大鼠血管内皮祖细胞培养及鉴定

目的探索骨髓来源的血管内皮祖细胞的分离培养方法,为缺血性疾病治疗找到新的移植细胞来源。方法采集SD雄性大鼠骨髓细胞,用梯度密度离心法分离单核个细胞,种植于提前包埋了纤维连接蛋白的培养皿中培养,将血管内皮生长因子（VEGF）、重组纤维细胞生长因子（bFGF）和重组上皮生长因子（EGF）作为诱导剂,将72h后贴壁细胞（A组）和非贴壁细胞（B组）分别培养,观察细胞形态的变化以及数量变化,取A组在第14天,应用免疫组化和免疫荧光技术鉴定内皮祖细胞系列标志。结果A组细胞经过体外诱导后大量扩增,在28d时仍有强大扩增的活力,呈铺路石样,而B组细胞短期内可以大量增殖,呈长索样,之后逐渐变少;在细胞迁移实验中,A组细胞可以相互融合形成血管结构,而B组细胞之间则不能融合,随着时间推移,逐渐凋亡;A组经过CD34免疫荧光、CD133、FLK-1免疫组化鉴定呈阳性,并能特异性吸附FITC-UEA-和内吞DIL-Ac-LDL。结论自体骨髓细胞通过贴壁换液后可以分离培养出内皮祖细胞,取贴壁细胞经过体外诱导后大量扩增,并通过表面标记物鉴定可以确认为内皮祖细胞,而非贴壁细胞不能大量增殖,故将贴壁分离方法来筛选内皮祖细胞,此方法简易,并能满足细胞移植的需要,因而,在移植治疗脑缺血引起的内皮损伤应该有较好的临床应用前景。     

支架置入治疗颈内动脉狭窄病人的护理

对6例颈内动脉狭窄病人行支架置入治疗．结果均一次置入成功．术后病人症状明显改善．未发生不良反应。提出术前周密的准备．术中、术后严密监测血压、精神神经症状及肢体活动情况,发现异常及时处理是保证治疗成功的重要因素。     

GM1对实验性脑缺血再灌注损伤的作用

目的 研究单唾液酸四己糖神经节苷脂（ＧＭ１）对脑缺血再灌注损伤的作用。方法 采用大鼠全脑缺血再灌注动物模型（４ＶＯ）,测定观察假手术组（对照组）、脑缺血３０ｍｉｎ再灌注６０ｍｉｎ生理盐水处理组、ＧＭ１处理组脑海马组织线粒体钙（ＭＣａ）、钙调素（ＣａＭ）含量改变,以及缺血３０ｍｉｎ再灌注４ｄ脑海马ＣＡ１区普通病理和超微病理改变。结果 脑缺血３０ｍｉｎ现灌注６０ｍｉｎ海马组织ＭＣａ、ＣａＭ含量显著性升     

川芎嗪对肾间质纤维化模型大鼠Smad7和SnoN蛋白表达的影响

目的:探讨川芎嗪(tetramothylpyrazine,TMP)对单侧输尿管梗阻(unilatcral ureteral obstruction,UUO)所致大鼠肾间质纤维化的作用及机制.方法:雄性SD大鼠18只,随机分为3组:假手术组、模型组以及TMP组,每组6只.采用单侧输尿管结扎建立大鼠肾间质纤维化模型.川芎嗪(40mg·kg~(-1)·d~(-1))治疗3周后取梗阻侧肾组织,分别进行HE和Masson染色,观察肾组织病理改变和胶原沉积的变化;采用放射免疫分析法检测Ⅲ型前胶原含量;应用酶联免疫吸附(ELIsA)法检测肾组织中转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)水平;采用Western blotting检测肾组织中Smad7和Smad转录共抑制因子SnoN蛋白表达水平的变化.结果:与假手术组比较,镜下可见模型组大鼠肾小管萎缩,管腔扩张,肾间质中大量胶原纤维沉积,肾间质明显增宽;Ⅲ型前胶原、TGF-β1含量显著增加;Smad7,SnoN蛋白表达水平显著下调.TMP组与模型组比较,肾组织病理改变明显改善,Ⅲ型前胶原、TGF-β1含量明显降低,Smad7,SnoN蛋白表达水平明显上调.结论:川芎嗪具有显著抗肾间质纤维化的作用,其机制与降低肾组织中促纤维化细胞因子TGF-β1含量,同时恢复Smad逆向调控因子Smad7和SnoN蛋白表达水平有关.     

