沙眼衣原体60kDa外膜蛋白基因的克隆与表达

目的 克隆和表达沙眼衣原体60kDa外膜蛋白(Omp2)基因。方法 D型沙眼衣原体感染McCoy细胞后，抽提基因组DNA，经PCR扩增出omp2基因片段，与pUCm—T克隆载体连接，酶切纯化后克隆到原核表达载体pQE30，构建重组表达载体pQE30／omp2，PCR、酶切及测序鉴定。IPFG诱导表达，SDS—PAGE检测有无蛋白的表达。结果 (1)获得长约1650bp的PCR产物，酶切结果显示所构建的重组质粒已成功地克隆了omp2基因，序列分析结果与已知omp2序列相同；(2)SDS—PACE检测表达产物，在相对分子量60kDa处有表达条带；(3)诱导表达之菌体超声破碎后，目的蛋白主要以包涵体形式存在。结论 获得了Ct omp2基因片段，并在E．coli M15中成功表达。     

临海市宣传贯彻《职业病防治法》效果评价

临海市地处浙东沿海 ,经济比较发达 ,大小化工、机械、建材等有毒有害企业有 40 0多家 ,每年企业工人职业中毒事件屡有发生。如 2 0 0 0年某服装厂 1名裁剪工 ,因为布匹中的二甲基甲酰胺而中毒 ;2 0 0 1年化工厂因为车间生产环境开放 ,手工操作 ,导致 1名工人急性 2 ,4 二硝基苯酚中毒死亡 ;2 0 0 1年某工厂因氯气泄漏致使 8人中毒等。发生职业危害事故的主要原因是部分企业的职业卫生防护设施差 ,领导和职工缺乏对职业卫生知识的了解。因此 ,开展多种形式的职业健康教育就显得尤为重要。盼望已久的《职业病防治法》于2 0 0 2年 5月 1日颁布…     

临海市建立职业健康监护档案工作初探

对临海市建立以用人单位为主体的职业健康监护档案工作进行总结。从实施结果看,用人单位满意、职工满意、卫生行政管理部门也满意,验收结果优秀。     

化浊行血汤联合常规药物治疗短暂性脑缺血发作临床观察

目的:观察化浊行血汤联合常规药物治疗短暂性脑缺血发作(TIA)的临床疗效。方法:选取70例血浊证TIA患者为研究对象,随机分为观察组与对照组各35例。对照组给予常规药物治疗,观察组在对照组用药基础上联合化浊行血汤治疗。治疗后比较2组临床疗效,观察2组治疗前后的超敏C-反应蛋白(hs-CRP)含量和血液流变学指标的变化。结果:观察组总有效率为91.43%,高于对照组的71.43%,差异有统计学意义(P0.05)。治疗前,2组hs-CRP含量比较,差异无统计学意义(P0.05)。治疗后,2组hs-CRP含量均较治疗前降低(P0.05);组间hs-CRP含量比较,差异无统计学意义(P0.05)。治疗前,2组全血黏度(高切)、全血黏度(低切)、血浆黏度和纤维蛋白原水平比较,差异均无统计学意义(P0.05)。治疗后,2组4项血液流变学指标水平均较治疗前降低(P0.05);观察组的4项血液流变学指标水平均低于对照组(P0.05)。结论:化浊行血汤联合常规药物治疗血浊证TIA临床疗效显著,可有效降低患者的hs-CRP含量,改善患者的血液流变学指标,有推广应用于临床的价值。     

沙眼衣原体主要外膜蛋白在大肠杆菌中的表达与鉴定

目的 克隆沙眼衣原体主要外膜蛋白(MOMP)基因,构建原核表达重组载体,并通过E.coli BL21实现MOMP的融合表达.方法 用PCR法扩增MOMP基因,克隆插入到pUCm-T载体中,序列测定正确后,将其亚克隆到原核表达载体pET-22b(+)中,采用Ni-NTA亲和层析法纯化表达产物,对表达产物进行SDS-PAGE和蛋白质印迹鉴定.结果 PCR扩增出约1200bpDNA片段,序列测定证实与基因库登陆的D型沙眼衣原体一致;表达产物的相对分子质量为47000,与预期分子质量相符,蛋白印迹证实表达产物为特异性蛋白.结论 沙眼衣原体MOMP基因可以在大肠杆菌中得到表达,其表达产物能与相应的抗体结合,为沙眼衣原体核酸疫苗的研究奠定了基础.     

