犬血清PLA2活性和MDA含量变化及促甲状腺素…

本实验采用同时测定血清磷脂酶和脂质过氧化代谢终产物丙二醛的方法，动态观察两者在犬肠缺血性休克中的作用及促甲状腺素释放激素它们的影响。结果显示：休克后，血清ＰＬＡ２活性和血清ＭＤＡ含量均明显升高，与平均动脉压呈显著负相关。     

促甲状腺素释放激素治疗犬肠缺血性休克

取犬10条,参照kobold法制作肠缺血性休克模型。恢复血供前后静脉注射促甲状腺素释放激素(TRH、共5mg/kg),对照组给予等量生理盐水。结果发现TRH治疗组犬存活时间显著延长,全部为6小时处死。TRH可明显提高和维持平均动脉压(恢复血供平均285分钟时,对照组为3.33kPa,而治疗组仍达13.99kPa±1.86kPa),有效地维持机体酸碱平衡,改善脑血供,降低脑脊液乳酸含量,稳定肝细胞超微结构。结果表明TRH确具有显著的治疗肠缺血性休克的作用。     

TRH对失血性休克狗脑脊液和血浆ir－β－EP含量的影响

采用狗重度失血性休克模型，同时动态测定了休克及应用促甲状腺素释放激素（ＴＲＨ）后，狗脑脊液（ＣＳＦ）和血浆的β－内啡肽样免疫活性物质（ｉｒ－β－ＥＰ）含量变化。结果显示：失血性休克时ＣＳＦ和血浆ｉｒ－β－ＥＰ含量明显升高，与休克严重程度显著相关。提示中枢神经系统和外周血循环中的β－ＥＰ共同参与失血性休克的病理生理过程。静脉滴注ＴＲＨ后，ＣＳＦ和血浆中的ｉｒ－β－ＥＰ均降到休克前水平，与对照组比较相差显著。ＴＲＨ抑制了下丘脑和垂体释放β－ＥＰ，可能是ＴＲＨ拮抗失血性休克的机理之一。     

直肠癌术后吻合口漏的风险因素评估

目的对直肠前切除术后发生吻合口漏风险进行评估。 方法选取2005年3月至2009年8月在第二军医大学附属长征医院普外科接受直肠前切除的338名直肠癌患者为研究对象,所有患者均接受直肠全系膜切除,评估相关因素与吻合口漏的相关性。 结果本研究的吻合口漏发生率为9.2%。通过单因素分析与多因素分析法发现年龄（OR：3.380,95%CI：1.346~8.489）、BMI（OR：11.828,95%CI：4.123~33.858）、肿瘤位置（OR：6.304,95%CI：162~18.382）、肠梗阻（OR：6.675,95%CI：2.164~20.594）是影响吻合口漏的独立因素。 结论直肠前切除术后发生吻合口漏与患者的性别、年龄、BMI指数、肿瘤位置、肠梗阻等因素相关。对于男性、高龄、肥胖、低位直肠癌、合并肠梗阻等危险因素的患者而言,术后发生吻合口漏的风险将增高。     

缺氧诱导BCL9促进结肠癌细胞的增殖与迁移

目的探索缺氧对B-淋巴细胞瘤蛋白9（BCL9）的调控关系及BCL9对结肠癌细胞的生物学作用。 方法收取20例结肠癌标本及同一患者的正常结肠标本,利用免疫组化技术、实时荧光定量PCR技术检测BCL9的表达;利用常氧或缺氧培养HCT116细胞,实时荧光定量PCR及蛋白印迹法（western-blot）检测BCL9的表达;构建包含BCL9启动子序列的荧光素酶报告载体,通过缺氧处理或过表达HIF1α,检测荧光素酶活性变化;通过过表达质粒或siRNA干扰BCL9的表达,随后检测HCT116细胞的增殖活性及迁移能力。 结果免疫组化及实时荧光定量PCR检测显示肿瘤组织中BCL9表达明显高于正常组织［（3.25±0.53）vs.（1.03±0.12）,P<0.05］;缺氧培养HCT116细胞后BCL9的表达显著提高,［（6.71±0.83）vs.（1.54±0.21）,P<0.05］;同时,缺氧培养或过表达HIF1α能显著提高荧光素酶的活性［（3.53±0.75）vs.（0.96±0.15）,（4.83±0.62）vs.（1.02±0.14）;P<0.05］;干扰BCL9的表达抑制HCT116细胞的增殖及迁移能力［（1.23±0.12）vs.（1.87±0.15）,P<0.05］;提高BCL9表达能促进HCT116细胞的增殖及迁移能力［（2.43±0.16）vs.（1.81±0.14）,P<0.05］。 结论缺氧可诱导BCL9在结肠癌中高表达,并通过BCL9促进结肠癌细胞增殖、迁移。