UGT2B7基因SNP rs7439366影响霉酚酸酯代谢的体外研究

目的 体外研究尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(UGT2B7)基因单核苷酸多态性(SNP)rs7439366对霉酚酸酯(MMF)代谢的影响。方法 采用基因重组、定点突变技术构建UGT2B7基因rs7439366位点不同等位基因的过表达载体,Lipo2000转染法将重组载体转入HEK293细胞,采用LC/MS/MS系统检测霉酚酸(MPA)代谢产物7-O-葡醛酸苷(MPAG)24h的生成量来评估转染不同等位基因细胞的酶活性。结果 成功构建pIRES2-EGFP-prom(T)和pIRES2-EGFP-prom(C)重组过表达载体并转染至HEK293细胞。LC/MS/MS系统检测结果显示携带C等位基因的突变型UGT2B7转化MPA的酶活性降低,24h产物MPAG的生成量为野生型的63.3%(P<0.001)。结论 UGT2B7基因SNP rs7439366可影响对MMF的代谢能力,是导致患者间MMF代谢差异的因素之一。     

大肠癌组织中NRP-2、NRP-1的表达及其与肿瘤淋巴结转移的相关性研究

目的检测大肠癌组织中NRP-2、NRP-1的表达情况,探讨NRP-2、NRP-1的表达与大肠癌淋巴结转移的关系,以期揭示NRP-2与NRP-1在大肠癌发生和发展过程中的作用。方法采用免疫组化法检测55例大肠癌患者大肠癌组织、癌旁组织中NRP-2、NRP-1的表达情况,并分析NRP-2、NRP-1的表达与大肠癌淋巴结转移的相关性。结果 (1)大肠癌组织中NRP-2的阳性表达率为81.8%,癌旁组织中的阳性表达率为14.5%,差异有统计学意义(χ2=58.49,P<0.01);大肠癌组织中NRP-2高表达组的淋巴结转移阳性例数显著多于NRP-2低表达组(χ2=10.69,P<0.01)。(2)大肠癌组织中NRP-1的阳性表达率为70.9%,癌旁组织中的阳性表达率为25.5%,差异有统计学意义(χ2=22.76,P<0.01);大肠癌组织中NRP-1高表达组的淋巴结转移阳性例数显著多于NRP-1低表达组(χ2=7.73,P<0.01)。(3)大肠癌组织中NRP-2、NRP-1均为高表达的患者淋巴结转移率显著高于均为低表达者(χ2=10.76,P<0.01)。结论 NRP-2、NRP-1的表达可能与大肠癌的发生和发展密切相关,并且可能有协同作用。     

广州地区自然水域水中常见硅藻形态图谱及其分布特点

目的制作广州地区自然水域水中常见硅藻图谱并分析其分布特点。方法在广州地区自然水域抽取水样,离心沉淀,用硝酸消化处理沉淀物,去酸去盐并涂片镜检,观察、分析其中硅藻的形态并拍摄照片。结果在2010年3～8月间在测水域共检出硅藻50多种,并制作成图谱;硅藻分布特点:水中硅藻的密度或种类构成比例在同源而分隔的两个水域间可存在明显差异,在水体流动性不强的同一片水域中不同局域间也存在差异,存在潮汐性的河段水体中,这种差异相对较小。结论硅藻在自然静溢的水体中分布呈局域性,水体自身的来回流动及受到的外来扰动是使水中硅藻分布趋向均匀分布的重要原因。     

肿瘤新抗原疫苗对EGFR-TKI耐药肺癌的作用及机制研究

目的 通过采用肿瘤新抗原疫苗对产生表皮细胞生长因子受体-酪酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)耐药性的肺癌大鼠模型进行治疗,并进一步探究其机制.方法 采用胸部X射线照射,剂量为3 Gy,每周3次,构建大鼠肺癌模型,对EGFR-TKI治疗2周后,大鼠肿瘤大小不再减小,视为耐药性大鼠肺癌模型建立成功.采用标准的固相合成肽化学和...     

