不同PTPN22-1123G>C多态性基因型RA患者间血清GPI的比较

摘要：目的：探讨类风湿关节炎（RA）易感基因PTPN22-1123G>C多态性不同基因型别间血清葡萄糖-6-磷酸异构酶（GPI）水平差异。 方法：采用ELISA法检测68例RA患者、69例非RA自身免疫性疾病(AID)患者和77例体检健康者血清GPI水平,PCR-RFLP技术检测PTPN22-1123G>C多态性分布。 结果：RA患者血清中GPI 浓度显著高于非RA AID患者和健康对照组（P均<0.01）。在RA活动组和非活动组,亦有显著差异（P<0.01）。PTPN22-1123G>C多态性位点在RA中的分布为：CC 19例、CG 25例和GG 24例,GG型RA患者的GPI浓度显著高于CC型（P<0.05）。 结论：PTPN22-1123G>C不同基因型RA患者血清GPI浓度具有显著性差异,提示T淋巴细胞的抗原刺激反应性对GPI浓度可能有影响。     

与食道鳞状上皮细胞癌发生相关的细胞骨架及相关蛋白的筛选鉴定

目的 比较永生化食道上皮细胞系和食道鳞状上皮细胞癌(ESCC)细胞系的差异表达细胞骨架相关蛋白图谱,筛选并探讨与ESCC发生发展相关的细胞骨架及相关蛋白.方法 采用组分蛋白分离方法提取细胞骨架相关蛋白,利用双向凝胶电泳(2DE)联合MALDI-TOF/TOF串联质谱技术,分析并鉴定永生化食道上皮细胞系NE1及ESCC细胞系HKESC-2中差异表达的细胞骨架及相关蛋白,并用Westem blot验证其中感兴趣的差异蛋白在一组食道上皮来源细胞系和ESCC患者肿瘤组织中的表达情况.结果 三次独立实验结果表明永生化食道上皮细胞系NE1和ESCC细胞系HKESC-2有52个蛋白点表达差异超过2倍,31个蛋白点经质谱分析鉴定为28种蛋白质,其中16种蛋白质在HKESC-2细胞中表达上调,12种表达下调.Vimentin在所有ESCC细胞系和大部分ESCC肿瘤组织中均呈现高表达,而Annexin Ⅱ则呈现低表达甚至缺失.结论 多种细胞骨架及相关蛋白在ESCC发生发展过程中表达发生变化,某些细胞骨架及相关蛋白的特异性表达模式可能可以作为ESCC诊断的分子标志.     

降钙素原对败血症早期诊断价值的系统评价

目的系统评价降钙素原（PCT）对败血症早期的诊断价值。方法用计算机检索CNKI,VIP等数据库。按纳入标准纳入有关降钙素原诊断败血症的研究,采用QUADAS工具进行质量评价,利用Metadiscl．4计算各个研究的合并DOR,进行异质性分析,并计算敏感度、特异性、阳性似然比和阴性似然比,进行合并受试者诊断特征曲线（SROC）分析,并获得SROC曲线下面积（AUC）。用ReviewManager5软件进行其它诊断试验评价指标的Meta分析。结果本研究按纳入标准纳入18个研究对象。18个研究间不存在异质性（x2=9．71,P=0．915,I2=0．0％）,18个研究合并敏感度为0．909,合并特异度为0．927,AUC为0．9712。结论从目前的研究看,降钙素原（PCT）对败血症旱期诊断有很高的价值,是很好的辅助诊断指标。     

检验医学实验教学中的辩证法

将内因与外因、局部与整体、一般与特殊、量变与质变、认识论与方法论等唯物辩证法哲学范畴和观点应用于医学检验形态学实验教学中,融知识传授与哲学观渗透于一体,不断提高学生的学习兴趣和分析问题、解决问题的能力,同时培养学生的科学辩证思维,用科学的态度和方法指导工作、学习,逐步成为具有创新精神和实践能力的高素质应用型检验医学人才。     

人脐血内皮祖细胞的分离、培养及鉴定

目的探索人脐静脉血内皮祖细胞的分离培养,为内皮祖细胞的临床应用提供实验方法。方法选择脐静脉血,应用密度梯度离心法,获取单个核细胞,接种于预先包埋了人纤维连接蛋白的培养板,用加入生长因子VEGF165和bFGF的内皮细胞专用培养基EGM-2MV培养细胞,3d后,洗掉非贴壁细胞,换培养液继续培养至7d,收集贴壁细胞进行细胞分析。激光共聚焦显微镜进行细胞功能学鉴定,流式细胞术测定祖细胞和内皮细胞系标志,MTT比色法检测细胞的生长状态。结果经过梯度密度离心和贴壁法选择的细胞能特异性吸附FITC标记的荆豆凝集素并内吞DiI-acLDL,祖细胞标志CD133及内皮细胞特异性抗原CD34、KDR检测,其阳性率分别为(27.05±2.94)%、(16.37±2.69)%和(56.67±7.29)%;体外培养的内皮祖细胞具有良好的细胞增殖活性。结论人脐静脉血中可以分离培养内皮祖细胞,为内皮祖细胞的进一步研究及临床应用奠定了基础。     

