三种不同方法制备去细胞神经支架的比较

背景：去细胞异体神经移植物具有完全仿真的三维结构,为细胞附着提供了较理想的三维空间,是目前所有人工合成材料所无法比拟的。目的：对比分析液氮冷冻法、化学法及改良法3种方法对大鼠坐骨神经去细胞化的优劣。方法：切取SD大鼠10mm坐骨神经,分别以液氮冻融法、TritonX-100处理化学去细胞法、改良法处理的化学去细胞法分别制作去细胞神经支架,行苏木精-伊红染色,并在扫描电镜下观察支架超微结构。结果与结论：液氮冻融法去细胞支架内有较多许旺细胞残留,有较多轴突及髓鞘,基膜完整,基膜管欠通畅;TritonX-100处理化学法去细胞神经支架内无明显许旺细胞,管内未见明显轴突及髓鞘残留,基膜完整,基膜管通畅;改良法处理的化学去细胞神经支架内许旺细胞及轴突、髓鞘成分几乎完全消失,去细胞效果更好,基膜完整,基膜管更通畅。表明TritonX-100处理化学去细胞法、改良法处理的化学去细胞法脱细胞效果较好,其中以改良法处理的化学去细胞法最好。     

白介素-16基因多态性与膝骨性关节炎的易感性研究

目的：探讨汉族人群中白介素-16（interleukin-16,IL-16）基因单核苷酸多态性与膝关节骨性关节炎（knee osteoarthritis,KOA）的相关性。方法：采用“病例-对照”研究方法,纳入150例汉族KOA患者与147例非KOA受试者,其年龄、性别、体质指数相匹配。采用苯酚氯仿法提取外周血白细胞基因组DNA,聚合酶链反应限制性片段长度多态性的方法检测IL-16基因rs11556218、rs4072111和rs4778889 ３个位点与KOA的遗传易感相关性,并用基因测序验证结果。结果：病例组和对照组中3个位点基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡。KOA组rs11556218的T/G基因型频率高于非KOA的人群（OR=2.06,95%CI=1.26～3.35,P=0.005）,G/G也明显增加发病风险（OR=2.52,95%CI=1.10～5.74,P=0.005）,rs4072111的C/T基因型KOA的发病风险较C/C基因型明显增加（OR=2.45,95%CI=1.42～4.22,P=0.000）,T/T也明显增加发病风险（OR=4.04,95%CI=1.06～15.37,P=0.000）;rs11556218与rs4778889存在连锁不平衡关系（D’=0.63,R2=0.236）,单倍型TTT增加KOA的发病风险（OR=3.70,95% CI=1.57～8.72,P=0.003）,GCC也增加了KOA的发病风险（OR=6.22,95%CI=2.37～16.33,P=0.000）。结论：汉族人群中IL-16基因多态性可能与KOA易感性有关。     

灭滴灵预防和治疗剖宫产术后感染102例临床效果

灭滴灵预防和治疗剖宫产术后感染１０２例临床效果冷水滩市人民医院罗世兴冷水滩市妇幼保健院邓艳梅我院于１９９４年至１９９５年间，在剖宫产术中采用灭滴灵宫腔灌药及腹壁切口冲洗、术后静脉给药预防术后感染，收到了显著的效果。现将灭滴灵应用组（Ａ组）１０２例与未...     

广西沿海汉族成年男性骨钙素临床参考值的建立和相关因素分析

目的建立广西沿海地区汉族成年男性的血清骨代谢标志物-骨钙素的临床参考区间。方法自2009年9月-2009年12月,在广西防城港市第一人民医院体检中心收集健康成年男性空腹血清,使用罗氏Cobas e 601型全自动电化学发光免疫分析系统检测骨钙素结果,并探讨年龄、体重指数、吸烟及饮酒等对骨钙素水平的影响。结果符合纳入标准的健康成年男性2018例（20-69岁）,骨钙素数据呈非正态分布,广西沿海地区汉族成年男性的血清骨钙素的临床参考范围为23.07 ng/ml（12.64-45.39 ng/ml）,不同年龄、体重指数、吸烟、饮酒与否分组的男性骨钙素水平比较结果显示,不同年龄组、非超重组与超重组的差异均具有统计学意义（P=0.000）;吸烟与非吸烟组（P=0.629）、饮酒与与非饮酒组（P=0.748）的差异无统计学意义,血清骨钙素水平与年龄、体重指数有负相关性。结论以2.5%和97.5%的百分位点表示95%参考区间,各年龄段的血清骨钙素的临床参考范围分别为20-29岁28.10 ng/ml（15.97-52.42 ng/ml）,30-39岁22.41 ng/ml（12.87-38.90 ng/ml）,40-49岁21.21 ng/ml（12.15-39.10 ng/ml）,≥50岁20.21 ng/ml（11.11-40.98 ng/ml）。血清骨钙素水平有随年龄与体重指数增大而下降的趋势,与其他文献的报道存在差异。     

