以聚乙烯亚胺-β-环糊精为骨架偶联短肽CY11的转基因载体

目的:以聚乙烯亚胺-β-环糊精(PEI-β-CyD)作为载体骨架,用靶向于肿瘤表面成纤维细胞生长因子受体(FGFR)的短肽CY11(CGMQLPLATWY)偶联于载体材料上,研究该载体材料的基因转染效率.方法:用琥珀酰亚胺-3-(2-嘧啶二硫)丙酸酯[N-succinimidy-3-(2-pyridyldithio) propionate,SPDP]将CY11偶联到PEI-β-CyD上,合成CY11-PEI-β-CyD.核磁共振氢谱(1H-NMR)、热重分析(TGA)对载体材料进行化学表征,凝胶电泳阻滞实验研究载体材料对质粒DNA的浓缩能力,MTT法测定载体材料的细胞毒性,在COS-7、Hela和B16细胞株上进行体外转染实验.结果:成功合成材料CY11-PEI-β-CyD,在N/P为4时能够有效地浓缩质粒DNA.在B16细胞上,材料CY11-PEI-β-CyD达到160 μg/ml时,细胞存活率仍高于80%.在CY11-PEI-β-CyD/DNA复合物在N/P为20∶1时,转染效率是对照组PEI-β-CyD的17倍.结论:CY11-PEI-β-CyD是具有低毒性、高转染且有FGFR靶向性的新型非病毒转基因载体.     

闭合性胃损伤50例临床分析

回顾性分析50例闭合性腹部创伤中胃损伤患者的临床资料,其中胃穿孔20例,胃撕裂伤30例,胃穿孔患者受伤时均为饱食胃状态,胃撕裂伤患者正相反;49例存在合并伤,肝胰损伤是胃撕裂伤患者的常见合并症(15/30与10/30),而脾损伤是胃穿孔患者的常见合并症(11/20).均行手术治疗,手术方式为胃修补术.治愈48例,病死2例,病死率4%.外科手术是主要治疗方式,以修补术为主,手术中应注意处理合并伤及合并症.     

细胞周期蛋白A正反义基因对人舌癌细胞增殖的影响

目的 探讨细胞周期蛋白A（cyclinA）正、反义基因对人舌鳞状细胞癌（Tca8113）细胞系增殖的影响及调控,为肿瘤基因治疗提供新思路。方法 通过脂质体介导的基因转染方法,将正、反义cycliA基因分别导入Tca8113细胞系,观察转染和未转染细胞的生长情况、体内外增殖变化以及cyclinA和Ki-67蛋白的表达情况。结果 转染反义cyclinA基因的细胞系,其细胞生长速度、DNA合成、细胞增殖及代谢能力均下降;而转染了正义cyclinA基因的细胞系则有相反结果。结论 反义cyclinA以有效抑制靶基因的表达,使舌癌细胞恶性表型部分逆转。     

不同食性动物颞下颌关节组织结构的比较研究

目的　观察比较大白鼠、山羊、家猫和猴颞下颌关节 (tem porom andibular joint,TMJ)的组织结构 ,探讨咬合与 TMJ的解剖和功能的关系。方法　用大白鼠、山羊、家猫和猴各 5只 ,取双侧 TMJ,HE及弹力纤维染色。结果　因动物不同 ,弹力纤维、胶原纤维以及组织各层次的分布有所不同。结论　不同的咬合类型和咀嚼运动方式对 TMJ组织结构的影响不同。     

