卡介菌基因组DNA和卡介菌多糖核酸免疫调控活性的比较

目的:比较研究卡介菌(Mycobacterium bovis Bacillus Calmette-Guérin, BCG)基因组DNA(BCG-DNA)和卡介菌多糖核酸(BCG-PSN)的免疫调控活性.方法:制备高纯度的BCG-DNA,小鼠脾细胞 (splenocyte)和人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)分别与BCG-DNA和 BCG-PSN共同培养72 h,采用ELISA方法检测细胞培养上清中IFN-γ的水平. 结果:所制备的BCG-DNA纯度较高,DNA含量达95.3%.琼脂糖电泳显示:BCG-DNA片断大小集中于200～250 bp.ELISA结果表明BCG-DNA与BCG-PSN均可显著激活小鼠脾细胞和人外周血单个核细胞,有效诱导IFN-γ的产生(P＜0.01).当浓度达10 μg/ml以上时,BCG-DNA免疫调控作用优于BCG-PSN(P＜0.01).结论:BCG-DNA 可显著诱导Th1型细胞因子IFN-γ的产生,具有较强的免疫调控活性.     

开口柱面换能器声场分析

目的:聚焦超声治疗妇科浅表组织疾病中存在聚焦换能器和定位探头同时放置的问题,在实际的治疗头设计中必须考虑放置B超探头对聚焦声场的影响,本文涉及一种开口柱面换能器聚焦超声声场的数值计算与仿真,通过计算得出声场的三维空间分布,同时研究柱面自聚焦换能器中不同开口形状、位置、面积大小对声场的影响,以指导开口换能器的实际设计。方法:本文通过建立三维直角坐标系,应用Rayleigh积分得出柱面换能器聚焦区域内每一点的声强表达式,运用C语言和matlab采用变步长辛卜生二重积分的方法对开口柱面聚焦超声换能器的声场进行了数值计算和仿真,得出声场的三维分布。结果:对开口的不同形状、大小、位置的声场分布仿真结果表明:不同开口形状都会使聚焦区域声压幅值下降,开口半径增大,声压表现为下降的趋势,Z轴向的声压在换能器的边缘较大,中间小。随着开口中心位置距原点的距离越大,Z轴向的声压分布越不均匀,而对聚焦位置影响不大。结论:通过不同开口参数对声场三维分布影响可以看出:柱面超声换能器的开口形状、位置、面积对聚焦区域的声压均有明显影响。与给定的条件相比,选择位置居中、面积较小、的换能器,能使聚焦性能得到提高,而换能器的开口形状对聚焦效果影响不大。     

五味子提取工艺优化及乙醇提取物的皮肤细胞抗氧化作用研究

目的 探究五味子提取物对人皮肤细胞氧化损伤的保护作用,开发其在皮肤抗氧化方面的应用。方法 分别采用热水蒸煮和水蒸气蒸馏的方法进行脱色和除味;另外,采用叔丁基过氧化氢（tBHP）诱导的HaCaT细胞氧化应激模型评价五味子提取物对人皮肤细胞氧化损伤的保护作用,采用CCK-8试剂盒检测细胞存活率,AnnexinV-FITC/PI双标记流式细胞仪检测细胞凋亡率,2,7-二氯荧光黄双乙酸盐法检测细胞内活性氧的水平。结果 采用优化后的提取工艺得到了气味变淡且颜色明显变浅的五味子提取物;用北五味子提取物预处理HaCaT细胞6 h后,可有效降低tBHP引起的细胞凋亡,提高细胞存活率,降低细胞内ROS水平。结论 优化后的乙醇提取工艺显著改善了五味子提取物的颜色和气味,并保持了提取物的抗氧化活性,因而有望成为一种应对皮肤氧化损伤的外用保护剂。     

