基于测序的人类白细胞抗原分型和PCR短串联重复序列技术在人胚胎干细胞鉴定中的应用

目的 探讨基于测序的人类白细胞抗原分型(HLA-sequencing-based typing,HLA-SBT)和PCR短串联重复序列(short tandem repeat,STR)技术在人胚胎干细胞(human embryonic stem cell,hESC)应用前检测中的运用,建立人胚胎干细胞系的基因型档案.方法 人胚胎干细胞系SYSU-I、SYSU-3,分别培养到20代、40代,应用PCR寡核苷酸特异测序探针(sequence specific olignucleotide probe,SSO)技术检测两株细胞系的HLA-A、-B、-DR位点的低分辨分型,再利用HLA-SBT技术检测两株细胞系的HLA-A、-B、-DR位点的高分辨分型.应用PCR-STR技术检测两株细胞系的基因遗传标记.结果 获得两株hESC细胞系的HLA高分辨分型和STR基因型.结论 可以运用HLA-SBT和PCR-STR技术建立人胚胎干细胞应用前的基因型档案.     

广州地区无偿献血者不规则抗体筛查结果分析

目的了解广州地区无偿献血者不规则抗体的频率、类型、特异性和抗体效价,为输血前检查策略的制定提供依据。方法随机抽取2012年11月至2013年3月广州血液中心无偿献血者血液样本20 160例,选择含特定抗原的筛选红细胞,采用聚凝胺介质微板法进行不规则抗体初筛,阳性样本使用试剂筛选细胞和试管法进行确证试验,仍然阳性的样本采用谱细胞微柱法进行特异性鉴定并测定效价。结果 20 160名广州地区无偿献血者中共筛查出不规则抗体97例,检出率为0.48%,其中IgG型抗-E 1例,IgM型抗体96例,包括抗-P1 4例,抗-M 2例,抗-Lewisa+b1例,上述抗体效价均不超过8;冷自身抗体59例和非特异性不规则抗体30例。女性不规则抗体阳性率显著高于男性(χ2=18.720 1,P=1.51E-05)。结论广州献血人群中存在低比例的不规则抗体,对献血者进行不规则抗体筛查有利于电子配血及血液预警系统的建立,对提升临床用血安全性、有效性和智能化水平有着重要意义。     

广州地区无偿献血者不规则抗体筛查结果分析

目的了解广州地区无偿献血者不规则抗体的频率、类型、特异性和抗体效价。为输血前检查策略的制定提供依据。方法随机抽取2012年11月至2013年3月广州血液中心无偿献血者血液样本20160例。选择含特定抗原的筛选红细胞,采用聚凝胺介质微板法进行不规则抗体初筛,阳性样本使用试剂筛选细胞和试管法进行确证试验,仍然阳性的样本采用谱细胞微柱法进行特异性鉴定并测定效价。结果20160名广州地区无偿献血者中共筛查出不规则抗体97例,检出率为0．48％,其中IgG型抗-E1例,IgM型抗体96例,包括抗-P14例,抗-M2例,抗-Lewisnn1例,上述抗体效价均不超过8;冷自身抗体59例和非特异性不规则抗体30例。女性不规则抗体阳性率显著高于男性（xz=18．7201,P=1．51E．05）。结论广州献血人群中存在低比例的不规则抗体,对献血者进行不规则抗体筛查有利于电子配血及血液预警系统的建立,对提升临床用血安全性、有效性和智能化水平有着重要意义。     

