以端粒酶活性为作用靶点筛选抗肿瘤药的一种快速简易方法

利用ＰＣＲ扩增端粒重复序列,通过电泳和银染色测定扩增产物,以电泳胶中６ｂｐ梯状条带确定端粒酶活性。温度３０℃,反应时间为６０ｍｉｎ时可以使酶提液与未知化合物作用后还保持着酶的活性。从电泳的上样量及不同浓度细胞酶提液的结果表明,最低上样量１０μｌ和细胞酶提液０５μｇ时,能得到清晰６ｂｐ的梯状条带。ＲＮａｓｅ０．０５μｇ对端粒酶活性显示抑制作用,而对ＴａｑＤＮＡ酶没有影响。     

土槿皮乙酸抗肿瘤作用及其分子机制的研究进展

 目的 概要介绍土槿皮乙酸的抗肿瘤作用和可能的分子机制。方法 查阅文献,总结土槿皮乙酸体内外抗肿瘤活性的研究成果,依据作用靶点不同对其分子机制进行综述。结果 土槿皮乙酸抗肿瘤作用机制因肿瘤的种类而有所不同,它可通过抑制在某些肿瘤发生过程中异常表达的环氧化酶-2(COX-2),调节相关上下游基因和蛋白的表达,抑制肿瘤新生血管生成、阻止肿瘤细胞增殖并促进其凋亡。 结论 国内外近年来对该药抗肿瘤作用的机制研究获得了多方面的新成果,有助于我们找到新的治疗肿瘤的靶点。     

应用绿色荧光蛋白及活体成像技术建立的小鼠肝癌转移模型

背景与目的肝癌动物模型是人类肝癌基础与临床研究的重要工具,自20世纪初获得小鼠自发性肝癌动物模型以来,先后出现了自发性肝癌模型、诱发性动物肝癌模     

环磷酰胺衍生物SLXM-2对小鼠脑瘤B_(22)的抗肿瘤作用及机制

目的:研究环磷酰胺衍生物SLXM-2对小鼠脑瘤B22的抗肿瘤作用及对小鼠免疫系统的影响,并探讨其抑瘤作用的分子机制。方法:采用小鼠脑瘤B22移植性肿瘤模型评价SLXM-2的抑瘤作用,测定免疫器官的脏器指数和白细胞数量;通过Western Blot检测SLXM-2对细胞周期相关蛋白表达的影响。结果:20,40 mg.kg-1 SLXM-2对小鼠脑瘤B22的抑瘤率分别为11.5%和53.9%;与阴性对照组相比,SLXM-2对小鼠免疫器官的脏器指数及白细胞数量无明显影响,可上调p53,p21,CDK7,Wee1,p-Cdc2(Tyr15),p-Cdc2(Thr 161)和CyclinB1等蛋白表达,下调CyclinE的表达,Cdc2,CDK2和Cdc25C表达水平变化不明显。结论:SLXM-2对小鼠脑瘤B22的生长有一定抑制作用,对小鼠免疫器官指数和白细胞数量没有影响;SLXM-2的抗肿瘤机制与调节p53,p21,Wee1,p-Cdc2(Tyr15)和CyclinE等蛋白表达有关。     

新的蛋白酶体抑制剂YSY-01A对HT-29细胞的周期阻滞作用(英文)

化合物YSY-01A是一种新合成的蛋白酶体抑制剂,前期研究已经证实其具有良好的抑制肿瘤增殖作用。但是其作用机制尤其是对细胞周期的阻滞作用仍不清楚。本实验旨在评价YSY-01A的抗肿瘤作用与细胞周期阻滞的关系,并探讨可能的分子机制。实验结果证实,YSY-01A能够显著抑制大肠腺癌细胞HT-29的增殖(P<0.05),且具有浓度和时间依赖性。进一步实验表明,YSY-01A能够把HT-29细胞阻滞在G2/M转换点上,显著地上调cyclinB1,Wee1,p-cdc2(Tyr15)及p53,p21,p27蛋白的表达(P<0.05)。当YSY-01A浓度高于0.5μM时,HT-29会显示出典型的细胞毒症状,差异具有显著性(P<0.05);而本文用于机制研究的药物浓度均低于此值。总之,YSY-01A对HT-29细胞具有显著的增殖抑制作用,其分子机制与G2/M转换点阻滞有关。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性及基因型研究

