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41.
42.
人Fas配体蛋白在大肠杆菌中的融合表达与应用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:在大肠杆菌中融合表达人Fas配体蛋白。方法:应用RT-PCR技术,从激活的人外周血淋巴细胞中提取总RNA,扩增Fas配体cDNA,克隆入PCR2.1载体,测序验证后,克隆入带有组氨酸盒的表达载体pQE-31,在大肠杆菌中表达,经亲和层析柱纯化后,用SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物。结果:表达的融合蛋白为人Fas配体,其相对分子质量(Mr)为40000。;经透析复性后,具有诱导Jurkat细胞凋亡的作用,用该蛋白分子免疫BALB/c小鼠制备抗血清,以间接ELISA检测了部分自身免疫病与肿瘤患者血清中可溶性的F 苛的含量。结果与进口试剂盒的灵敏性相似。结论:获得FasL单克隆抗体,深入研究FasL的应用提供了材料。 相似文献
43.
Cyr61是CCN家族成员之一,人的Cyr61基因位于染色体1q22.3,其编码的蛋白具有镶嵌型多模组结构,可与多种因子相互作用,是一种十分重要的细胞基质调节因子,在细胞的黏附、迁移与增殖以及血管生成、炎症反应和组织重构等重要生理、病理过程中发挥重要的调节作用。尤其重要的是,Cyr61参与肿瘤的发生发展过程,且在不同的肿瘤中其作用有所不同。Cyr61在乳腺癌、神经胶质瘤等肿瘤中起诱导肿瘤细胞增殖和迁移的促癌作用,而在非小细胞肺癌、子宫内膜癌等肿瘤中起到促进细胞凋亡等抑癌作用。Cyr61在不同细胞中的表达受多种信号通路的调控,可与多种整联蛋白结合激活不同的下游通路,调节Bax、Bad、p53和p21WAF1等分子的表达。作为细胞信号转导通路下游的一个重要角色,Cyr61可能成为未来肿瘤药物治疗中的重要靶点。 相似文献
44.
SLA (swineleukocyteantigen )特异性CD4+T细胞系和自身APC以及猪PBMC共同孵育时 ,T细胞增殖反应很强 ,而同仅有自身APC或猪PBMC刺激时的T细胞增殖有显著差异。提示抗原特异性CD4+T细胞系以间接途径识别SLA抗原。该识别能被抗人CD4和HLAII类抗体阻断 ,而抗SLAII类抗体阻断作用很弱 ,表明HLAII类分子在间接识别中起重要作用 ,这一结果不同于直接从外周血中分离的未经抗原致敏的T细胞。直接识别猪APC递呈的抗原。有可能异种移植初期以直接识别为主导 ,随着移植物存活时间的延长逐渐转为间接识别 相似文献
45.
目的探讨外源性CYR61在人外周血单个核细胞(PBMC)中表达后诱导其配体——整合素表达上调的生物学特性。方法构建人源全长CYR61真核重组表达质粒pcDNA-CYR61-Fc,经DNA测序确认其序列正确后,将该质粒转染COS7细胞并用蛋白免疫印迹实验检测其蛋白的表达;用脂质体法转染人PBMC,实时定量PCR检测CYR61表达量和相关整合素的表达格局。结果测序显示所构建的CYR61重组表达质粒序列正确;将该质粒转染COS7细胞后,免疫印迹实验表明转染的细胞胞浆和营养液上清中都含有CYR61-Fc融合蛋白;将该质粒转染人PBMC,经植物凝集素刺激后,外源性CYR61迅速表达,24 h后表达量达到高峰,然后迅速下降,48 h后基本回落,整合素分子αv、αM、β3及β5表达明显上调(P<0.05),以β5最为显著(P<0.01)。结论成功构建的pcDNA-CYR61-Fc真核表达质粒能有效地表达和分泌CYR61-Fc融合蛋白;表达的融合蛋白通过自分泌或旁分泌途径上调PBMC整合素分子的表达。 相似文献
46.
解脲脲原体细胞致病作用的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
本文报道用组织培养测定解脲脲原体致病性。用4珠解脲脲原体感染恒河猴肾MA104细胞,结果表明感染细胞很快产生细胞病变,主要表现为胞浆出现空泡,进而细胞膜破裂、胞浆消失、细胞变圆、脱落。细胞核病变较轻,与细菌L型感染细胞不同。 相似文献
47.
目的 探索混合皮肤移植中,自体皮岛诱发移植免疫耐受的免疫机制,方法 在体外建立混合表皮淋巴细胞(MELC)培养体系,以反映移植受者对皮肤移植物的免疫排斥反应,同时,将自体表皮细胞引入已建立的混合表皮淋巴细胞培养体系,以模仿混合皮肤移植中的自体皮岛效应,并分析发挥抑制效应的细胞来源,结果 自体角质形成细胞可抑制淋巴细胞对同种异体抗原的增殖,结论 自体皮岛中的角质形成细胞参与对同种异体抗原的的呈而诱导移植物耐受。 相似文献
48.
老年鼠脑老化神经细胞凋亡及基因调控的研究 总被引:6,自引:2,他引:6
目的研究老年鼠脑老化神经细胞的凋亡及基因调控。方法用TDT法及流式细胞仪观察不同鼠龄海马神经细胞凋亡及凋亡发生率,并用免疫组织化学检测bcl-2、bcl-x1及bax基因表达。结果老年组神经细胞在荧光显微镜下显示较典型的细胞凋亡特点,老年组海马神经细胞凋亡率与青年组比较有显著差异。老年鼠bcl-2,bcl-x1表达下调,而bax的表达量明显增加。结论脑老化过程中存在着以细胞凋亡形式的神经细胞的死亡。细胞凋亡的变化与基因的表达相一致 相似文献
49.
R啨sum啨 Objectif Cette啨tudeapourbutd 啨valuerl effetdutrioxyded arsenicsurl apoptoseetsurladiff啨renciationdeslign啨escellulairesducancergastrique . M啨thodes Leslign啨escellulairesducancergas trique :MKN45deSGC790 1sonttrait啨esparletrioxyded arsenicauxdiff啨rente… 相似文献
50.
重组人可溶性TRAIL分子诱导细胞凋亡机理探讨 总被引:4,自引:0,他引:4
目的 探讨重组人可溶性TRAIL蛋白(rhsTRAIL)诱导细胞凋亡的机理。方法 应用DNA染料和流式细胞仪定性分别检测rhsTRAIL诱导的细胞凋亡;流式细胞仪检测靶细胞膜表面TRAIL受体表达格局,荧光定量法检测凋亡细胞中Caspase-3活性。结果 100ng/ml人可溶性TRAIL蛋白分子对外周血淋巴细胞无明显毒性,但可诱导肿瘤细胞凋亡,不同的肿瘤细胞凋亡率有差异。凋亡范围在26%-57%。不同细胞表面TRAIL受体表达量不同,外周血淋巴细胞的死亡受体DR4,DR5受体表达5%,而诱骗受体DcR1表达55%,相反肿瘤细胞上的DR4,DR5表达高(40%——88%)。而DcR1表达很低(8%-17%),rhsTRAIL诱导HL-60细胞发生凋亡,其细胞内Caspase-3活性增高,ActD可增加TRAIL抑制细胞生长活性。结论 重组人可溶性TRAIL蛋白分子可诱导肿瘤细胞凋亡,凋亡活性TRAIL受体类型及Caspase-3活性增高有关。 相似文献