TGFα、EGFR反义寡聚核苷酸对大肠癌生长的抑制作用

研究转化生长因子α（ＴＧＦα）、表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）反义寡聚核苷酸（ＡＳＯＤＮ）对人大肠癌生长增殖的作用。反义ＴＧＦα、反义ＥＧＦＲ及无关对照ＯＤＮ经阳离子脂质体包裹后转染人大肠癌ＨＲ８３４８细胞。采用噻唑蓝比色法（ＭＴＴ法）,细胞周期分析,裸鼠体内接种等方法测定瘤细胞体内外增殖的变化。与对照组ＨＲ８３４８细胞相比,经ＴＧＦα反义ＯＤＮ处理的ＨＲ８３４８细胞体外增殖速度减慢（抑制率达８０％）、ＤＮＡ合成受抑、裸鼠体内成瘤率下降（２５％：１００％）。经ＥＧＦＲ反义ＯＤＮ处理的ＨＲ８３４８细胞也得到了类似的结果。ＴＧＦα反义ＯＤＮ、ＥＧＦＲ反义ＯＤＮ均能有效抑制大肠癌细胞的体内外生长增殖。     

恒古骨伤愈合剂联合关节腔内注射玻璃酸钠治疗膝骨关节炎的真实世界临床观察

目的 探讨恒古骨伤愈合剂对于发作、缓解期膝骨关节炎患者疗效的改善情况并对其潜在干预机制进行系统挖掘，为提高恒古骨伤愈合剂的临床应用价值、指导其临床合理用药提供一定参考。方法 通过恒古骨伤愈合剂治疗膝骨关节炎的真实世界研究，获得数据资料并录入“恒古骨伤愈合剂治疗膝骨关节炎病例注册登记系统”，在系统中选取2020年5月1日至2021年12月31日来自北京中医药大学第三附属医院、北京协和医院、中国中医科学院望京医院和湖南航天医院等20家医疗机构骨伤科门诊或住院的105例发作、缓解期膝骨关节炎患者，包括60例联用恒古骨伤愈合剂和关节注射治疗的患者，及45例单用关节注射治疗的患者。观察和对比2组患者的西安大略麦克马斯特大学骨关节炎指数（WOMAC）评分、视觉模拟（VAS）疼痛评分、中医单项疼痛症状种类（冷痛、热痛、刺痛、隐痛、酸痛）和其他中医症状，并进行统计学分析。为进一步阐释恒古骨伤愈合剂联用关节注射治疗发作、缓解期膝骨关节炎的潜在分子机制，本研究利用“骨伤交叉数据库（BX-Data，http：//bone-xtrans.com/database）”，收集膝骨关节炎疾病基因集、恒古骨伤愈合剂组方中药材、化学成分、物质基础、候选靶标、玻璃酸钠候选靶标数据进行筛选，构建“疾病靶标”的互作网络。结果 入组的105例膝骨关节炎患者中，发作期患者占15.24%（16/105），缓解期患者占84.76%（89/105），无康复期患者。女性72例（68.57%），多于男性33例（31.43%），105例患者中观察组60例，对照组45例；观察组VAS评分5分患者20例、6分患者19例，共占观察组65.00%；对治疗前后组间VAS评分的比较结果表明，治疗后4周两组评分分别为（4.42±1.01）分、（5.00±1.02）分，治疗后8周分别为（3.12±1.04）分、（3.56±1.08）分，均低于治疗前（6.23±1.28）分、（6.02±1.22）分（P<0.05）；对两组疼痛性质的比较结果表明，观察组热痛和刺痛前后改善率分别为3.3%（2/60）、16.7%（10/60），对照组分别为2.2%（1/45）、15.6%（7/45）（χ²=4.034、13.583，P<0.05），观察组冷痛改善率为5.0%（3/60）、酸痛改善率为3.3%（2/60），高于对照组；对两组治疗前后的WOMAC评分比较结果表明，观察组的僵硬评分治疗前后差值（1.68±1.42）分，对照组治疗前后得分差值（1.20±1.60）分（P<0.05），且观察组疼痛评分治疗前后差值（3.43±2.88）分、日常活动评分前后差值（12.37±10.21）分和总分治疗前后差值（17.48±12.76）分也均高于对照组［（2.82±3.29）、（10.80±9.63）、（14.82±12.62）分］；对于两组治疗前后其他症状改善情况比较结果表明，观察组少寐多梦的改善率为28.3%（17/60），显著高于对照组的2.2%（1/45）（χ²=5.914，P<0.05），观察组渴不欲饮、烦闷不安、口燥咽干、面色晦暗、手足口热5种症状改善率分别为3.3%（2/60）、10.0%（6/60）、8.3%（5/60）、10.0%（6/60）、5.0%（3/60），均高于对照组的-2.2%（1/45）、2.2%（1/45）、2.2%（1/45）、4.5%（2/45）、-6.7%（3/45）。通过网络分析发现，恒古骨伤愈合剂的富集通路主要作用于骨质改善、能量代谢和抗炎镇痛3种作用机制，玻璃酸钠富集通路主要作用于抗炎镇痛机制。结论 恒古骨伤愈合剂联合关节腔内注射玻璃酸钠治疗发作、缓解期膝骨关节炎患者的疗效优于单独使用玻璃酸钠治疗，尤其在抗炎镇痛方面，两药具有协同药效。恒古骨伤愈合剂可能通过改善骨质和调节机体能量代谢途径，发挥其缓解关节僵硬、刺痛、热痛、少寐多梦症状的作用，值得临床推广。     