目的 了解宁夏地区2所医院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性及ESBLs基因型分布.方法 采用微量肉汤法测定分离自宁夏地区两家医院的45株产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对10种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC),通过聚合酶链反应(PCR)法及克降测序分析其所产生ESBLs的基因型.结果 45株菌株对美罗培南全部敏感,对头孢嚷肟、奈替米星、氨苄西林、头孢噻吩、头孢曲松、复方磺胺甲噁唑、卡那霉素的耐药率均在64%以上.45株ESBLs菌株有41株产CTX-M型,其中CTX-M-14最多见,其次为CTX-M-28.结论 宁夏地区产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌均存在严重的耐药性,ESBLs基因型以CTX-M-14型为主.     

RP-HPLC法测定TM208的含量及有关物质

目的:建立TM208含量及有关物质的RP-HPLC方法。方法:采用Phenomenex Luna C18(2)(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为水-甲醇(25∶75),流速1.0 mL.min-1,检测波长254 nm,柱温25℃,进样量20μL。结果:TM208与其他物质分离良好,线性范围为1.0~200μg.mL-1(r=0.9997),日内、日间精密度RSD均在5%以下,平均回收率为100.2%,检测限为50 ng.mL-1。结论:该方法快速、准确、灵敏。     

Cytotoxicity of Benzo(a)pyrene-7,8-dihydrodiol on Genetically Enginered V79 Chinese Hamster Cells Expresing Rat Liver Cytochrome P450 1A1

本文采用细胞计数和中性红摄取法观察了ＢＰ７，８ｄｉｏｌ对ＸＥＭ２（稳定表达了大鼠肝细胞色素４５０１Ａ１）和Ｖ７９（未表达Ｐ４５０１Ａ１）细胞生长的作用，目的为建立体外细胞毒模型。结果表明，在１．０、２．５、５．０μｍｏｌ·Ｌ１不同浓度下，ＢＰ７，８ｄｉｏｌ对ＸＥＭ２细胞产生很强的毒性，其毒性具有浓度和时间依赖性，在相同的浓度下ＢＰ７，８ｄｉｏｌ对Ｖ７９细胞并没有影响，同时也发现，细胞色素Ｐ４５０酶抑制剂αＮＦ对ＢＰ７，８ｄｉｏｌ引起的细胞毒具有保护作用。这些结果说明，ＢＰ７，８ｄｉｏｌ对ＸＥＭ２细胞毒性是通过细胞色素Ｐ４５０１Ａ１的作用引起的。     

HPLC-ESI/ITMSn法分析大鼠体内4-甲基哌嗪-1-二硫代甲酸-(3-氰基-3，3-二苯基)丙酯盐酸盐及其主要代谢物

目的研究新化合物4-甲基哌嗪-1-二硫代甲酸-(3-氰基-3，3-二苯基)丙酯盐酸盐(TM208)在大鼠体内的主要代谢产物。方法大鼠ig TM208 500 mg·kg^-1后，收集粪样、尿样和血样，用液相色谱-电喷雾离子阱质谱法测定。根据TM208及其代谢产物的色谱保留时间和电喷雾离子阱质谱(ESI-ITMSⁿ )电离规律及生物体内药物代谢转化规律，推导代谢物的结构。结果在粪样中发现8种I相代谢产物，在尿样和血样中发现5种I相代谢产物，未发现II相代谢产物。结论本法操作简便、快速、灵敏度高、专属性强，是一种研究TM208体内代谢产物的有效方法。     

合欢皮皂甙对S180实体瘤荷瘤小鼠抑瘤作用的研究

探讨合欢皮皂甙 抑制作用。方法以Ｓ１８０褓一瘤荷瘤鼠为对象，用不同剂量的合欢皮皂和合欢皂甙与环磷酰胺对荷瘤鼠行腹腔注射。结果３组不同剂量的合欢皮扛甙及合欢皮皂甙加环磷胺组的抑瘤率分别为２５．４％，３５．１％，４０．５％，７７．４％，呈明显显效关系。结论：合欢皮皂甙有一定抑制瘤作用，与环磷酰胺合用效果更佳。