富集低丰度蛋白的人类精子全蛋白二维电泳整合图的建立

目的:运用二维电泳(2-DE)技术分离人类正常精子低丰度蛋白并建立全精子蛋白的2-DE整合图。方法:30例精子标本混匀后一次性进行蛋白提取,分别使用0.8、0.6、0.5、0.3 mg的蛋白上样量进行2-DE。运用MALD I-TOF法对确定2个恒定蛋白点的等位点(PI)和相对分子质量(Mr)作为图像的内参照点,对不同上样量的2-DE图进行比较分析,最后合成1张富集低丰度蛋白的整合图。结果:在0.5 mg图中分离出(1 080±23)个蛋白点,并合成具889个匹配点的整合图A。在上样量为0.8、0.6及0.3 mg的2-DE图中,分别新检测到381、50、32个在0.5 mg图中未检测到的蛋白点。最后合成具1 352个蛋白点的整合图B。结论:通过改变上样量的方法促进低丰度蛋白分离并合成具1 352个蛋白点富集低丰度蛋白的2-DE整合图。     

DNA指纹技术在可疑精子标本等鉴定中的应用

目的：应用DNA指纹技术对精子库供精者中来源可疑的精子标本进行鉴定,并对供精者的后代进行亲子鉴定。方法：分别对本研究室所涉及的6名供精者的精子标本及其对应可疑精子标本各一份,同时志愿者精子和其儿子外周血各一份提取DNA,应用PCR扩增,PAGE胶电泳检测DNA指纹图。结果：通过DNA指纹图分析,5个可疑精子标本被确定为对应同一供精者精子标本,余1例被确认为非同一供精者精子标本来源;志愿者和其儿子被确定为亲子关系。结论：应用DNA指纹图技术对精子库供精者的可疑精子标本和供精者精子及对应供精者精子和后代外周血进行分析,可以对其来源进行准确的鉴定。     

体外受精供胚移植成功一例报道

本文报道了我国首例经体外受精供胚移植成功的病例。供、受者经应用促排卵药后使排卵周期同步。受者于月经周期第16天,接受供者经体外受精的4细胞、6细胞及两原核阶段胚胎各一个。移植后确定了妊娠,于1988年6月7日诞生了一体重3kg发育正常的男婴。对作为优生工程之一的供胚移植的历史、适应症、成功的因素和应注意事项进行了讨论。     

108例原发或继发闭经者的染色体分析

目的 分析不孕专科门诊中原发闭经和继发闭经患者中的染色体异常，为其生育提供指导。方法 按常规方法制备患者外周血淋巴细胞染色体，进行核型分析。结果 在108例病人中共检出染色体异常24例，异常检出率为22．2％，主要涉及X染色体的数目和结构异常。结论 染色体异常是导致原发和继发闭经的重要原因之一，且主要涉及性染色体的异常，在对原发闭经和继发闭经患者进行助孕生殖前常规细胞遗传学检查十分必要。     

人类精子蛋白质组分析的双向蛋白电泳技术研究

目的 :利用人类精子蛋白质组分析的双向蛋白电泳技术 (2 DE)建立正常精子的蛋白质图谱。方法 :比较不同蛋白质提取方法和上样量、不同的第一向等点聚焦方法所得图谱的差别 ,并初步建立人类正常精子的蛋白质图谱。结果 :用蛋白质提取方法一制得的样本电泳后有 6 70～ 70 3个蛋白质斑点 ;方法二所得样本电泳后仅有 194～ 2 10个蛋白质斑点。蛋白质提取方法一所制样本进行载体两性电解质pH梯度 SDS电泳技术 (ISO DALT)得到约 2 80～ 30 0个蛋白质斑点 ,用固相pH梯度 SDS电泳技术 (IPG DALT)得到多达 70 0个蛋白质斑点。结论 :采用蛋白质提取方法一制备精子蛋白质进行IPG DALT电泳的方法适用于建立精子全细胞蛋白质谱。     

706例供精者染色体分析

目的 研究染色体分析在精子库供精者(Donor)筛查中的作用，防止供精人工受精后出生遗传病患儿。方法 应用染色体G显带，对706例Donor的染色体进行分析。结果 706例Donor染色体中，染色体异常12例[inv(9)]，共有多态76例(Yqh 73例，16qh 3例)。结论 供精者个体存在染色体异常且以9号染色体倒位为主，供精者个体存在较高频率的大Y，其临床意义有待于积累更多资料。     

EGF受体特异的酪氨酸激酶抑制剂对早期鼠胚体外发育的影响

将表皮生长因子（ＥＧＦ）受体特异的酪氨酸激酶抑制剂与２－细胞鼠胚联合体外培养２４，４８和６０ｈ。结果显示：受抑制剂作用的胚胎，５５．２％发育不超过个细胞期，仅１．５％的胚胎能发育形成胚泡，表明抑制剂能显著影响４－细胞和桑椹胚的进一步发育。提示ＥＧＦ受体在早期鼠胚发育过程中具有增殖和分化双重性作用。     

体外受精胚胎移植中超声对卵泡的监测

应用实时扇形超声监测了23例体外受精病例经hMG/hCG促排卵的卵巢滤泡。用hCG前直径≥15mm的滤泡平均数为2.6个/人,各周期最大滤泡平均直径为18.5±2.6mm。卵抽吸日直径>15mm的滤泡平均数为3.2个/人;各周期最大滤泡平均直径为21±2.7mm。19例按方案完成者共回收卵101个,中间和成熟型占90.1％;受精率70.3％;化学妊娠3例;临床妊娠1例,于1988年6月7日分娩一男婴。     

冷冻胚胎保存时限的中国专家共识

胚胎冷冻保存技术是辅助生殖技术的重要衍生技术,它有助于提高单个取卵周期的胚胎利用率和累积妊娠率,降低患者的治疗费用及卵巢过度刺激综合征的发生率,并在生育力保存中发挥重要作用。然而,随着体外受精-胚胎移植周期数的不断增长,冷冻保存胚胎的数量也随之显著增加,其中不少冷冻胚胎长期保存不用(如无主胚胎、欠费胚胎),给各生殖医学中心造成了负担并占用大量社会医疗资源,同时也带来了一系列伦理问题。中华医学会生殖医学分会伦理学组针对胚胎的属性、胚胎冷冻保存安全性和冷冻保存相关处置等问题反复讨论,修订并形成了有关冷冻胚胎保存时限的十条共识,以利于规范我国胚胎冷冻技术的应用及管理。