葡萄糖对SVAREC细胞P-糖蛋白转运和表达的影响

目的探讨葡萄糖对内皮细胞SVAREC膜转运蛋白P-糖蛋白的底物转运和表达的影响。方法 1.用含10％胎牛血清的DMEM培养液将SVAREC细胞传入24孔板,等细胞贴壁后将细胞分成4组,分别换以下条件刺激,A组:低葡萄糖(5.5mmoL/L);B组:高葡萄糖(25mmol/L);c组:低葡萄糖(5.5mmol/L)+Verapamil(10~(-4)Mol);D组:高葡萄糖(25mmol/L)+Verapamil(10~(-4)/Mol);每组都同时用不同浓度的秋水仙碱(0;12.5;25;50ug/ml)刺激72小时,以MTT法测定细胞的耐受性。2.按上述方法将细胞传入培养皿中,待细胞贴壁后,分别换葡萄糖浓度为5.5mmol/L,25mmol/L和50mmol/L的DMEM培养液继续培养72小时,提取细胞膜蛋白,Westem-blot检测P-糖蛋白的蛋白表达。结果高糖处理的细胞对秋水仙碱(P-糖蛋白的转运底物)细胞毒的耐受性明显低于低糖处理的细胞,在秋水仙碱浓度为25ug/ml时,差异最为显著(P<0.01),Verapamil(P-糖蛋白转运的特异抑制剂)共处理的低糖组细胞对秋水仙碱的耐受性显著降低(秋水仙碱浓度为25ug/L时,P<0.01),而Verapamil处理后的高糖和低糖组细胞对秋水仙碱的耐受性无显著性差异。Westem-blot结果显示5.5mmol/L葡萄糖刺激的细胞P-糖蛋白蛋白表达明显高于25mmoL/L和50mmoL/L葡萄糖刺激的细胞,而25mmol/L和50mmol/L之间没有显著差异。结论高糖能够降低内皮细胞P-糖蛋白对其底物的转运和表达,增加其底物秋水仙碱在细胞中的积累,使细胞的耐受性下降。     

解脲脲原体和人型支原体两种试剂盒的应用评价

目的对2个公司生产的液体支原体培养基检测解脲脲原体（Uu）和人型支原体（Mh）的效果进行对照评价。方法连续收集妇产科病房和门诊的生殖道分泌物拭子200例。接种于2个公司生产的液体支原体培养基，分别加入鉴定板条，培养24h、48h后观察2种试剂的实验结果。从阳性瓶中吸出20μL接种A7琼脂。放置cO：孵箱35℃培养48h。结果200例临床标本中丽珠试剂uu阳性率为26．0％；梅里埃试剂uu阳性率为26．5％。丽珠试剂Mh阳性率为4．0％；梅里埃试剂Mh阳性率为1．0％。丽株试剂检测52株uu阳性和梅里埃试剂检测53株Uu阳性在A7琼脂平板上均有典型菌落生长。结论丽珠试剂和梅里埃试剂Uu阳性，二者符合率为98．1％。两者在Uu阳性观察药敏时强力霉素、克拉霉素、阿奇霉素、氧氟沙星、交沙霉素敏感率较一致。     

泌尿生殖道分离无乳链球菌药物敏感性分析

目的了解泌尿生殖道无乳链球菌感染及耐药状况，为临床用药提供依据。方法对临床送检的泌尿生殖道标本常规培养鉴定，并对分离出的无乳链球菌进行纸片扩散法药敏试验，对红霉素耐药、克林霉素敏感的菌株做D试验检测。结果144株无乳链球菌（尿77株，前列腺液36株，阴道分泌物31株）药敏结果显示，对万古霉素、利奈唑胺、青霉素和头孢曲松的耐药率最低，全部144株无乳链球菌中未发现耐药株；左氧氟沙星的耐药率较低，为16．2％；红霉素和克林霉素耐药率较高，分别为56．2％和53．5％。D试验阳性率为26．7％。结论从泌尿生殖道分离的无乳链球菌对青霉素、氨苄西林和头孢菌素类抗菌药物的敏感性较高，但对大环内酯类和克林霉素已有一定的耐药。     

HBV感染血清标记物与HBV-DNA定量结果分析

我国约有1.2亿慢性HBsAg携带者,每年约有30万人死于慢性乙型肝炎相关性疾病,且患者也是居高不下.临床对乙肝患者的检测手段也多种多样.其中最常用的是乙肝两对半和HBV-DNA定量检测.因乙肝两对半的检测方法有限,且其组合模式也多种多样,常导致临床诊断困难.而荧光定量PCR法检测HBV-DNA不仅准确度高,且定量的数据能反映体内乙肝病毒复制的程度,因此,我们对本院300例不同HBV感染模式的患者与HBV-DNA定量结果进行了对比分析.     

血液透析患者肝素个体化的相关因素分析

研究维持性血液透析患者体内肝素化透析时影响肝素用量的相关因素，为肝素个体化提供依据。方法：５２例血液透析患者，测定血液中抗凝血酶－Ⅲ抗原含量，抗凝血酶－Ⅲ活性，同时检测血色素、红细胞压积、血小板及相关生化参数和干体重。结果：逐步回归分析，肝素用量随患者体内血小板的数量和抗凝血酶Ⅲ抗原含量的不同而改变。两两变量相关分析，肝素用量与血小板、抗凝血酶-Ⅲ抗原含量的相关系数分别为０．５４８和－０．５０２，相关均有显著性（Ｐ＜０．０１）。结论：维持性血液透析患者体内肝素化透析时肝素用量与血小板数量、抗凝血酶－Ⅲ抗原含量相关，而与血色素、红细胞压积、甘油三酯、胆固醇、抗凝血酶－Ⅲ活性无关，与干体重、透析时间长短也无关。     

