复方积雪草煎剂对单侧输尿管结扎小鼠肾小管间质骨架蛋白α-SMA、vimentin表达的影响

目的：通过对复方积雪草煎剂对单侧输尿管结扎（unilateral ureteral occlusion，UUO）小鼠模型肾小管间质骨架蛋白α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin，α-SMA）、波形蛋白（vimentin）表达影响的研究，探讨其防治肾间质纤维化的作用和机理。方法：采用小鼠UUO模型，用复方积雪草水煎剂进行灌胃干预，血管紧张素转化酶抑制剂（angiotensin-converting enzyme inhibitor，ACEI）福辛普利作为对照。MASSON染色观察肾组织病理及间质纤维化；肾组织中α-SMA、vimentin表达采用免疫组化和Westem-blotting方法检测；基因表达采用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）方法。结果：UUO模型组和治疗组小鼠肾间质纤维化程度以及α-SMA、vimentin蛋白表达和基因表达水平均较假手术组显著增高，而复方积雪草煎剂、福辛普利治疗组肾间质纤维化和间质骨架蛋白的表达均较模型组显著降低。结论：复方积雪草可显著抑制肾小管上皮细胞或间质细胞的表型转化，提示降低肌成纤维细胞的积聚是其防治肾间质纤维化的重要机制之一。     

尿酸利仙含药血清对TNF-α诱导的人血管内皮细胞ICAM-1基因表达的影响

目的：观察不同浓度肿瘤坏死因子-α（TNF-α）在不同时闻对人血管内皮细胞（Endothelial cell of vessels，ECV）中细胞间粘附分子-1（ICAM-1）基因表达的影响及中药尿酸利仙（含药血清）的干预作用。方法：①体外培养人血管内皮细胞，分别用不同浓度（12．5、25、50μg／mL）的TNF-α刺激，并用25μg／mL的TNF-α分别孵育细胞8、16、24、48h；②用25μg/mL的TNF-α孵育细胞16h，同时用含不同浓度（2．5％、5％、10％）尿酸利仙含药血清的培养液进行干预。用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）技术测定血管内皮细胞ICAM-1的mRNA表达。结果：①低、中、高浓度TNF-α刺激均可显著上调内皮细胞ICAM-1 mRNA的表达，且体现了一定的浓度梯度关系，但刺激组间无显著性差异。②25μg／mL的TNF-α在8h、16h、24h和48h均可显著上调内皮细胞ICAM-1 mRNA的表达，各干预组间无显著性差异。③低、中、高浓度的尿酸利仙含药血清干预均可显著降低ICAM-1 mRNA的表达（P≤0．01），并以中浓度尿酸利仙含药血清作用最为显著。结论：TNF-α能显著上调内皮细胞表面黏附分子ICAM-1的mRNA表达，而尿酸利仙含药血清抑制病理条件下ICAM-1基因水平的过量表达，可能是其减轻TNF-α诱导的人血管内皮细胞炎症损伤的机制之一。     

白芍总苷调节系膜增生性肾炎大鼠IL-1及其受体拮抗剂表达的实验研究

目的研究白芍总苷（TGP）制剂对系膜增生性肾炎（MsPGN）模型大鼠IL-1及其受体拮抗剂（IL-1Ra）表达的影响。方法采用尾静脉注射葡萄球菌肠毒素及腹腔和尾静脉交替注射牛血清白蛋白以建立MsPGN大鼠模型,随机分为正常组、模型组、TGP低、中、高剂量组和雷公藤多甙（TW）组及TGP与TW联合用药组,分别检测各组大鼠治疗前、后24h尿蛋白定量和肾功能指标,观察各组大鼠肾组织病理学改变,并采用RT-PCR法检测肾组织IL-1、IL-1RamRNA表达水平。结果TGP各治疗组大鼠24h尿蛋白定量和血肌酐水平均较模型组显著降低（P〈0.01或0.05）;肾组织系膜基底膜面密度较模型组显著减少（P〈0.01）,毛细血管袢面密度较模型组显著增加（P〈0.01）;肾组织IL-1mRNA表达水平较模型组显著减少（P〈0.01或0.05）,IL-1ramRNA表达水平显著高于模型组（P〈0.01或0.05）,并呈一定剂量依赖趋势。结论TGP可减少MsPGN模型大鼠24h尿蛋白定量,并改善肾功能和肾脏病理损害,其作用机制可能与调节肾组织IL-1和IL-1ramRNA的表达水平有关。     