大鼠成骨细胞的原代培养和鉴定

背景:组织工程需要大量的种子细胞,成骨细胞已成为骨组织工程构建的重要种子细胞之一。但成骨细胞取材困难,获得的成骨细胞的纯度不一。目的:建立大鼠新生乳鼠颅骨来源成骨细胞的分离培养纯化方法,观察颅骨来源成骨细胞生物学特点。方法:采用二次酶消化法对SD大鼠乳鼠成骨细胞进行原代培养,扩增。通过差速贴壁法进行成骨细胞纯化。通过形态学、细胞碱性磷酸酶检测、茜素红染色、钙结节Vonkossa法染色、超微结构以及细胞增殖曲线,确定其增殖与成骨活性。结果与结论:二次酶消化法培养颅骨来源成骨细胞可获得原代细胞增殖,传代扩增细胞具有典型成骨细胞形态学和生物学活性。碱性磷酸酶、茜素红染色、钙结节Vonkossa法染色均呈阳性结果。超微结构显示为高分化功能活跃成骨细胞,细胞增殖曲线显示细胞生长活跃。提示,新生SD大鼠颅骨来源成骨细胞具有良好的增殖与成骨活性,能连续传代增殖,纯度高,细胞生物学特征稳定,适用于做体外实验研究。     

大鼠骨髓间充质干细胞的培养与鉴定

背景:骨髓间充质干细胞在骨髓中含量极低,体外培养难度较大.体外分离培养纯度高、活力强、生物特性均一的间充质干细胞,对组织工程及细胞的体内、体外实验显得至关重要.目的:建立大鼠骨髓间充质干细胞的分离、培养、纯化方法,并进行细胞形态学观察、表面标志物鉴定及多向分化能力检测.方法:通过全骨髓贴壁法体外分离、培养、纯化大鼠骨髓间充质干细胞,进行形态学观察,绘制生长曲线,细胞周期分析,流式细胞仪检测细胞表面标记物,分别向成骨、成脂方向诱导分化.结果与结论:大鼠骨髓间充质干细胞生长以梭形细胞为主,呈放射状排列的细胞集落,细胞生长旺盛,可连续稳定传代10代以上.生长曲线及细胞周期显示骨髓间充质干细胞符合正常细胞生长特征且生长活跃.第3代骨髓间充质干细胞CD44,CD90,CD105均呈阳性表达,而CD34,CD45呈阴性表达.成脂、成骨诱导后,油红O染色、碱性磷酸酶染色、von Kossa法染色和茜素红染色均呈阳性.全骨髓贴壁培养法操作简单,可大量分离、纯化、扩增骨髓间充质干细胞,所获细胞具有间充质干细胞的一般生物学特性,经诱导培养后具有多向分化潜能.实验所用的全骨髓贴壁法法为组织工程提供充足的种子细胞来源具有重要的现实意义.     

芒果苷对大鼠骨髓间充质干细胞增殖的影响☆

背景:组织工程需要大量的种子细胞,尚未见芒果苷促进骨髓间充质干细胞增殖的报道。目的:观察芒果苷对体外培养大鼠骨髓间充质干细胞增殖作用。方法:通过全骨髓贴壁法体外分离、培养、纯化大鼠骨髓间充质干细胞。应用MTT法检测芒果苷细胞毒性并绘制生长曲线,细胞周期检测及细胞增殖示踪检测,观察不同浓度的芒果苷对大鼠骨髓间充质干细胞毒性及生物学性状影响,不同浓度的芒果苷对体外培养骨髓间充质干细胞增殖的影响。结果与结论:在一定浓度范围内,不同浓度的芒果苷均可促进大鼠骨髓间充质干细胞增殖、分化,并呈现出一定的量效、时效关系。药物作用时间48,72h,芒果苷20μmol/L、40μmol/L组作用最为显著(P<0.01);80μmol/L组次之(P<0.05)。芒果苷浓度20,40,80μmol/L等各组细胞S期比值均较正常细胞显著增高,以芒果苷40μmol/L组最显著(P<0.05)。提示芒果苷具有促进体外大鼠骨髓间充质干细胞细胞增殖的作用。     

