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目的:以Fe3O4磁性纳米粒(Fe3O4magnetic nanoparticle,Fe3O4-MNP)和聚乳酸-聚乙醇酸共聚物(poly lactide-co-glycolide,PLGA)为材料,制备载IL-2磁性纳米颗粒(IL-2-loaded magnetic nanoparticle,IL-2-Fe3O4-PLGA),观察其在肿瘤免疫治疗中的靶向富集作用。方法:采用复乳法制备IL-2-Fe3O4-PLGA,激光粒度分析仪和扫描电镜观察其大小和形态。ELISA检测IL-2-Fe3O4-PLGA的包封率、体外释药特性;MTT法检测其释放IL-2的生物学活性。构建S180肉瘤细胞小鼠肿瘤模型,研究其瘤体内注射联合体外磁场对S180细胞移植瘤生长的影响,普鲁士蓝染色观察IL-2-Fe3O4-PLGA在肿瘤组织以及肝脏和肾脏组织中的富集和分布。结果:成功制备了IL-2-Fe3O4-PLGA,IL-2-Fe3O4-PLGA呈圆球形,平均粒径为(697±0.51)nm,包封率为(83.76±1.24)%。IL-2-Fe3O4-PLGA突释期释放的IL-2质量浓度为100 ng/ml,第15 d后质量浓度为180 ng/ml,并且保持原有生物学活性的85%~55%。在肿瘤组织中,IL-2-Fe3O4-PLGA联合体外磁场组可见大量的普鲁士蓝染色阳性IL-2-Fe3O4-PLGA颗粒沉积,IL-2-Fe3O4-PLGA组只有少量的IL-2-Fe3O4-PLGA阳性颗粒沉积;两组肝脏中均可偶见少量阳性颗粒沉积,而肾脏几乎未见IL-2-Fe3O4-PLGA颗粒沉积。结论:载IL-2磁性纳米颗粒IL-2-Fe3O4-PLGA具有缓释IL-2的功能,联合体外磁场可有效富集于肿瘤组织中。 相似文献
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目的 观察外源基因重组人源白细胞介素(IL)-24(rhIL-24)联合重组人源核心蛋白聚糖(rhDCN)对人类肝细胞癌HepG2细胞的增殖、凋亡和细胞周期的影响.方法 采用脂质体瞬时转染法将pcDNA3.1(+)-IL-24和pcDNA3.1(+)-DCN质粒转染至HepG2细胞,48 h后倒置显微镜下观察细胞生长状况、形态学改变.分别在转染后24h、48 h和72 h,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察IL-24和DCN单独及联合转染对HepG2细胞的增殖抑制效应.转染后48 h流式细胞术检测HepG2细胞凋亡情况,并进行细胞周期阻滞分析.结果 与对照组相比,转染目的基因48 h后显微镜下可见细胞生长不同程度地被抑制,并可见典型的凋亡细胞形态改变,以联合转染组改变更为明显.MTT结果显示转染后48 h和72 h,双基因联合转染组的抑制率分别是(31.88±6.57)%和(36.83±3.76)%,与对照组和单独转染组比较,差异均有统计学意义(P<0.01).流式细胞术结果显示,单独转染IL-24和DCN基因可诱导HepG2细胞出现不同程度凋亡,而双基因联合转染组细胞凋亡率可达(32.56±0.90)%,与空质粒转染组的(2.98±0.72)%、空白细胞对照组的(3.50±0.92)%、IL-24组的(20.01±1.08)%和DCN组的(22.20±0.91)%比较,差异均有统计学意义(P<0.01).细胞周期分析结果表明,与对照组相比,IL-24基因转染组的G2/M期和DCN基因转染组的G0/G1期细胞比例明显增高分别为(11.24±0.35)%、(77.93±0.67)%,而双基因联合转染组G0/G1期和G2/M期细胞比例同时增高,分别是(71.36±0.60)%和(10.39±0.67)%,差异有统计学意义(P<0.01).结论 联合转染IL-24和DCN基因可以协同发挥较单独应用更强的抑制HepG2细胞增殖和诱导HepG2细胞凋亡的作用.IL-24可使HepG2细胞发生G2/M期阻滞,DCN可使HepG2细胞发生G0/G1期阻滞,双基因联合使HepG2细胞同时发生G2/M期和G0/G1期阻滞,是IL-24和DCN对HepG2细 相似文献
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目的探讨肿瘤细胞是否能上调CD4+CD25+调节性T细胞(Treg细胞)的比例。方法将小鼠淋巴瘤细胞株EL4培养上清液与正常小鼠脾脏淋巴细胞混合培养72h,流式细胞仪检测其中CD4+CD25+Treg细胞含量,RT—PCR检测Foxp3mRNA的表达,实验重复3次。结果和EL-4培养上清液混合培养的正常小鼠脾脏淋巴细胞中CD4+CD25+Treg细胞的比例高于对照组(P〈0.05),在CD3单抗刺激的同时加入EL-4培养上清液后,小鼠脾脏中CD4+CD25+Treg细胞仍呈同步增加(P〈0.05);且Foxp3mRNA的表达增加。结论淋巴瘤细胞分泌的免疫调节因子能诱导CD4+CD25+Treg细胞的增生,提示肿瘤可以上调CD4+CD25+Treg细胞比例。 相似文献
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66.
