脂质体和脂质微泡对细胞膜的声孔作用比较

目的研究两种脂质载体——脂质体和脂质微泡对细胞膜的声孔作用。方法应用体外培养的乳腺癌细胞SK-BR-3，考察脂质体和脂质微泡在低频超声条件下，对SK-BR-3细胞膜的声孔作用，应用原子力显微镜观察超声后即刻和24 h的SK-BR-3细胞表面变化。结果超声可使细胞丧失贴壁性能，形态变圆，脂质微泡的加入明显增强这种作用。原子力显微镜观察表明，对照组(正常细胞单纯超声照射)细胞膜表面孔道暂时增大，部分细胞膜表面孔道直径大于1 μm。2%和5%脂质体+超声照射组和对照组无明显差别。脂质微泡+超声照射组对细胞膜结构有明显影响，2%脂质微泡+超声照射组产生的细胞膜表面孔道直径在1～3 μm，24 h内可以恢复。5%脂质微泡+超声照射组产生的细胞膜孔道直径2～4 μm，24 h内不能完全恢复。结论2%脂质微泡可以产生较强的声孔作用，使细胞膜上出现可逆性孔道，有利于药物或基因递送到细胞内。     

微泡超声造影剂的研究进展

根据近年来微泡超声造影剂的国外研究进展，阐述了微泡超声造影剂的制法、靶向制备技术、体内过程和物理原理，并讨论了其在治疗上的应用和发展前景。     

帕金森病伴不宁腿综合征的研究进展

<正>帕金森病(PD)是最常见的神经退行性疾病之一,临床症状包括以运动迟缓、静止性震颤、肌僵直等为主的运动症状以及便秘、睡眠障碍、吞咽困难、不宁腿综合征(RLS)等非运动症状~([1])。随着疾病深入研究,PD的非运动症状得到进一步重视,RLS作为PD主要的非运动症状,临床上易被忽视。RLS是一种常见的感觉、运动障碍性疾病,表现为睡眠或休息     

超声介导微气泡造影剂促反义寡核苷酸转染的有效性研究

目的探讨超声介导脂质体微气泡转染反义寡核苷酸HA-2741的有效性。方法12孔板培养人乳腺癌细胞,分组为:(1)单纯超声照射;(2)单纯造影剂;(3)单纯HA-2741;(4)超声照射 HA-2741;(5)造影剂 HA-2741;(6)造影剂 HA-2741 超声照射;(7)脂质体 HA-2741;(8)脂质体 HA-2741 超声照射。造影剂浓度2%,超声波发射频率1.3MHz,强度-3dB,照射时间30s,予与实验刺激后,流式细胞仪定量分析HA-2741的转染率,RT-PCR的检测乳腺癌细胞的HER-2mRNA水平,免疫细胞化学检测HER-2蛋白的表达。结果造影剂 HA-2741 超声照射组HA-2741的转染率显著高于其余各组,约94.6%,造影剂 HA-2741 超声照射组乳腺癌细胞的HER-2mRNA水平显著降低,HER-2蛋白表达明显减低,其程度与HA-2741转染率呈正相关。结论超声介导微气泡造影剂显著增加基因的转染效率,方法简便,安全,具有良好的靶向性。     

柔性纳米脂质体的制备及其脑内药物递送效率研究

目的 以脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)为模型药物,制备脑靶向BDNF柔性纳米脂质体,筛选及优化制备工艺,并对制剂进行质量评价。方法 采用注入法制备可经鼻给药的脑靶向柔性纳米脂质体,以外观形态、粒径、包封率和Zeta电位等为评价指标,考察搅拌温度、搅拌速度及醇水比例等因素对BDNF柔性纳米脂质体粒径分布的影响,在此基础上运用正交设计对制备工艺进行优化。通过测定BDNF的脑内药物浓度评价柔性纳米脂质体介导药物脑靶向递送效率。结果 正交设计结果表明,搅拌温度30 ℃、搅拌速度600 r·min^-1及醇水比例1∶5为最佳工艺条件,制得的BDNF柔性纳米脂质体形态圆整,粒径为(178.7±22.1)nm,Zeta电位为-29.8 mV。该制剂在温度4 ℃、相对湿度(60±10)%的条件下贮存30 d稳定。与BDNF溶液组相比,柔性纳米脂质体组能提高BDNF的脑内浓度近3倍,两组间差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论 优化的最佳工艺制得BDNF柔性纳米脂质体可明显提高BDNF的脑内药物浓度。     