连续传代对鼠衣原体生长相关性状及其毒力影响的初步研究

目的探讨体外特殊条件下鼠衣原体(Chlamydia muridarum,Cm)连续传代培养后在感染性、生长发育以及致病性等生物学性状上的变化,为筛选减毒活疫苗,筛查毒力相关基因提供依据。方法将实验室Cm野生株(G0)通过常规细胞培养,在辅助或不辅助培养条件下交替连续传代后,将亲本株G0与获得的传代株G28进行衣原体感染离心依赖性、细胞吸附能力、衣原体感染细胞生长曲线、衣原体形成的噬斑大小以及两种菌株在感染小鼠生殖道后所形成的输卵管病变情况进行检测。结果与亲本株G0相比,传代株G28对感染离心条件的依赖性显著下降(P<0.05);对感染细胞的吸附能力却明显上升(P<0.05);G0与G28在感染细胞32 h内的生长曲线差异并无统计学意义;在感染细胞中所形成的噬斑大小也无明显区别;但体内毒力试验中,G0感染小鼠后致输卵管病变率为87.5%,而G28的输卵管病变率仅为37.5%,两者形成差异有统计学意义。结论Cm传代株G28与亲本株G0相比,在感染能力显著增强的情况下,其致病性却显著降低,为后续鉴定毒力基因,进一步提取基因型单一的减毒株并应用于衣原体减毒活疫苗带来了希望。     

孕妇血清风疹病毒抗体IgM的检测与分析

目的：了解孕妇风疹病毒感染情况。方法：应用ELISA间接法检测120例孕妇血清中风疹病毒抗体IgM(RV-IgM)。结果：120例中,RV－IgM阳性15例,阳性率为12．5％;RV－IgM阳性检出率在＜25a,25-30a和＞30a年龄组分别为13．11％、12．20％、11．11％。多次妊娠者RV－IgM阳性检出率明显高于初次妊娠者（P＜0．05）。结论孕妇风疹病毒感染与孕次有一定的关系,与孕龄无关。     

川东獐牙菜的化学成分研究

目的 研究龙胆科植物川东獐牙菜Swertia davidi干燥全草的化学成分。方法 采用硅胶柱色谱、凝胶色谱等方法进行化学成分的分离纯化,通过理化性质和波谱数据进行结构鉴定。结果 从川东獐牙菜全草70%乙醇提取物中分离得到16个化合物,分别鉴定为熊果醇（1）、齐墩果酸（2）、5-羧基-3, 4-二氢-1H-2-苯并吡喃-1-酮（3）、3β, 12β-二羟基-孕烷-16-烯-20-酮（4）、当药黄素（5）、日当药黄素（6）、异金雀花素（7）、6-去甲氧基-7-甲基茵陈色原酮（8）、3-乙酰氧基-28-羟基-12-烯-乌苏烷（9）、龙胆苦苷（10）、N-正二十五烷-2-羧基苯甲酰胺（11）、4-O-2-羟基-6-甲氧基苯乙酮苷（12）、槲皮素- 3-O-β-D-木糖-(1→2)-β-D-半乳糖苷（13）、8-表金吉苷（14）、3, 5-二咖啡酰奎宁酸（15）、2-甲基苯基-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（16）。结论 所有化合物均为首次从该植物中分离得到。     

穿透支原体脂质相关膜蛋白诱导人单核细胞产生炎症性细胞因子

穿透支原体（M.penetrans，Mpe）是从感染人类免疫缺陷病毒的患者球液中分离出来的，被称为艾滋病相关支原体。Mpe能依靠其特殊的顶端结构黏附和入侵宿主的红细胞、CD4^＋T细胞和巨噬细胞等，但关于其对宿主的致病性及其可能的致病机制还不十分清楚。脂质相关膜蛋白（LAMPs）是暴露在Mpe表面与周围环境各种成分不断相互作用因而影响机体的免疫系统的一种主要蛋白。我们的研究证实，Mpe LAMPs能诱导小鼠巨噬细胞表达诱导性一氧化氮合酶和产生一氧化氮。