恒古骨伤愈合剂联合非甾体抗炎药治疗膝骨关节炎的临床观察

目的 基于真实世界数据探讨恒古骨伤愈合剂联合非甾体抗炎药治疗膝骨关节炎的临床疗效，为临床用药提供依据。方法 从2020年5月至2021年12月采用注册登记研方法收集了1 002例未行膝关节置换术的膝骨关节炎患者，最终纳入952例，其中口服恒古骨伤愈合剂联合口服非甾体抗炎药的病例共133例并设为观察组，单独口服非甾体抗炎药病例共73例设为对照组，将两组患者的基线资料、视觉模拟评分（VAS评分）、西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎指数评分（WOMAC评分）等项目进行统计学分析。访视点为登记注册时、登记注册后第4周、8周。为了进一步阐释恒古骨伤愈合剂联合非甾体抗炎药治疗膝骨关节炎的临床疗效，并通过网络药理学方法，检索骨伤交叉数据库、TCMSP等数据库，获取恒古骨伤愈合剂的有效成分、非甾体抗炎药与膝骨关节炎的相关基因集，将相关基因集进行Venn分析，构建蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络图，再筛选出关键核心靶点，进行基因本体（GO）及京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析。结果 观察组第4周VAS评分平均下降（-2.79±1.206）分，优于对照组［（-2.73±1.575）分，P<0.05］，观察组第8周VAS评分平均下降（-3.97±1.308）分，优于对照组［（-3.89±1.822）分，P<0.05］，观察组第8周WOMAC总评分平均下降（-52.07±21.677）分，显著优于对照组［（-46.75±25.368）分，P<0.05］，观察组第8周WOMAC（疼痛）评分平均下降（-10.99±4.229）分，优于对照组［（-10.03±5.535）分，P<0.05］，观察组第4周WOMAC（僵硬）评分平均下降（-1.49±2.901）分，优于对照组［（-0.92±1.998）分，P<0.05］，观察组第8周WOMAC（僵硬）评分平均下降（-1.90±3.200）分，优于对照组［（-1.26±2.230）分，P<0.05］，观察组第8周WOMAC（关节功能）评分平均下降（-39.17±16.562）分，明显优于对照组［（-35.47±20.098）分，P<0.05］。网络药理学分析结果，恒古骨伤愈合剂治疗膝骨关节炎的核心网络靶点是经过信号传导转录激活因子3（STAT3）、血管内皮生长因子A（VEGFA）、肿瘤坏死因子（TNF）等信号通路的调节进而调控细胞信号传导、血管生成、软骨细胞的增殖与迁移、炎性细胞从而来抑制炎性反应，减少损害，延缓疾病的进一步发展。结论 恒古骨伤愈合剂联合非甾体抗炎药治疗膝骨关节炎后4周、8周的疗程后，其缓解疼痛、关节僵硬、改善关节功能的疗效均优于单独使用非甾体抗炎药，在网络药理学中恒古骨伤愈合剂治疗膝骨关节类通过参与调节炎性因子、代谢反应相关生物过程、调控软骨细胞的增值与凋亡等，从而产生抗炎阵痛、改善关节活动度、关节僵硬的效果，值得临床推广与应用。     

