针刺对人体稳定性玫瑰花及其酸性非特异性酯酶的影响

一般认为稳定性玫瑰花形成细胞(Es—RFC)代表活化的T淋巴细胞。本文从E—玫瑰花(细胞免疫)和醋酶染色(细胞化学)两方面来观察,针刺对Es—RFC的效应见到24例患者外周血稳定性玫瑰花百分数.针前21例在5%以下(一般水平),针后有显著提高(P<0.005),并见有一定的调整作用,而且针刺效应多可持续24小时。同时也观察到Es—RFC的酸性非特异性醋酶(ANAE)分型变化,针刺前后均以点型为主约占47—52%,其次为弥散型约占36—33%,其它型(以阴性为主)约占17—15%。针后点型提高及弥散型和其它型降低均不显著(P>0.05)。     

应用Western印迹杂交技术对大鼠组织cAMP受体蛋白的研究

应用Western印迹杂交技术显示了大鼠组织中cAMP受体蛋白(CRP)即依赖cAMP的蛋白激酶,结果见到垂体和肾上腺富含CRP带,不同组织中CRP带的数目依次为:垂体>肾上腺>肝>肺>胃组织,这个顺序与免疫组织化学技术所显示的组织内CRP免疫反应性强度基本一致。在免疫组化染色中CRP免疫反应性位于垂体、肾上腺、肝、肺     

宫颈癌刮片细胞CEA免疫细胞化学研究

本文应用SPA-HRP(辣根过氧化物酶标记的金黄色葡萄球菌蛋白A)免疫组织化学技术对14例宫颈癌和6例非宫颈癌的刮片细胞进行了CEA免疫反应性(IR)观察。结果见97％的癌细胞呈CEA-IR,且反应较强;大多数非典型增生细胞亦呈CEA-IR,并见有少数正常宫颈上皮细胞星弱CEA—IR。以上三者的CEA-IR有显著性差异。文中讨论了宫颈刮片细胞CEA免疫细胞化学检测对宫颈癌早期诊断的辅助价值及其对特异CEA抗体导向的局部抗宫颈癌治疗的意义。     

食管癌及人胚食管上皮的CEA免疫组化研究

采用PAP SPA-HRP,间接酶标三种免疫组化方法,用国内外四种不同来源的CEA抗血清及CEA单克隆抗体对62例食管癌(50例食管鳞癌,12例食管腺癌)的手术标本,100例食管拉网涂片,57例8—40周龄的胎儿食管组织切片进行CEA定性,定位及半定量的观察,结果表明食管鳞癌CEA阳性率为96％。食管腺癌为75％,食管拉网涂片为42％,高于涂片的病理形态学诊断(29％),二者的符合率为86％,8～40周龄的胎儿食管上皮细胞均呈CEA阳性,以16—17周龄时CEA阳性反应最强     

电针及生物活性物质体外孵育对大鼠淋巴细胞中介免疫的影响

用酸性非特异性酯酶组化染色法(ANAE)观察了电针刺激(Ea)及经外源性5-羟色胺(5-HT)、P物质(SP)、β-内啡肽(βEP)和甲硫脑啡肽(MEK)孵育后的电针组、纳洛酮阻断电针组及对照组的淋巴细胞分型的改变,以及大鼠淋巴细胞与人食管癌上皮细胞(Eca-109)共育前后ANAE分型的变化。结果表明:①电针可使大鼠淋巴细胞ANAE点样型(ANAE—F~+)增多(P<0.05),对ANAE弥散型(ANAE—D~+)影响不显著(P>0.05)。几种活性物质对ANAE—F~+和ANAE—D~+的影响与电针效应一致,纳洛酮可阻断此作用。②电针、纳洛酮阻断电针及对照组三组淋巴细胞(无论经活性物质孵育与否)与Eca—109细胞共育后,ANAE—F~+减少(P<0.0005),ANAE—D~+增多(P<0.0005),部分ANAE—D~+细胞有形态学改变。由比提示,电针及活性物质孵育对淋巴细胞ANAE分型的影响可能是通过内源性阿片样肽(OLP)受体起作用,肿瘤细胞与淋巴细胞共育可显著影响淋巴细胞的功能活性。     

DIFA检测非放射性斑点印迹技术的探讨

为提高分子生物学的实验效率和节省昂贵的试剂，将核酸分子或蛋白质分子预先结合于硝酸纤维素膜（ＮＣＭ）上，应用自制的ＤＩＦＡ装置检测非放射性斑点印迹。结果表明：此技术可快速检测生物活性试剂的效价及工作浓度；选择研究样本及试验条件；鉴定探针灵敏度等。     

电针诱导对机体白细胞总数及分类计数的影响

关于对人体或动物进行针刺或电针后,白细胞总数有一时增加,2—3小时达高峰,或有一时减少,已见报导。并且白细胞总数的变化也随针刺穴位、针刺强度和个体机能状态不同而异。关于电针诱导后白细胞分类计数中淋巴细胞及嗜酸性粒细胞减少,中性粒细胞增加的报导较多,但也有不同报导。此外,在电针诱导对自血液分离的淋巴细胞     

