单基因病临床意义不明变异实施植入前遗传学检测的策略研究

目的探讨单基因病临床意义不明变异(variants of uncertain significance, VUS)实施胚胎植入前遗传学检测(preimplantation genetic testing, PGT)的策略。方法招募2018年至2020年期间因携带VUS前来中信湘雅生殖与遗传专科医院进行生育咨询的单基因病病例, 根据美国医学遗传学与基因组学学会(American College of Medical Genetics and Genomics, ACMG)发布的《ACMG遗传变异分类标准与指南》(以下称ACMG指南)及贝叶斯分析法, 对VUS致病性进行重分析, 分类为"致病/可能致病变异" "倾向于致病的VUS""致病性仍不明确的VUS"及"倾向于良性的VUS"。在夫妻双方自主自愿并充分理解风险的原则下, 对VUS升级为"致病/可能致病变异"及分类为"倾向于致病的VUS"的家系实施胚胎植入前单基因遗传学检测(preimplantation genetic testing for monogenic disorders, PGT-M)。追踪随访妊娠胎儿、出生孩子的生长发育状...     

辅助生殖技术助孕出生婴儿性别比例的初步调查

<正>由于现代医学技术的发展和辅助生殖技术(ART)的临床应用,2006年6月监督ART国际委员会发表报告说:全世界共有300多万名试管婴儿出生,每年实施大约100万例体外受精(IVF),年出生试管婴儿约为20万。传统的自然妊娠生育模式下男女婴儿的出生比例为106～110.2:100。ART助孕出生婴儿性别比例是否与自然妊娠相似?为探讨这一问题,我们回顾性地统计分析了2009年至2010我院在ART助孕[包括IVF/卵胞浆内单     

200例长方案卵胞浆内单精子注射周期注射人绒毛膜促性腺激素时机的分析

目的 探讨长方案降调节超排卵过程中推迟注射人绒毛膜促性腺激素(HCG)的效果. 方法 回顾性分析2010年7月～12月接受卵胞浆内单精子注射(ICSI)助孕的不孕症患者200例,均采用垂体长方案降调节,按照其与传统注射HCG时机(有3个≥17mm卵泡)相比推迟的天数分组,比较各组的数据及其结局. 结果 所有周期注射HCG的时间均较传统标准推迟2d及以上.推迟2d组182例,推迟3d组17例,推迟4d组1例.推迟3d组与推迟2d组比较,促性腺激素(Gn)天数、注射HCG日雌二醇(E2)水平、卵泡直径≥18mm、≥16mm的卵泡数及≥18mm/≥14mm卵泡数比例明显增多,HCG日最大卵泡直径达到(24.27±1.56)mm,明显增大;卵母细胞回收率、MⅡ卵率、受精率、优胚率等无差异.两组均得到较好的妊娠率,推迟2d组64.57％,推迟3d组66.67％;两组间胚胎移植取消率、流产率、宫外孕率、卵巢过度刺激综合征(OHSS)(重度)发生情况无显著差异. 结论 垂体长方案降调节中,在传统注射HCG时机的基础上,适当推迟HCG注射时间是可行的.     

HCG注射前雌二醇水平下降是否影响PCOS患者IVF/ICSI结局?

目的探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者在控制性促排卵(COH)过程中,HCG注射前雌二醇(E2)水平下降对IVF/ICSI-ET助孕结局的影响。方法回顾性分析2011年7月至2014年7月期间,在中信湘雅生殖与遗传专科医院行辅助生殖助孕,COH过程中出现HCG注射前E2下降的95例PCOS患者的临床资料;选择同期年龄、体重指数(BMI)相匹配,COH过程中HCG注射前E2持续上升或HCG日与HCG注射前一日E2水平一致的95例PCOS患者为对照。又将E2下降组分为2个亚组:Gn减量组及自发性下降组。比较各组的基础资料、IVF/ICSI助孕结局及卵巢过度刺激综合征(OHSS)的发生情况。结果 (1)Gn减量组的BMI及Gn使用总量显著低于对照组(P0.05)。HCG前一天E2水平在E2下降组显著高于对照组(P=0.00),其中,Gn减量组(16 663.90±5 163.20)pmol/L显著高于对照组(9 537.20±4 002.60)pmol/L(P0.05)。而HCG日E2水平,在自发性下降组(9 191.40±4 494.10)pmol/L显著低于Gn减量组[(13 726.10±4 570.60)pmol/L]及对照组[(13 499.90±5 096.20)pmol/L](P0.05)。自发性下降组COH过程中E2峰值显著低于对照组和Gn减量组(P0.05)。Gn减量组的E2下降程度与自发性下降组比较,无显著性差异(P0.05)。(2)IVF/ICSI结局方面,各组的回收卵母细胞数无显著性差异(P0.05),但E2下降组的卵母细胞回收率显著低于对照组(75.64%vs.93.73%,P=0.00),其中Gn减量组卵母细胞回收率最低(73.56%),自发性下降组居中(84.76%),对照组最高(93.73%);各组的优胚率、临床妊娠率、胚胎种植率、因OHSS取消移植率、中重度OHSS发生率比较,均无显著性差异(P0.05)。结论PCOS患者在COH过程中出现HCG注射前E2的下降,可能会导致卵母细胞回收率下降,但无论自发性下降或是Gn减量所致的下降,并不影响IVF/ICSI的临床结局。     

