重组人骨形态发生蛋白-2/7融合基因的构建及其在大肠杆菌中的表达和初步活性测定

构建重组人骨形态发生蛋白－２／７融合体, 研究其在大肠杆菌中的表达及生物学活性。利用ＤＮＡ 重组技术,将编码人骨形态发生蛋白－２ （ＢＭＰ－２） 成熟肽的０．３６ ｋｂ 基因片段与编码人骨形态发生蛋白－７ （ＢＭＰ－７） 成熟肽的０．４４ｋｂ 基因片段连接,得到重组人骨形态发生蛋白－２／７ 融合基因; 经测序鉴定后,将其克隆到表达载体ｐＢＶ２２２中,转化大肠杆菌ＤＨ５α, 温度诱导表达。表达蛋白经初步纯化后测定其对培养小鼠成骨样细胞增殖、分化及碱性磷酸酶活性的影响。克隆质粒转化的工程菌,经４２℃诱导４～６ ｈ 后,高效表达重组人骨形态发生蛋白－２／７, 在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ上出现一新的蛋白带, 分子量约２９ ｋｕ,约占菌体总蛋白的２０％ ,表达蛋白以包涵体的形式存在,经初步纯化、裂解、复性后的ＢＭＰ－２／７ 蛋白具有促进成骨样细胞分化、增殖及增加碱性磷酸酶活性的作用。ＢＭＰ－２／７ 融合基因的构建和表达,可能提供一种全新的具有诱导成骨作用的蛋白     

改进的核糖基化试验检测疫苗中残余的百日咳毒素

脱毒的百日咳毒素 ( PT)是全细胞和无细胞百日咳疫苗 DTP( DTPa)的重要组分。出于安全原因 ,必须保证疫苗中 PT残余量不超过容许范围。最近报道 ,与鸟嘌呤核苷酸结合蛋白 ( G蛋白 )α亚单位 C端 2 0个氨基酸序列同源的合成肽 Gαi3C2 0是 PT核糖基化反应的良好底物。Cyr等据此建立的酶促反应 -高压液相层析 ( HPLC)双重测定法可测定 PT含量。作者对该法作了改进和简化 ,并与组氨酸敏感试验 ( HIST)进行了比较。　　将 PT与荧光素己酸标记的 Gαi3C2 0肽底物 ( HCAM- 1 )共同培养 ,然后用 HPLC进行定量分析 ,但对 Cyr法中的…     

细菌检验室间质评工作体会

目的 通过参加全省临床细菌室间质评，客观地反映实验室的水平，对保证和监督细菌检验质量起到重要作用。方法由广东省临床检验中心发放菌株，本室按照《全国临床检验操作规程》进行鉴定。结果细菌室间质控符合率逐年提高。结论通过室间质评工作，促进了我科临床细菌室水平的提高。     

补肝肾益气血方对60^Cγ射线所致小鼠骨髓损伤p53、p21^WARF1、caspase-3、CD34蛋白表达的影响

目的：探讨补肝肾益气血方对辐射损伤的防护作用及其机理。方法：设正常对照组、病理模型组、补肝肾益气血方高、低剂量组、阳性药物组5组。补肝肾益气血组给予补肝肾益气血方，阳性药物组给予复方阿胶浆，其余给予生理盐水。灌胃10天后，以60^Coγ射线全身照射小鼠造成辐射损伤，运用免疫组化法观察补肝肾益气血方对辐照小鼠骨髓p53、p21…WAF1、caspase-3、CD34等蛋白表达的影响。结果：该方能抑制受照鼠骨髓有核细胞p53基因突变，降低p53蛋白表达，促进p21…WAF1表达，显著降低Caspase-3表达，增加CD34表达。结论：补肝肾益气血方对60^Coγ射线所致小鼠骨髓损伤有较好保护作用，其作用机理主要为能促进受损骨髓造血机能恢复和改善造血微环境。     

先天性硬脊膜内囊肿并脊髓脊膜膨出1例

患儿 ,男 ,6个月。以出生后腰骶部肿块逐渐增大 6个月为代诉 ,于 2 0 0 2年 5月 2 5日来我院就医。查体见腰骶部有直径 6 .0cm皮下肿块 ,局部皮肤无红热现象 ,无色素沉着及毛发过度生长等。肿块质软 ,其内压力不随哭闹变化 ,蒂呈广基状 ,推之不移 ,肿块透光试验阴性。伴双足下垂、锤状趾畸形 ,股四头肌肌力正常 ,伸趾肌群及胫前肌肌力 0级 ,屈趾肌力 Ⅳ级 ;以疼痛刺激为据检查双足背、小腿外侧感觉消失 ;肛门括约肌松弛。膝反射、跟腱反射未引出 ,提睾反射存在。X线片示L4～ 5棘突缺如 ,腰骶部肿块呈广基蒂 ,通向椎管内 ,肿块内软组织影密…     