机体自发清除丙型肝炎病毒和主要组织相容性复合体区域单核苷酸多态性关联的初步研究简

目的了解中国丙型肝炎病毒（hepatitisCvirus,HCV）感染人群机体自发清除HCV和主要组织相容性复合体（major histocompatibility complex,MHC）区域单核苷酸多态性（single—nucleotide polymorphism,SNP）的关联性。方法选择96名抗-HCV阳性并成功随访1年的献血者为研究对象,分为自发清除组（HCVRNA阴性）和慢性感染组（HCVRNA阳性）,采用Illumina MHC Mapping Panel试剂盒对两组人群进行MHC区域的SNPs检测,利用SPSS16．0分析软件、Matlab软件编程,采用t检验、x2检验及分层分析等方法对各SNP位点及性别、年龄因素与HCV清除与否进行关联性分析。结果获得HCV自发清除组和慢性感染组样本分别为19份和77份。两组间年龄差异无统计学意义（t=0．610,P=0．543）,HCV自发清除组中女性感染者的比例明显高于男性（x2=17．668,P=2．63×10^-5）。检测的1293个SNPs中,rs2246626（x2=10．777,P=0．001）、rs12386522（x2=7．725,P=0．005）、rs2534679（x2=7．522,P=0．006）和rs1264457（x2=6．821,P=0．009）与HCV的自发清除显著相关。结论MHC区域共发现4个与HCV自发清除存在显著性关联的SNPs,女性发生HCV自发清除比例高于男性。该结果将为进一步研究机体自发清除HCV和MHC基因的关联奠定基础。     

广州市高校无偿献血现状和招募要点：2012-2014年广州市高校献全血数据分析

目的：探讨广州市大专院校无偿献全血的现状和招募要点。方法根据2012年1月一2014年12月广州市大专院校献全血的数据共42894例,分析大专院校献血人次和献血量的变化,重点分析非200 mL献血率的变化,探讨献血量与年龄、性别、献血次数和院校性质的关系。结果2014年大专院校无偿献血人次(42894）比2013年(43250）略有下降(0.82%）,但献血量有了大幅上升(11.57%）。非200 mL献血率从2012年的28.59%上升到了2014年的49.58%。2014年数据显示,男性(OR：2.02,P<0.01）和献血次数(0.68,趋势检验P<0.01）与献血量呈正相关,年龄(0.68,趋势检验P<0.01）和高职院校(趋势检验P<0.01）与献血量呈负相关。结论采供血机构必需有针对性地加强对高校学生的无偿献血宣传工作,大力推动无偿献血事业的可持续发展。     

人血小板裂解液对骨髓间质干细胞成骨成脂分化的影响

目的探讨人血小板裂解液(HPL)体外培养人骨髓间质干细胞(MSCs)及其对MSCs成骨和成脂分化能力的影响。方法采用贴壁法分离培养3株人骨髓来源MSCs,每株细胞在培养时平行分为2个实验组,分别用含10%胎牛血清的低糖培养基和含7.5%HPL的低糖培养基培养,均培养MSCs至第5代,分别用成骨及成脂诱导液对每组MSCs做成骨、成脂分化诱导,诱导成功后分别用茜素红、油红O对成骨和成脂分化结果染色鉴定,并进一步对成骨、成脂诱导结果做定量分析:成骨分化染色后洗脱茜素红在562nm波长下测定OD值并对每个培养孔细胞做蛋白定量,以茜素红OD值与蛋白定量值的比值作为成骨分化的定量值;成脂分化染色后用异丙醇洗脱油红O,在510nm波长下测定OD值,以之作为成脂分化的定量值。对所得的结果做统计学分析。结果对第5代的MSCs做成骨诱导12d后,光镜下可见致密结节形成,茜素红染色及定量鉴定结果显示2种培养液培养的MSCs均能成功向成骨细胞分化,而7.5%HPL培养的MSCs成骨能力比10%FBS培养的MSCs强,定量鉴定结果分别为16.548±4.397、4.151±5.631(P<0.05)。成脂诱导12d后,细胞内有明显脂滴形成,油红O染色及定量分析结果显示MSCs成功向脂肪细胞分化,但7.5%HPL培养的MSCs成脂能力与10%FBS培养的MSCs相比较弱,定量鉴定结果分别为0.239±0.030、0.497±0.105(P<0.05)。结论 HPL可以促进MSCs成骨分化,抑制其成脂分化。     

广州市献血者抗肠道病毒EV71中和抗体滴度流行病学调查

目的对广州地区100名健康献血者抗肠道病毒EV71中和抗体滴度分布进行调查。方法从广州血液中心收集健康成人血浆100份,按年龄≤24岁、24—27岁、28—34岁和≥35岁分成4组,用中和试验测定血浆中EV71中和抗体,并对检测结果进行统计学分析。结果100名健康献血者中EV71血浆阳性率为65%,血浆阳性率与年龄相关,≥35岁年龄组的阳性血浆率为37.5%,中和抗体几何平均滴度为3.225,明显低于其他各年龄组。结论19—34岁人群的血浆更适合EV71感染的补充治疗。     