尿酸利仙含药血清对TNF-α介导内皮细胞增殖的影响

目的:H-细胞水平探讨尿酸利血含药血清对TNF-α介导的内皮细胞增殖的影响.方法:用MTT法测定不同浓度(0～3000u/ml)的肿瘤坏死因子-α对人血管内皮细胞(Endothelial cell of vessels,ECV)增殖的影响和不同浓度(1%～5%)的尿酸利仙含药血清对中浓度(900u/ml)TNF-α介导ECV增殖的作用.结果:与Ou/ml浓度组相比,浓度为900u/ml TNT-α对ECV增殖有促进作用,浓度为3000u/ml TNF-α对ECV增殖有抑制作用,与同一血清浓度的TNF-α组相比,2%、5%含药血清组对中浓度TNF-α介导ECV增殖有抑制作用.结论:尿酸利仙含药血清能降低TNT-α活性,起保护内皮细胞的作用.     

积雪草甙合大黄素对TNFα诱导肾小管上皮细胞C3上调的干预作用

目的：探讨积雪草甙合大黄素对肿瘤坏死因子α（TNFα）诱导的BALB／C小鼠肾小管上皮细胞（mTEC）补体核心成分GmRNA及蛋白表达的干预作用。方法：采用BALB／C原代mTCE,模型组TNFα5ng／ml诱导24小时,治疗组在TNFα诱导的同时,分别以积雪草甙1、2、4μg／ml合大黄素0．1、0．2、0．4μg／ml进行干预,于24小时后分别提取细胞上清及RNA,应用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）和酶联免疫方法（ELISA）分别检测mTEC C3 mRNA和蛋白的表达水平。结果：正常BALB／C小鼠肾小管上皮细胞具有一定的GmRNA和蛋白表达,经TNFα诱导后,c3mRNA和蛋白表迭均明显上调,积雪草甙合大黄素干预后,mTEC C3mRNA及蛋白表达水平均出现不同程度的下调,呈一定的剂量依赖关系。结论：积雪草甙合大黄素能够抑制炎性细胞因子TNFα所致的肾局部G3过度产生,具有一定的免疫抑制作用。     

复方芪苓无糖颗粒剂对高脂血症大鼠脂质代谢紊乱调节的研究

目的:探讨复方芪苓无糖颗粒剂对高脂血症大鼠血脂调节及肝脏保护作用。方法:将SD大鼠随机分为正常组与造模组,脂肪乳剂建立高脂血症大鼠模型后,将造模组大鼠随机均等分为模型组、血脂康胶囊组、复方芪苓无糖颗粒剂高、中、低剂量组。检测血清总胆固醇(TC)、血清甘油三脂(TG)、血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平。结果:①与模型组比较,各给药组血清TC、LDL-C水平均显著性降低(P0.01),血清HDL-C水平显著性升高(P0.01);各给药组血清ALT、AST均有不同程度降低(P0.01)。②与血脂康组比较,复方芪苓无糖颗粒降低血清TC、LDL-C,升高血清HDL-C均有统计学差异(P0.05,P0.01);复方芪苓无糖颗粒高、中剂量组降低血清ALT最显著,有统计学差异(P0.01)。结论:复方芪苓无糖颗粒具有显著的降血脂、保护肝脏的作用。     