ICC患者血浆ctDNA突变检测数字PCR平台的建立及临床应用价值

目的建立KRAS G12D、TP53 C242S、IDH1 R132C突变数字聚合酶链反应(dPCR)检测平台,并初步评估其检测性能及临床应用价值。方法选取行切除手术的肝内胆管细胞癌(ICC)患者22例,设计KRAS G12D、TP53 C242S、IDH1 R132C突变位点的引物及探针,建立dPCR突变检测平台。并采用不同浓度的自配标准品质粒验证该平台的准确性、精密度、空白限、功能灵敏度及线性范围。将外周血dPCR检测结果与外周血Oseq-ctDNA及组织Oseq-T靶向测序结果进行比较。ICC患者行切除术后,每6个月采集1次外周血并跟踪随访,评估该突变检测平台对ICC患者术后疗效监测的作用。结果 dPCR平台的准确性良好[3种突变(KRAS G12D、TP53 C242S和IDH1 R132C)3个丰度的检测结果与理论值的偏差均<±15%],批内和批间精密度[变异系数(CV)]均<20%,空白限为4拷贝,功能灵敏度为0.1%,且在0.1%~10.0%范围内线性良好。ROC曲线分析结果显示,ctDNA突变谱诊断ICC的曲线下面积(AUC)为0.659,敏感性为31.8%,特异性为100%;与糖类抗原19-9(CA19-9)联合检测诊断ICC的AUC为0.841,敏感性为68.2%,特异性为100%。dPCR平台的检测结果与Oseq-ctDNA测序结果有较高的一致性(kappa=0.792,P=0.007)。随访结果显示,有1例ICC患者术后18个月KRAS G12D突变升高,与影像学检查确认的复发时间一致。结论建立了检测KRAS G12D、TP53C242S、IDH1 R132C突变的dPCR平台,可用于ICC患者的辅助诊断、疗效评估及术后动态监测。     

腹腔镜治疗儿童阑尾炎的系统评价

关于腹腔镜手术(LA)和传统开腹手术(OA)治疗小儿阑尾炎的报道很多,但大多为单中心或多中心联合临床研究或病例分析,而此领域的系统评价则几乎空白.     

先天性腹裂治疗方式20年系统评价

目的客观呈现20年来一期手术关腹和Silo技术分期修复治疗的先天性腹裂患儿存活情况。方法检索相关数据库，对两种方法治疗的腹裂患儿的存活率进行Meta分析，比较其差异。结果Meta分析显示，1988—2007年一期关腹组术后存活率高于Silo分期修复组，敏感性分析结果与之一致。亚组分析显示，1988。1997年两组存活率差异无统计学意义，1998。2007年一期关腹组存活率高于Silo分期修复组。结论1988—2007年一期手术关腹患儿术后存活率高于Silo技术分期修复。由于病例分组存在选择偏倚，难以得出一期关腹效果优于Silo技术分期修复的结论。     

飞利浦常导型0.23T磁共振冷水机故障分析与检修

飞利浦0.23T磁共振是常导型磁共振,为了保证设备正常工作,须通过冷水机制冷使磁体保持适当温度,从而达到磁场稳定。由于操作或保养不当,由冷水机故障导致磁共振泄磁停机的事件时有发生。以两例典型故障为例,详细分析冷水机故障导致磁共振停机产生原因及维修处理方法。     

MIG7-shRNA逆转录病毒表达载体的构建及包装细胞株的建立

目的:构建迁移诱导基因（migration inducing gene 7,MIG7）的逆转录病毒表达载体并测序,初步建立其包装细胞株。方法:根据MIG7已知序列设计合成所需脱氧寡核苷酸序列,并与线性RNAi-Ready pSIREN-RetroQ-ZsGreen载体连接。PCR扩增热转化后的连接产物,检测和挑取阳性克隆和阳性菌落,提取质粒后测序,与Gen-Bank中特异性MIG7-shRNA基因序列对比。包装并获取MIG7-shRNA重组逆转录病毒,qRT-PCR测定MIG7-shRNA重组逆转录病毒滴度并转染MHCC-97H细胞株。结果:构建的MIG7-shRNA表达载体与设计的完全一致,成功获得MIG7-shRNA逆转录病毒表达载体质粒CTC698-1-1和CTC698-2N-1转染的PT67细胞克隆株,pSIREN-M1病毒和pSIREN-MN病毒颗粒数约为1.0×108v.p/ml,能高效转染MHCC-97H细胞株。结论:成功构建了MIG7的逆转录病毒表达载体并建立其包装细胞株。