死精子症精子相关蛋白的蛋白质组学研究

目的:运用双向电泳(2-DE)和质谱技术比较1例死精子症患者和正常人精子的蛋白质组成差异。方法:用2-DE分离了10例正常生育者30份精子标本和1例死精子症3份精子标本的蛋白质,分别获得其参考图谱并进行比较,用质谱技术鉴定其中部分差异蛋白点。结果:在正常精子图谱和死精子症患者精子图谱分别分离出(905±57)和(792±28)个蛋白质点,死精子症患者精子图谱上有178个点未能匹配。对其中6个在患者图谱中缺失的蛋白质点进行了鉴定。结论:死精子症患者图谱上缺失的6个蛋白,可能与死精子症的形成有关。     

授精时机、活动精子总数对宫腔内人工授精临床妊娠率影响的研究

目的　探讨在宫腔内人工授精 (IUI)过程中 ,授精时间、处理后A、B级精子总数与IUI妊娠率的关系。方法　回顾了我室 2 0 0 1年 4月 30日～ 2 0 0 1年 11月 1日 2 0 8例IUI的资料 ,比较了不同授精时间、处理后A、B级精子总数对IUI临床妊娠率的影响。结果　IUI的授精时间与预期排卵时间在 6小时以内组的妊娠率显著高于 8小时组 (P <0 .0 5 ) ;而处理后A、B级精子总数分为 3组① 1× 10 6<精子总数 <2× 10 6;② 2× 10 6<精子总数 <10×10 6;和③精子总数 >10× 10 6。 3组间比较表明 ,其临床妊娠率无显著性差异 (P >0 .1)。结论　IUI治疗过程中 ,A B级精子总数 >1× 10 6时 ,其数量增加对临床妊娠率的增加并不显著 ,但授精时间愈接近排卵期 ,则妊娠率愈高     

应用双向电泳技术初步建立人精子头部蛋白质图谱

目的 :利用人类精子蛋白质组分析的双向蛋白电泳 (2 DE)技术建立正常人精子头部蛋白质图谱。　方法 :先用固相pH梯度 SDS电泳技术 (IPG DALT)对全精子和精子头部蛋白质抽提物进行蛋白质分离 ,然后用图像分析软件比较精子头部蛋白质图像与精子蛋白质图像的蛋白质斑点组成差异。其中 ,全精子蛋白质的抽提比较了硫脲 /尿素 /盐酸胍和Kit/盐酸胍两种抽提方法。　结果 :硫脲 /尿素 /盐酸胍法与Kit/盐酸胍法所得的全精子 2 DE图像蛋白质斑点分别为 80 2个和 797个 ,其中相同的有 4 92个 ,将两种方法获得的图像整合而得到的全精子蛋白质图像有1 1 0 7个蛋白质斑点 ;精子头部图像蛋白质斑点有 4 2 8个 ,经匹配 ,全部来源于全精子蛋白质图像。　结论 :综合采用两种蛋白质提取方法初步建立了精子头部蛋白质图谱。     

提早加用促性腺激素释放激素拮抗剂可改善低反应患者的助孕效果

目的:探讨体外受精-胚胎移植(IVF-ET)/卵细胞浆内单精子注射周期中低反应患者提早加用促性腺激素释放激素(GnRH)拮抗剂对助孕效果的影响。方法:回顾性分析卵泡达14mm(198个周期,A组)和12mm(269个周期,B组)开始用GnRH拮抗剂的两组患者,比较其促性腺激素(Gn)使用天数和剂量、GnRH拮抗剂所用天数、HCG日血清雌二醇、黄体生成素、孕酮水平、获卵数、着床率(IR)、临床妊娠率(PR)等。结果:B组Gn使用天数短,但Gn总量增加,早发LH峰有降低的趋势,B组IR、PR和远期妊娠率均显著高于A组。结论:提早至卵泡达12mm即加用GnRH拮抗剂可改善IVF-ET助孕效果。     

改良的超长方案在PCOS不孕患者IVF/ICSI-ET中的疗效

目的：比较改良超长方案降调节结合人绝经期促性腺激素（HMG）和常规长方案降调节在多囊卵巢综合征（PCOS）不孕患者行体外受精 /胞浆内单精子注射-胚胎移植术 (IVF/ICSI-ET) 助孕中的疗效。方法：回顾分析我院2008年8月至2009年12月采用改良超长方案的132例和常规长方案588例PCOS患者,对两组受精率、卵裂率、临床妊娠率、着床率、抱婴率、流产率、治疗费用等重要指标进行统计和对比。结果：与常规长方案组相比,改良超长方案组患者的受精率、卵裂率、着床率、临床妊娠率显著上升(P<0.001);用药天数缩短且患者治疗费用显著减少(P<0.001);抱婴率上升、流产率下降（P＜0.05)。结论：改良超长方案结合HMG超排卵能有效改善PCOS不孕患者行 IVF/ICSI-ET 的妊娠结局并节约治疗费用。     

精子大头多尾畸形与性染色体异常

目的 探讨精子畸形与精子染色体异常的关系,了解畸形精子的病理学改变,方法 应用光学和电子显微镜,性染色体特异性探针荧光原位杂交（FISH）技术研究罕见的大头多尾畸形精子。结果 巴氏染色后观察的精子畸形率达98．75％（油镜下测量头部畸形达100％）,精子多尾率达60．25％（最多达8尾）,电镜观察证实,精子头部表面凹凸不平,核型极不规则,有大量细胞质结构,尾部除数量异常外,尚有中心粒,线粒体和鞭毛结构的异常,FISH结果证实,性染色体多体率为61．4％,与精子多尾的组成比有大致的平行关系。结论 尽管体细胞染色体正常,畸形精子人可伴有严重染色体异常。