阿霉素肾病大鼠肾小管间质损害及益气血祛风湿方的干预作用

目的：探讨益气血祛风湿方对阿霉素肾病肾小管间质损伤的有效治疗作用,为临床应用提供实验室理论依据。方法：采用阿霉素一次性尾静脉注射诱导的肾病模型,造模2周后用益气血祛风湿方或黄芪当归水煎剂等干预治疗。实验于第6周末处死大鼠,留取肾脏。采用HE染色观察肾组织病理改变;RT-PCR测定肾组织中TGF-β1基因表达;采用免疫组化技术检测肾小管间质MCP-1、TGF-β1的蛋白表达。结果：肾脏病理结果显示,模型组大鼠肾小管上皮浊肿、严重的空泡变性;肾小管不同程度扩张;可见较多蛋白管型;肾间质出现小灶性～灶性炎细胞浸润和灶性纤维化。各治疗组大鼠肾小管扩张、浊肿及间质炎细胞浸润等病理改变均较模型组减轻,肾间质纤维化程度也显著低于模型组。模型组大鼠肾组织和小管间质TGF-β1表达均显著增多,MCP-1阳性表达也显著增加,各治疗组肾小管间质中的MCP-1、TGF-β1表达较模型组显著降低,益气血祛风湿方组作用显著优于芪归治疗组。结论：益气血祛风湿方可显著改善肾小管间质的炎症损伤和纤维化程度,机制可能与其显著降低肾小管间质炎症因子和促纤维化细胞因子表达的作用有关。     

输尿管结扎对小鼠肾皮质骨架蛋白与炎症因子表达的影响

目的 通过对UUO小鼠肾组织俚一平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）、波形蛋白（vimentin）、炎症介质细胞间粘附分子（intercellular adhesion molecule 1,ICAM-1）、单核细胞趋化因子（monocyte chemoattractant protein1,MCP-1）表达的研究,探讨肾间质纤维化机制。方法实验取单侧输尿管结扎（UUO）21天小鼠结扎侧肾组织,肾组织α-SMA、Vimentin表达采用免疫组化技术;ICAM-1蛋白质表达采用Western-blotting方法检测;MCP-1基因表达采用反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）方法。结果 UUO模型组小鼠肾小管间质α-SMA、Vimentin的表达较假手术组显著增高,肾组织中ICAM-1蛋白表达、MCP-1基因表达亦较假手术组显著增高。结论 输尿管结扎21天可诱导肾小管间质肌成纤维细胞的大量积聚,可能与肾组织炎症因子的高度表达相关。     

针刺治疗颈性眩晕

目的 观察针刺治疗颈性眩晕的疗效.方法 将107例颈性眩晕患者分为两组治疗组57例,对照组50例.治疗组以针刺手法治疗,对照组以西药治疗.结果 治疗组总有效率明显高于对照组(P＜0.01).结论 针刺治疗颈性眩晕疗效明显优于西药治疗.     

复方积雪草有效组分对人肾小管上皮细胞补体C3表达的影响

目的：探讨复方积雪草有效组分——积雪草苷／大黄素干预肿瘤坏死因子-α（TNF-α）诱导的人肾近曲小管上皮细胞（HPTEC）补体C3 mRNA及蛋白的表达水平。方法：采用HPTEC，模型组TNF-α 10ng／ml诱导，治疗组在TNF-α诱导的同时，以不同浓度的积雪草苷、大黄素以及积雪草苷合大黄素进行干预，于24h后分别提取细胞RNA及上清，应用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）和酶链免疫方法（ELISA）分别检测HPTEC C3 mRNA和蛋白的表达。结果：正常HPTEC具有C3 mRNA和蛋白表达，经TNF-α诱导后G表达明显上调，用不同浓度的积雪草苷、大黄素以及积雪草苷合大黄素干预后，C3 mRNA及蛋白水平表达出现不同程度的下调，呈一定的剂量依赖关系和协同作用。结论：复方积雪草有效组分能够抑制炎性细胞因子TNF-α上调所致的肾局部G过度产生。     

白三烯受体拮抗剂对阿霉素肾病大鼠肾间质纤维化的干预作用及其机制研究

目的探讨白三烯受体拮抗剂孟鲁司特（Montelukast,MON）对阿霉素肾病大鼠肾间质纤维化的干预作用及其可能机制。方法将制成阿霉素肾病模型的27只SD大鼠随机分为模型组、高剂量和低剂量MON干预组、强的松干预组,并设正常对照组,分别观察各组24h尿蛋白排泄量、血肌酐（Scr）、内生肌酐清除率（Ccr）、尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）和肾脏病理变化;同时采用免疫组化、免疫印迹和RT-PCR法检测肾间质中α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）蛋白质和基因表达水平。结果模型组大鼠24h尿蛋白排泄量和尿NAG均较正常组增高（P〈0.05）,肾组织病理形态可见肾小球病变轻微,但肾间质纤维化相对面积和肾间质α-SMA蛋白、基因表达水平均高于正常组（P〈0.05）;各治疗组大鼠肾间质α-SMA蛋白、基因表达水平和肾间质纤维化相对面积均较模型组下降（P〈0.05）;实验第6周时低剂量和高剂量MON组Scr、Ccr水平与正常组比较差异无统计学意义（P〉0.05）,且MON高剂量组Scr和Ccr水平优于模型组（P〈0.05）。结论MON可改善阿霉素诱导肾病大鼠肾小管间质病变,减轻肾间质纤维化程度;其机制可能与通过抑制肾间质α-SMA过度表达有关。