细胞周期蛋白A在舌癌中的表达及意义

[目的]研究不同级别的舌鳞状细胞癌中细胞周期蛋白A（cyclinA）基因和蛋白的表达及其意义。［方法］应用微波内免疫组化ABC法检测cyclinA蛋白及原位杂交技术检测cyclinAmRNA的表达情况。［结果〕免疫组化cyclinA多克隆抗体标记60.0％（18／30）显示cyclinA蛋白过度表达；cyclinA探针随机引物标记，经原位杂交后显示，cyclinAmRNA的阳性表达率为70.0％（21／30）。（结论］cyclinA在舌癌中有高水平的表达，且临床分期越晚，恶性程度越高，其表达率也较高，提示cyclinA的过度表达与舌癌的特性密切相关，cyclinA阳性检出率有助于判断舌癌恶性程度及预测肿瘤的转移，在舌癌的发生、发展中起着重要作用。     

真实世界恒古骨伤愈合剂治疗膝骨关节炎临床疗效和作用机制分析

目的 探究真实世界恒古骨伤愈合剂治疗膝骨关节炎（KOA）的临床疗效和作用机制，为恒古骨伤愈合剂的临床合理用药提供依据。方法 基于“恒古骨伤愈合剂治疗膝骨关节炎病例注册登记系统”资料，采用SPSS 26.0对638例应用过恒古骨伤愈合剂的KOA病例数据进行分析。临床数据来源于全国20家医院共同收集，时间为2020年5月至2021年12月。对患者的年龄、性别、体质量指数、疗程等指标进行描述性分析。采用Mann-WhitneyU检验比较治疗前后视觉模拟评分（VAS）评分和西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎指数（WOMAC）评分的变化。并采用整合药理学研究平台（TCMIP） v2.0对恒古骨伤愈合剂治疗KOA的核心靶标进行关联网络分析。收集2022年10月至12月北京中医药大学第三附属医院就诊的KOA患者作为治疗组，共计20例，接受恒古骨伤愈合剂治疗，另招募健康志愿者20例作为对照组，采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定两组患者血清相应的指标以验证网络分析结果。结果 使用恒古骨伤愈合剂治疗KOA患者共638例，其中单用组429例（67.24%），多于联用组209例（32.76%）。女性415例（65.05%），多于男性223例（34.95%），平均年龄（63.48±13.51）岁，平均体质量指数（BMI）为（24.09±2.98）kg·m^-2，平均疗程（15.78±9.66） d；Kellgren-Lawrence（K-L）分级以Ⅱ级（46.24%）、Ⅲ级（34.64%）为主，临床分期分布以缓解期为主（82.45%）为主，临床分期与K-L分级不显著相关。通过聚类分析可以将证型归纳为气滞血瘀证、寒湿痹阻证、肝肾亏虚证。总体临床疗效评价显示，VAS评分治疗前（6.01±0.85）分，治疗后（2.54±1.73）分，VAS评分明显降低（P<0.05）；WOMAC评分治疗前（93.25±25.91）分，治疗后（50.73±25.14）分，WOMAC明显降低（P<0.05）。网络分析发现，恒古骨伤愈合剂可能通过调节转化生长因子-β（TGF-β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和核转录因子-κB（NF-κB）信号通路发挥作用。实验验证结果显示，治疗后治疗组患者TGF-β₁水平显著升高（P<0.01），核转录因子-κB p65（RELA）和肿瘤坏死因子（TNF）受体超家族成员1A（TNFRSF1A）水平均明显降低（P<0.05），这些相互协同的作用共同为KOA治疗提供了一种多维度和全面的疗效，从而有效地减轻患者关节疼痛及活动受限等症状。结论 恒古骨伤愈合剂治疗KOA疗效显著，可能通过多途径参与关节软骨代谢调节和炎症过程，为阐明其治疗KOA的多靶点作用机制提供了实验依据和理论支持。