柔性纳米脂质体介导脑源性神经营养因子经鼻给药治疗帕金森病的研究

目的 研究柔性纳米脂质体介导脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)经鼻给药治疗帕金森病的有效性及安全性。方法 采用注入法制备BDNF柔性纳米脂质体(BDNF-FNL),建立大鼠帕金森模型,将建模成功的大鼠随机分为模型组、BDNF溶液组及BDNF-FNL组,并以正常大鼠作空白对照,分别经鼻给药后于0.5,1,1.5,2 h测定BDNF在脑组织中的含量变化,以鼻黏膜组织病理改变初步判断该途径给药的鼻腔安全性,通过实验组大鼠的行为学变化、黑质酪氨酸羟化酶免疫阳性神经元的变化以及脑内纹状体3种单胺类神经递质(多巴胺、多巴柯和高香草酸)的含量变化评价其对帕金森病模型大鼠多巴胺神经元的修复作用。结果 BDNF-FNL组BDNF的脑组织浓度约是BDNF溶液组的3倍;柔性脂质体经鼻给药后安全性较高,对鼻黏膜无明显损伤;BDNF-FNL组的大鼠行为学改善效果优于BDNF溶液组;TH免疫组化结果表明,柔性纳米脂质体能更好的介导BDNF进入脑部发挥对多巴胺神经元保护作用;且BDNF-FNL组大鼠纹状体中3种单胺类神经递质的含量明显地高于BDNF溶液组及模型组。结论 柔性纳米脂质体能更好地介导BDNF经鼻入脑发挥对帕金森病模型大鼠多巴胺神经元的修复作用,且对鼻黏膜的安全性较好。     

载红细胞海藻酸钠-聚赖氨酸-海藻酸钠微囊的制备及质量评价

目的：制备载红细胞海藻酸钠-聚赖氨酸-海藻酸钠微囊（APA微囊）并进行质量评价。方法：采用高压静电成囊技术制备海藻酸钙微胶珠,与聚左赖氨酸反应后再包覆海藻酸钠形成三层膜结构,柠檬酸钠液化囊心后得APA微囊;光学显微镜下检测微囊的粒径,振摇法考察微囊的机械强度,不同酸碱度溶液测定微囊的化学强度,同时紫外分光光度法检测透过微囊膜血红蛋白的吸光度来评价囊膜的通透性,小鼠腹腔移植观察微囊生物相容性。结果：在成囊电压4kV,推进速度50mL·h^-1,针头直径0.7mm的条件下制得的微囊表面圆整光滑,95%以上微囊的粒径集中分布于1.5～2.1mm;72h内机械振摇破损率约为5%,在pH4.2～9.4的磷酸缓冲液中稳定;小鼠腹腔内移植于2周后回收的微囊外形圆整、光滑,无破损及明显结缔组织包绕。结论：本方法制备得到的APA微囊具有良好的机械、化学强度及生物相容性,可以作为微囊化细胞移植的载体。     

超声对不同肿瘤细胞抑制作用的实验研究

目的测试3种不同的肿瘤细胞对超声波的敏感性。方法固定超声频率(1.0 MHz),通过调节超声强度和超声时间,考察超声对3种不同的人肿瘤细胞(人肝癌细胞HepG-2、人结肠癌细胞SW-620、人高转移卵巢癌细胞HO 8910 pm)增殖抑制的影响,为超声用于抗肿瘤相关实验提供超声参数参考。结果 3种细胞对超声的敏感性不同,HepG-2和SW-620对超声的敏感性较强,而超声波对HO 8910 pm的影响相对较小。3种细胞的生存率均随超声强度的的增加而降低。结论不同的肿瘤细胞对超声波的敏感性存在差异,这提示在超声治疗或者超声辅助化学治疗肿瘤时需要对超声参数进行针对性的调节。     

细胞穿膜肽在癌症治疗中的应用

细胞膜有选择渗透性,能阻止大多数外来因子进入细胞。然而许多治疗因子必须穿过细胞膜才能进入细胞内起作用。细胞穿膜肽是一组简短的阳离子序列,它具有很强的穿膜能力。自从1988年发现细胞穿膜肽后,细胞穿膜肽被用于携带各种物质,如小分子、核酸、抗体、纳米粒等进入细胞膜。本文重点介绍了近几年来关于细胞穿膜肽穿膜机制的研究进展,以及细胞穿膜肽作为运载体携带抗癌药物靶向进入肿瘤细胞,从而实现对肿瘤细胞的靶向性,同时可克服肿瘤的多药抗药性等研究进展。     

红豆杉细胞提取物抑制肿瘤细胞增殖及诱导凋亡的实验研究

目的 研究红豆杉细胞提取物对肝癌细胞SMMC-7721的生长抑制作用及其机制。方法 运用台盼蓝拒染法测定肿瘤细胞生长曲线，流式细胞仪和Giemsa染色分析肿瘤细胞周期和细胞凋亡。结果 红豆杉细胞二氯甲烷提取物对肝癌细胞SMMC-7721的生长有明显的抑制作用，流式细胞仪分析发现G2／M期肿瘤细胞数量增多，经Giemsa染色发现肿瘤细胞有凋亡发生。结论 红豆杉细胞提取物可以通过诱导细胞发生凋亡而抑制肝癌细胞SMMC-7721的生长。