8-Br-cAMP和槲皮素联合应用对Eca-109细胞增变基因表型的影响

目的:探讨8-Br-cAMP和槲皮素联合应用对Eca-109细胞增变基因表型变动的影响。方法:将Eca-109细胞分为4组:①8-Br-cAMP组(Br组);②槲皮素组(Q组);③(Br+Q)组;④不加药物的对照组(C)。同时培养48 h,对以上4组细胞制备细胞滴片及硝酸纤维素膜(NCM)滴膜2种标本,分别进行Bcl-2、Bax、XRCC1、MRP和POLB的免疫组化和免疫斑点印迹实验,并以TUNEL法检测各组细胞凋亡率。结果:细胞凋亡率,C组为4%,(Br+Q)组为70%,Br组为42%,Q组为35%,(Br+Q)组>Br组或Q组>C组,(P<0.001)。Br、Q及(Br+Q)组与对照组相比,Bcl-2-IR及XRCC1-IR皆低于C组(P<0.001),而Bax-IR则高于C组(P<0.001);Br组:Q组或Br组:(Br+Q)组(P>0.05)。Bcl-2-IR与XRCC1-IR呈显著正相关,与Bax-IR和Bax-IR与XRCC1皆呈显著负相关。C组的MRP-IR、POLB-IR强于Br组、Q组或(Br+Q)组(P<0.01。)TLC扫描OD值:C组MRP-IR高于Br、Q或(Br+Q)组约3倍;POLB-IR高于Br、Q或(Br+Q)组约2倍;MRP与POLB呈显著正相关r=0.9838(P<0.01)。结论:Br与Q联合用药或单独用药皆可下调Bcl-2,XRCC1,MRP与POLB的表达,上调Bax的表达,提示Br与Q联合用药与单独用药皆可下调Eca-109细胞的增变基因表型。     

维生素C和烟酰胺对原代培养人角质形成细胞的影响

目的 探讨维生素C和烟酰胺对原代培养人表皮细胞的增殖和分化的影响，为临床应用提供实验基础。方法 取正常人手术切除的包皮，应用热溶素分离表皮与真皮，以胰蛋白酶及EDTA分离表皮细胞为单个细胞。以NIH-3T3作为饲养细胞，单个表皮细胞培养于表皮完全培养基内。将培养的人表皮细胞等分为三份；一份加维生素C，一份加烟酰胺，另一份为完全培养液对照组。应用免疫组化和蛋白质免疫斑点印迹阵列技术检测C-myc、细胞周期蛋白D1、丝聚合蛋白及内披蛋白的表达情况。结果 各组集落数不同，维生素C组 > 对照组 > 烟酰胺组，维生素C组的集落形态与对照组近似，而与烟酰胺组差异较大。与对照组相比，维生素C组C-myc、细胞周期蛋白D1、丝聚合蛋白及内披蛋白的表达均上调（P 值均 < 0.05）；烟酰胺组丝聚合蛋白表达显著上调（P < 0.01），内披蛋白表达变动不明显（P > 0.05），而C-myc表达下调（P < 0.05）。结论 维生素C对人角质形成细胞的增殖和分化均有促进作用。烟酰胺对人角质形成细胞的分化有促进作用，但对其增殖却有抑制作用。     

金银花对大鼠体内和体外RBL细胞的抗氧化保护作用及其机制

目的：从细胞和分子水平探讨金银花（HS）对机体内外的抗氧化作用及其机制,为金银花的临床应用提供理论依据。方法：体外培养的人肝RBL细胞与0.25 g?L-1的金银花共培养前或后加H2O2（氧化剂）,应用MTT和TUNEL实验检测细胞生存率和凋亡率,免疫组织化学/免疫印迹检测NF-κB、HSP-70、Bcl-2、Bax及 Caspase-3 表达水平,检测细胞内抗氧化酶体系的水平。建立金银花大、小剂量灌胃的大鼠动物模型,检测血浆抗氧化酶体系的总抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱苷肽过氧化物酶（GSH-Px）、谷胱苷肽（GSH）、丙二醛（MDA）的水平。结果：金银花对RBL细胞的抗氧化和抗凋亡作用中,前保护（先加金银花,后加H2O2）高于后保护（先加H2O2,后加金银花）的效应;下调NF-κB和HSP-70的表达和Bcl-2/Bax比值,且前保护组凋亡率低于后保护组;同时也上调细胞内抗氧化酶体系的水平。金银花灌胃1～2 h后,大鼠血浆中T-AOC、GSH-Px、GSH、SOD含量较灌胃前显著增高(P<0.05),而MDA含量明显减低(P<0.05)。结论:金银花可通过上调体
内抗氧化酶体系并下调NF-kB信号传导途径呈现抗氧化、抗凋亡的保护作用。