手足口病患儿T淋巴细胞亚群与CD3+CD4-CD8-双阴性调节性T细胞的检测及其临床意义

目的探讨外周血T淋巴细胞亚群及CD3+CD4-CD8-双阴性调节性T细胞在手足口病病人发病中的临床意义。方法采用流式细胞术检测了46例手足口病患者以及17例健康体检者外周血T细胞亚群CD3+、CD3+CD4-CD8+、CD3+CD4+CD8+、CD3+CD4+CD8-与CD3+CD4-CD8-双阴性调节性T细胞水平。结果与正常对照组相比,手足口病患者组CD3+、CD3+CD4-CD8+、CD3+CD4-CD8-双阴性调节性T细胞的百分率降低(P值分别为0.008、0.050、0.025),CD3+CD4+CD8+、CD3+CD4+CD8-百分率以及CD4/CD8比值差异无统计学意义(P值分别为0.847、0.775、0.149),以上各细胞亚群的百分率以及CD4/CD8比值在年龄与性别方面差异无统计学意义。结论手足口病患者CD3+CD4-CD8-双阴性调节性T细胞、CD3+、CD3+CD4-CD8+异常变化提示其免疫功能异常。     

降钙素原对新生儿败血症早期诊断价值的系统评价

目的系统评价降钙素原(PCT)对新生儿败血症早期诊断价值。方法用计算机检索CNKI、VIP等数据库。按两个纳入标准分别纳入有关PCT诊断新生儿败血症的研究,采用QUADAS工具进行质量评价,利用Metadisc1.4计算各个研究的合并DOR,进行异质性分析,并计算敏感度、特异度、阳性似然比和阴性似然比,进行合并受试者诊断特征曲线(SROC)分析,获得SROC曲线下面积(AUC)。用ReviewManager5软件进行其它诊断试验评价指标的Meta分析。结果按照标准一,纳入8个研究;按照标准二,纳入7个研究。8个研究间不存在异质性(χ2=3.28,P=0.858,I2=0.0%)。8个研究合并敏感度为0.914,合并特异度为0.935,AUC为0.9783;7项研究间不存在异质性(χ2=3.24,P=0.779,I2=0.0%),合并敏感度为0.876,合并特异度为0.943,AUC为0.9578。结论从目前的研究看,PCT对新生儿败血症早期诊断有很高的价值,是很好的辅助诊断指标。     

临床免疫学与检验实验教学的改革与实践

临床免疫学检验是一门实践性很强的学科,通过实验不但可以验证理论,而且可以完善理论。临床免疫学检验实验教学的好坏将直接影响学生对基本理论的理解与掌握,也决定他们将临床免疫学检验知识运用到临床实践的能力的高低。因此,提高教学质量,培养具有扎实的专业知识、较强的实践动手能力和具备高度认真工作态度的检验医学人才是临床免疫学检验承担的主要任务。本科室在多年的教学实践基础上,对《临床免疫学与检验》实验教学从思想教育、实验内容、教学手段及考核制度等方面进行了改革与创新,并取得良好的教学效果。     

抗环瓜氨酸肽抗体检测方法的研究进展

类风湿关节炎(RA)是一种常见的以关节滑膜增生及软骨破坏引起的慢性炎症为主要特征的自身免疫性疾病.大多数情况下RA患者的这种慢性炎症反应会引起关节滑膜增厚最终导致关节的破坏[1].RA患者在2年以内大约70%的关节破坏症状进行性加重,RA的早期诊断治疗有非常重要的意义[2].瓜氨酸是人体中的稀有氨基酸,是由精氨酸在精氨酸肽脱亚胺酶以及钙离子共同参与的条件下转录后修饰而形成[3].2001年REPARON SCHUIJT等[4]研究证实在抗环瓜氨酸肽抗体(anti-CCP)血清阳性反应的RA患者骨髓和滑液中的B淋巴细胞能自发分泌抗CCP抗体,分泌IgM抗CCP细胞占总分泌IgM抗体的2.4%～25%.近年来,研究表明抗CCP抗体是早期诊断RA的良好标志物,诊断RA的灵敏度41%～87.6%,特异度88.9%～98%,对疾病的诊断治疗以及监测有很大价值[5-7].抗CCP抗体与类风湿因子(RF)相比诊断RA的灵敏度(78.5% vs 75.9%)更高,特异度也明显增高(95.9% vs 78.7%)[8].2010年美国风湿病学会(ACR)和欧洲抗风湿病联盟(EULAR)共同提出RA新的分类标准,并把ACPA(anti-CCP)和RF共同作为RA的血清学诊断依据[9].目前,抗CCP抗体的检测方法主要有酶联免疫吸附测定法、免疫荧光分析法、化学发光分析法、胶体金免疫层析法等.本文拟对抗CCP检测方法的现状和进展综述如下.     

异体手移植术后ATG治疗过程中T淋巴细胞亚群的监测（附3例报告）

目的 探讨异体手移植中使用抗胸腺细胞球蛋白(ATG)治疗时T淋巴细胞亚群监测对于指导药物用量、减少并发症和减少治疗费用的意义。方法 通过流式细胞仪测定我院完成的3例异体手移植患者外周血中T淋巴细胞亚群(CD^3 、CD^4 、CD^8 、CD28、CD4／CD8)的变化。结果 使用ATG治疗期间CD3、CD4、CD8均明显下降，3例患者无明显差异；ATG治疗后外周血中淋巴细胞长期持续改变。结论 通过T淋巴细胞亚群的监测了解患者应用ATG后免疫状态，有利于调整ATG用量，预防并发症的发生。