目的:探讨重组质粒pGL3hTERTtk/GCV对胃癌细胞的促调亡作用。方法:以基因工程方法构建重组质粒pGL3hTERTtk和相应的荧光报告质粒pGL3hTERTtkLuc+;脂质体LipofectamineTM2000瞬时转染胃癌细胞系SGC7901并用GCV干预,荧光显微镜观察细胞形态变化和转染效率,TUNEL标记和流式细胞术观察转染后胃癌细胞的凋亡;以上实验均以正常肝细胞L02为对照。结果:经鉴定,重组质粒pGL3hTERTtk中tk片段的长度为1 100 bp。荧光素酶标记的阳性、阴性对照及治疗报告质粒pGL3hTERTtkLuc+均能有效转染高表达端粒酶活性的胃癌细胞SGC7901,转染效率为(8.2±114)%。重组质粒转染胃癌细胞后与GCV共育4 d,细胞的凋亡率为(60.0±1.56)%;被pGL3hTERTtk转染的肿瘤细胞细胞周期发生了变化,处于细胞周期早期的细胞大量凋亡,早期凋亡率为(47.1±1.35)%。〖HT5W〗结论:〖HT5"SS〗pGL3hTERTtk/GCV对胃癌细胞有强烈的杀伤作用,但不影响正常细胞的生长,有潜在临床应用前景。 相似文献
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68.
婚后同居3年以上,未经避孕而不受孕者谓之不孕证。本病病因复杂,证型繁多,治疗也各不相同。笔者应用温经汤(吴茱萸、当归、赤芍、川芎、党参、桂枝、阿胶、丹皮、生姜、甘草、半夏、麦冬。)加减治疗冲任虚寒、淤血阻滞型不孕多例,效果较满意。现举案例如下: 例一,刘某,女,26岁,社员。于1984年7月5日来诊。主诉:婚后6年禾孕。15岁月经初潮,周期30天左右一行,经量涩少,色淡红。数年后,适值经期,冒雨涉水,经血即停。不久就出现腹部不适,少腹疼痛并发凉,腰部及下肢酸软无 相似文献
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例1女,58岁,于1994-01-10因咳嗽、咳黄痰、喘憋、发热入院治疗。体温38℃,脉搏100次/分,经检查诊断为肺感染。按医嘱给予5%葡萄糖500ml,红霉素0.6g静脉输入,速度35-50滴/分约30分钟后患者自感颜面部刺痒,双眼睑尤为明显,同时伴有烦燥胸闷,头胀感,恶心,当时发现患者颜面部潮红,双眼球结膜高度充血、水肿,并有大量泪液流出及鼻腔流出大量鼻涕,体温为37℃,脉搏为120次/分,呼吸20次/分,除上述症状外,其他无改变。诊断为红霉素过敏反应,立即给予异丙嗪2.5mg肌肉注射,5%葡萄糖20ml,地塞米 相似文献