低剂量甲基强的松龙诱导淋巴细胞糖皮质激素耐药与P-糖蛋白关系的研究

目的 研究低剂量甲基强的松龙(糖皮质激素)诱导淋巴细胞糖皮质激素耐药与P-糖蛋白的关系.方法 取健康人外周血,分离纯化淋巴细胞,予小剂量(2μg·mL-1)甲基强的松龙刺激72 h为耐药组,对照组常规培养;用流式细胞术检测P-gp表达;MTT法检测激素耐药倍数;甲基强的松龙(200μg·mL-1)刺激2组细胞24 h,用流式细胞术检测Annexin V(%)并分析P-gp与其相关性;耐药组,用5 μg·mL-1维拉帕米联合甲基强的松龙(200 μg·mL-1)刺激,检测Annexin V(%).结果 小剂量甲基强的松龙诱导后的淋巴细胞P-gp表达,耐药组较对照组显著升高,为对照组的(2.89±0.21)倍;甲基强的松龙刺激后,耐药组细胞凋亡率显著低于正常组,与Annexin V呈显著负相关;维拉帕米干预可显著增加甲基强的松龙诱导细胞凋亡的敏感性.结论 P-gp介导耐药可能是导致临床治疗后期的耐药或药物依赖的重要机制之一.     

多毛孢菌菌粉抑制庆大霉素诱导的猪肾小管上皮细胞凋亡及纤维化生长因子的表达

目的：研究人工培养的多毛孢菌菌粉水提物对庆大霉素诱导的近端肾小管上皮细胞损伤、凋亡的保护作用及对碱性纤维化生长因子(basic fibro-blast growth factor，bFGF)mRNA表达的影响。方法：将猪近端肾小管上皮细胞株(LLCPK)复苏培养，分成正常对照组、庆大霉素组和多毛孢菌组，除对照组外，用庆大霉素刺激，多毛孢菌组同时加多毛孢菌菌粉水提物干预。以MTT法观测存活细胞数；并测定细胞上清液N-乙酰-β-D-氨基糖苷酶(NAG)浓度；荧光标记细胞表面Annexin V，以细胞流式法测定其表达；RT-PCR检测细胞碱性纤维化生长因子mRNA的表达。结果与结论：庆大霉素可引起细胞存活率的显降低，N-乙酰-β-D-氨基糖苷酶浓度显增高；并提高细胞Annexin V的表达，即诱导白细胞调亡，和诱导LLCPK细胞bFGF mRNA的表达。多毛孢菌菌粉水提物能提高肾小管上皮细胞LLCPK存活率，降低细胞调亡数，并显抑制bFGF mRNA的表达。     

血清胱抑素C:一种简便的肾小球滤过率指标

肾小球滤过率(glomerular filtration rate,GFR)是反映肾功能最重要的指标.目前临床上常用来反映肾小球滤过功能的指标如血肌酐(Scr)、内生肌酐清除率(Ccr)等都有一定的局限性,且不同程度地受到一些肾内或肾外因素的干扰.为此寻找新方法来测定肾功能,是众所关心的问题.近年来,测定血清胱抑素C(Cystatin C)来反映GFR水平,受到人们关注.     

尿Ⅳ型胶原浓度与IgA肾病肾组织损害的关系

目的:观察IgA肾病(IgAN)患者尿Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)浓度及其与肾组织Col-Ⅳ表达和肾脏病理之间的关系,以期寻找一种能反映IgAN肾损害的非创伤性临床检测指标.方法:ELISA法测定IgAN患者血、尿Col-Ⅳ浓度;免疫组化法检测肾组织Col-Ⅳ表达;应用计算机病理图像分析系统对肾小球基质基底膜面密度、小球细胞个数及肾小管间质病变程度进行半定量分析,观察尿Col-Ⅳ浓度与IgAN患者肾组织Col-Ⅳ表达及肾病理损伤的关系.结果:IgAN患者尿Col-Ⅳ浓度、肾组织Col-Ⅳ表达较健康人明显增高,尤其是增生硬化和间质纤维化显著者更为明显;尿Col-Ⅳ浓度与肾组织Col-Ⅳ表达、肾小球基质基底膜面密度、小管间质损害显著正相关,且在轻度细胞外基质积聚和小管间质损害时,尿Col-Ⅳ浓度即增高;与小球内细胞个数呈负相关,而与肾小球系膜区、毛细血管襻区免疫球蛋白IgA、IgG、IgM和C3沉积的量和沉积范围无关,与血Col-Ⅳ水平无显著相关.结论:IgAN患者尿Col-Ⅳ浓度明显增高,尿Col-Ⅳ水平可作为监测IgAN患者早期肾硬化的一项指标.