检测鼻咽癌IgG/EA抗体的临床意义

目的：探讨检测血清中IgG/EA在鼻咽癌中的应用价值。方法：应用间接免疫酶法测定苍梧县健康人和鼻咽癌病人IgG/EA抗体。结果：3895健康人抗体阳性率为2．1％，GMT为1：6．4；118例初诊鼻咽癌病人抗体阳性率为90．75，GMT为1：36．8，差异显著（P＜0．05），18例经治疗无瘤生存病人抗体阳性率27．8％，GMT1：4．8。结论：IgG/EA抗体检测可作为鼻咽癌诊断和预后判断的辅助指标。     

消渴康对糖尿病胰岛素抵抗大鼠胰岛素敏感指数、血栓素及内皮素的影响

目的 :探讨消渴康对糖尿病胰岛素抵抗大鼠的作用机制。方法 :用Wistar大鼠 60只 ,采用腹腔注射STZ 3 0mg/kg,加高脂高糖高热量词料喂养造膜 ,随机分为正常组、模型组、消渴康高剂量组、消渴康低剂量组、美吡达组 ,8周后处死。检测空腹血糖、胰岛素、胰岛素敏感指数、内皮素、一氧化氮、SOD、血栓素。结果 :检测项目指标消渴康高剂量组、美吡达组明显优于模型组 (P <0 0 1或P <0 0 5 )。结论 :消渴康能多途径治疗糖尿病。     

中西医结合治疗慢性粒细胞型白血病急粒变11例

慢性粒细胞型白血病（以下简称慢粒）急粒变的治疗效果较差，多数在短期内死亡。我们于临床中应用中西医结合的治疗方案，有较好的效果，现报道如下：【临床资料】诊断标准按照《第二届全国白血病治疗讨论会89.贵阳》[1]执行。患者均为住院病例，男性8例，女性3例，年龄最小21岁，最大45岁。5例具有加速期，加速期的时间为1－4个月，无明显加速期直接出现急变的病例有6例。【治疗方案】①化疗：羟基脲15mg/kg/日，6mp1．5mg/kg/日，强的松40mg／日。若是2周无效，则每周加倍各药量，直至骨髓抑制；若56天无效，则改变方案，并根据血象调整用…     

艾本加放疗治疗骨转移癌的临床观察

目的观察艾本加放疗与单放疗治疗骨转移癌的疗效差异.方法采用2002年7月至2003年7月间的单发性骨转移患者40例,随机分为两组.结果单放疗组疼痛总缓解率为85.0%,放疗＋艾本组为90.0%,两组比较无显著性差异（P〉0.05）.但放疗＋艾本组止痛起效较快且新的骨转移发生少（P〈0.05）.结论艾本与放疗合并使用治疗恶性肿瘤单发性骨转移止痛快,并能防止新的骨转移发生.     

青藤碱对肾小管上皮细胞MCP-1和ICAM-1基因表达的影响

目的:探讨青藤碱对体外培养的肾小管上皮细胞单核细胞趋化因子1(MCP-1)和细胞间黏附分子1(ICAM-1)mRNA表达的干预作用。方法:体外培养小鼠肾小管上皮细胞株(MCT),分为正常对照组、模型组和干预组。模型组和干预组细胞予以IL-1β(10ng/ml)刺激,干预组细胞同时加不同浓度的青藤碱,继续培养48h,RT-PCR检测细胞MCP-1和ICAM-1 mRMA的表达,Quangtity One 1-D分析软件分析积分光密度,计算MCP-1和ICAM-1电泳条带的积分光密度和GAPDH积分光密度的比值,用SPSS统计软件进行统计分析。结果:IL-1β可显著增强肾小管上皮细胞MCP-1和ICAM-I mRNA的表达,青藤碱各个浓度均能显著下调MCP-1和ICAM-1 mRNA的表达,并呈一定的剂量依赖性。结论:青藤碱能显著下调肾小管上皮细胞MCP-1和ICAM-1的mRNA表达,提示其具有防治肾小管肾间质炎症损伤作用。