化瘀导滞汤防治庆大霉素所致大鼠肾损伤的实验研究

目的:探讨化瘀导滞汤防治庆大霉素所致肾毒性损伤的作用和部分机理。方法:18只健康雄性W ister大鼠随机分为3组,每组6只:正常组、模型组、治疗组。给予庆大霉素造成肾毒性损伤,于造模后5天取材,光镜和电镜下观察肾组织形态学改变,计算肾系数、检测血肌酐、血尿素氮、24h尿蛋白总量,氧化应激相关指标SOD、MDA、NOS的变化,检测NF-кB蛋白表达水平。结果:模型组大鼠与正常组比较:光镜下可见肾小管上皮细胞以变性为主,部分坏死;有较多的蛋白管型和少量的细胞管型、颗粒管型。电镜下可见肾小管上皮细胞胞浆中有大量脂滴存在,细胞的线粒体肿胀、内质网明显扩张,治疗组病变轻于模型组。模型组肾系数、血肌酐、血尿素氮、24h尿蛋白总量、NF-кB蛋白表达水平以及MDA、NOS明显高于正常组,SOD明显低于正常组(P<0.01),治疗组除24h尿蛋白总量外,其余指标与模型组相比有明显改善(P<0.01)。结论:化瘀导滞汤有良好的防治庆大霉素所致肾毒性损伤的作用,并提示与早期抗脂质过氧化损伤有关。     

当归多糖对照射小鼠巨噬细胞产生NO及IL-2含量的影响

当归多糖(AP)是从具有补血益气、调经止痛、滋阴壮阳、扶正固本等功效的中药当归中提取的一种有效成分。许多实验研究表明，当归多糖对正常机体具有免疫作用，但当归多糖对放射损伤小鼠一氧化氮(NO)及IL-2的影响报道较少。笔者就此进行了初步的研究，并对当归多糖的作用机理进行初步的探讨。     

高脂大鼠内皮祖细胞生物学特性的实验研究

目的研究高脂大鼠内皮祖细胞(EPC)的生物学特性,并探讨其在体外最佳5-(?)(Brdu)标记方案。方法制备高脂模型大鼠,体外分离培养EPC,观察健康对照组和高脂组大鼠EPG生长及增殖状况。将EPC传代培养后,检测不同浓度BrdU和不同孵育时间对其BrdU标记率的影响。结果与健康大鼠来源的EPC相比,高脂大鼠EPC形态较小,培养相同时间时CD34表达率较低,而CD45、CD133表达率较高;细胞吞噬及增殖分化能力较差。BrdU为15μmol/L、孵育时间为60 h时其标记率达较高水平,可满足研究需要。结论在高脂状态下大鼠EPC的生物学功能受损,其BrdU的最佳标记方案为15μmol/L,孵育时间为60h。     

内皮祖细胞与缺血性脑血管病研究进展

脑卒中是严重危害人类健康的疾病,其中缺血性脑卒中占了80%左右.3 h超早期用组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)溶栓,由于受时间窗及其本身溶栓成功率的限制,只有约2%～3%缺血性脑卒中患者得到了溶栓治疗[1],内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)的发现有可能为缺血性脑血管病的治疗提供一种全新的有希望的治疗方法.EPCs已经成功地在外周血、骨髓、脐血、血管壁、以及其他一些组织器官中分离出,并被证实其主要参与血管动态维持和生理性重建[2].     

椎-基底动脉延长扩张症患者脑血流动力学初探

目的 研究椎-基底动脉延长扩张症(VBD)患者的脑血流动力学特征.方法 采用经颅多普勒超声(TCD)连续观察18例经CT、MRI或磁共振血管成像(MRA)诊断的VBD患者(VBD组)的脑血流动力学特征,并与同期就诊的65例非VBD患者(非VBD组)进行对照.结果 VBD组与非VBD组相比主要表现为椎动脉、基底动脉收缩期峰值血流速度减慢[(-41±16)cm/s比(-60±12)cm/s,P=0.038],收缩期峰值血流速度/舒张末期血流速度降低(1.51±0.65比2.51±0.74,P=0.026),而且,两组的峰值平均血流速度[(-28±9)cm/s比(-39±17)cm/s]、搏动指数(0.37±0.14比0.75±0.20)、阻力指数(0.52±0.12比0.78±0.16)比较差异均有统计学意义(P值分别为0.037、0.028、0.036).VBD组TCD频谱形态表现为波峰圆钝,多数患者出现频窗充填.结论 VBD患者的血流动力学表现具有相对的特异性,TCD可作为其临床初步筛查和辅助诊断手段之一.     

当归注射液,甘露醇联合治疗急性脑梗塞疗效观察

当归注射液、甘露醇联合治疗急性脑梗塞疗效观察刘煜敏张晓琴王敏黄朝云作者单位：４３００７１武汉湖北医科大学附二院神经科我院朱玉壁老教授研制的当归注射液，已证实对闭塞性脉管炎有较好疗效［１］，受此启示，我们选用２５％的当归注射液联合甘露醇静脉注射治疗急性...