芒果苷对缺氧损伤骨髓间充质干细胞凋亡的保护

背景：缺氧性死亡限制了细胞移植和组织再生中细胞的应用。 目的：观察芒果苷对氯化钴作用下骨髓间充质干细胞缺氧损伤性凋亡的保护作用。 方法：体外培养大鼠骨髓间充质干细胞,应用氯化钴建立细胞缺氧模型,以芒果苷对缺氧损伤下的骨髓间充质干细胞进行保护,通过MTT实验观察芒果苷对大鼠骨髓间充质干细胞缺氧损伤的保护作用;采用流式细胞仪检测芒果苷对大鼠骨髓间充质干细胞缺氧保护的细胞凋亡及线粒体膜电位检测结果。 结果与结论：氯化钴能显著抑制大鼠骨髓间充质干细胞的生长,并且呈明显的剂量依赖关系。氯化钴200 μmol/L处理细胞12 h,诱导细胞凋亡率为(42.49±3.96)%;处理细胞24 h,诱导细胞凋亡率为(46.37±4.49)%,随着芒果苷浓度的增加,大鼠骨髓间充质干细胞缺氧损伤的凋亡率逐步减少(P < 0.01),芒果苷对大鼠骨髓间充质干细胞缺氧损伤具有保护作用,且呈浓度依赖性。结果提示,氯化钴缺氧模型能成功诱导大鼠骨髓间充质干细胞凋亡,具有剂量准确可控、无特殊设备要求、易操作等优点;芒果苷能有效抑制缺氧损伤时骨髓间充质干细胞的凋亡,对细胞具有保护作用。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

三种不同方法制备去细胞神经支架的比较

背景：去细胞异体神经移植物具有完全仿真的三维结构,为细胞附着提供了较理想的三维空间,是目前所有人工合成材料所无法比拟的。 目的：对比分析液氮冷冻法、化学法及改良法3种方法对大鼠坐骨神经去细胞化的优劣。 方法：切取SD大鼠10 mm坐骨神经,分别以液氮冻融法、TritonX-100处理化学去细胞法、改良法处理的化学去细胞法分别制作去细胞神经支架,行苏木精-伊红染色,并在扫描电镜下观察支架超微结构。 结果与结论：液氮冻融法去细胞支架内有较多许旺细胞残留,有较多轴突及髓鞘,基膜完整,基膜管欠通畅;TritonX-100处理化学法去细胞神经支架内无明显许旺细胞,管内未见明显轴突及髓鞘残留,基膜完整,基膜管通畅;改良法处理的化学去细胞神经支架内许旺细胞及轴突、髓鞘成分几乎完全消失,去细胞效果更好,基膜完整,基膜管更通畅。表明TritonX-100处理化学去细胞法、改良法处理的化学去细胞法脱细胞效果较好,其中以改良法处理的化学去细胞法最好。     

改良入路与传统入路在胫骨干骨折术中应用的比较研究

[目的]通过与传统手术切口比较,探讨改良切口治疗胫骨干骨折的疗效.[方法]2006年1月～2008年12月,收治84例胫骨干骨折的患者,均予急诊手术,分别应用改良入路(46例)和常规入路(38例),两组术前一般资料差异等方面无统计学意义,其中改良入路应用胫前骨筋膜瓣.比较两组的骨折愈合情况和并发症等指标.[结果]全部患者经平均15个月随访.改良切口组的骨折愈合时间均短于对照组,总疗效评估的优良率高于对照组,两组比较有明显的统计学差异(P＜0.05),总疗效评估为差的3例均发牛在对照组,治疗组出现3例伤口皮肤坏死,但因骨筋膜瓣的覆盖而无骨外露.[结论]改良切口应用胫前骨筋膜瓣治疗胫骨干骨折能取得较好疗效,有利于切口愈合,提高骨折的愈合率.