献血人群HCV感染者自然转归与HLA－Ⅱ类等位基因的关系

目的：了解广州献血人群中丙型肝炎病毒（ HCV）感染者自然转归与HLA多态性的相关性,为HCV治疗策略的制定、预后的评估及疫苗的研制提供科学依据。方法选取广州献血人群中373例HCV感染者,分为两组：自发清除组（133例）和慢性感染者（240例）,利用HLA－SBT方法对373份感染者进行HLA－Ⅱ类等位基因分型,用χ2检验分析每个HLA等位基因频率在自发清除组和慢性感染组的分布是否存在差异,并应用多因素Logistic回归对可能影响HCV自然转归的多种因素进行分析。结果自发清除组与慢性感染组相比年龄较小[（28．2±9．9）岁vs（31．3±9．0）岁,t＝－2．998,P＝0．003],HCV自发清除组女性比例较高（34．6％ vs 17．9％,χ2＝13．090,P＜0．01）。 DQB1*05：02（P＝0．002,OR＝0．411,95％CI＝0．232～0．727）和DRB1*14：54（P＝0．027, OR＝0．350,95％CI＝0．132～0．926）在慢性感染组中更为多见,DRB1*11：01在自发清除组较为常见（ P＝0．007, OR＝2．169,95％CI＝1．223～3．848）。多因素logistic回归分析发现,年龄（ P＜0．01,OR＝1．035,95％CI＝1．018～1．053）、性别（P＜0．01,OR＝0．423,95％CI＝0．297～0．603）和DQB1*05：02（P＝0．016,OR＝0．480,95％CI＝0．264～0．873）、DRB1*11：01（P＝0．016,OR＝2．072,95％CI＝1．142～3．758）等位基因是HCV感染自然转归的独立相关因素。结论女性、较年轻的HCV感染者比较容易发生自发清除,携带DQB1*05：02等位基因的人群在感染HCV后更易发生慢性化,携带DRB1*11：01基因则容易发生自发清除。     

静脉化疗风险的管理

分析静脉化疗风险隐患,提出静脉化疗风险管理的对策,从对医护人员及病人、化疗药物的配制及环境配备、用药监控等方面进行管理,通过风险管理,提高了全科护士护理服务的风险意识,化疗防护知识掌握率达100.0%, 病人满意度达99.3%, 未发生护理投诉与纠纷.认为静脉化疗风险管理对策有助于医患双方心身健康,减少及避免化疗静脉渗漏,避免护理纠纷和投诉.     

广州地区无偿献血者戊型肝炎病毒感染流行病学调查

目的 调查广州地区无偿献血者的戊型肝炎病毒(hepatitis E virus, HEV)感染情况。方法 2017年4月-2018年4月间收集了5 552名广州血液中心无偿献血者的血液样本,采用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测抗-HEV IgG抗体(HEV IgG)、抗-HEV IgM抗体(HEV IgM)和HEV抗原(HEV Ag),采用χ²检验分析年龄、性别、民族、职业和ALT等因素分别与HEV IgG和IgM抗体阳性的相关性,采用多因素Logistic回归分析判辨HEV感染的独立风险因素。结果 HEV IgG、IgM和HEV Ag的阳性率分别为20.05%(1 113/5 552)、0.76%(42/5 552)和0.04%(2/5 552)。年龄和民族是HEV IgG和HEV IgM阳性率的独立风险因素:HEV阳性率随着年龄增长而增大(IgG OR=1.089, 95%CI: 1.080-1.098, P<0.001; IgM OR=1.055,95%CI: 1.028-1.084, P<0.001);壮族的HEV IgG和IgM阳性率(32.69%, 7.69%)高于汉族(19.89%, 0.70%),差异有统计学意义(IgG OR=2.052, 95%CI: 1.103-3.819, P=0.023; IgM OR=12.029, 95%CI: 4.067-35.580, P<0.001)。此外,我们还发现职业是HEV IgG阳性率的独立风险因素,学生是阳性率最低的人群。结论 广州地区无偿献血者中HEV抗体阳性率较高,且在不同人群中感染情况不同,为输血传播HEV的风险评估提供基础数据。