PKC抑制剂Ro31－8220对大鼠肝产生IL－6和纤维蛋白原的作用

目的：研究重组人白细胞介素６（ｒｈＩＬ－６）对原代培养大鼠肝细胞分泌纤维蛋白原（Ｆｉｂｒｉｎｏｇｅｎ，Ｆｇｎ）的影响及蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）抑制剂Ｒｏ３１－８２２０对枯否细胞分泌ＩＬ－６的作用。方法：以酶联免疫吸附测定法（ＥＬＩＳＡ）测定Ｆｇｎ；测定Ｉ－６采用［３Ｈ］－ＴｄＲ掺入增殖法。结果：大鼠肝细胞（３×１Ｏ６／ｍｌ）与ｒｈＩＬ－６（０～１００ｋＵ／Ｌ）孵育２４ｈ，刺激肝细胞分泌Ｆｇｎ增加；Ｒｏ３１－８２２０（０．１～１０μｍｏｌ／Ｌ）显著抑制枯否细胞释放ＩＬ－６。结论：提示ＩＬ－６是调节纤维蛋白原合成的重要细胞因子，推测ＰＫＣ抑制剂可通过抑制枯否细胞分泌ＩＬ－６来降低Ｆｇｎ的分泌。     

苦参碱对体外小鼠脾细胞增殖及腹腔巨噬细胞释放白细胞介素－1及－6的影响

目的：研究苦参碱对小鼠脾细胞增殖及腹腔巨噬细胞释放白细胞介素１（ＩＬ１）及６（ＩＬ６）的影响．方法：［３Ｈ］ＴｄＲ参入法测定脾细胞增殖，胸腺细胞增殖法和Ｂ９细胞增殖ＭＴＴ法测定ＩＬ１和ＩＬ６活性．结果：苦参碱（１２５－５００ｍｇ·Ｌ－１）以剂量依赖方式显著抑制ＣｏｎＡ及脂多糖（ＬＰＳ）诱导的小鼠脾细胞增殖以及ＬＰＳ诱导的小鼠腹腔巨噬细胞释放ＩＬ１和ＩＬ６．结论：苦参碱抑制体外小鼠脾细胞增殖及巨噬细胞分泌ＩＬ１和ＩＬ６．     

浅析鼻内镜治疗鼻窦炎的临床应用价值

目的根据临床经验，浅析鼻内镜治疗鼻窦炎的临床应用价值。方法结合本院运用鼻内镜下手术治疗鼻窦炎的实际情况，对近年来在我院进行手术的患者进行数据分析，并与未做手术治疗的患者进行对比。结果在我院共有108例患者运用鼻内镜下手术进行治疗，136例患者未进行手术治疗，其中手术治疗患者中，男、女分别为67例、41例，手术治疗治愈患者男、女分别为61例，36例。鼻内镜下手术治疗总治愈率89．81％，男、女治愈率分别为91．04％、87．80％。结论鼻内镜下手术治疗鼻赛炎，具有清楚观察病变部位，较好的彻底治疗效果，对正常组织损伤小，手术后复发及副作用较小，鼻内镜下手术治疗鼻窦炎具有较好的临床效果。     

苦参碱对纤维蛋白纤维蛋白原降解产物诱导血管细胞损伤、增殖及腹腔巨噬细胞释放IL-1的影响

目的：研究苦参碱（Ｍａｔ）对纤维蛋白纤维蛋白原降解产物（ＦＦＤＰ）作用的影响。方法：大鼠主动脉内皮细胞损伤以乳酸脱氢酶释放测定;大鼠主动脉平滑肌细胞增殖采用结晶紫染色法测定;白细胞介素１活性采用小鼠胸腺细胞增殖法测定。结果：ＦＦＤＰ能促进大鼠主动脉内皮细胞释放乳酸脱氢酶,诱导大鼠主动脉平滑肌细胞增殖,并促使小鼠腹腔巨噬细胞分泌ＩＬ１增加。结论：Ｍａｔ可抑制ＦＦＤＰ的作用。对动脉粥样硬化的防治可能有一定意义。     

CpG-ODN气道内应用抑制哮喘小鼠过敏性气道炎症及GATA-3的表达

目的　研究气道内应用CpG寡脱氧核苷酸 (CpG ODN)对小鼠哮喘模型气道过敏性炎症的治疗作用及对肺内GATA 3表达的影响。方法　鸡卵蛋白 (OVA)免疫BALB c小鼠建立哮喘模型 ,激发后 1h气道内滴入 10 0 μgCpG ODN ,处死动物后观察支气管肺泡灌洗液 (BALF)中白细胞总数、嗜酸性粒细胞百分比 (EOS % )的变化及IL 4、IL 5、IL 12、IFN γ的含量变化。取肺组织行病理切片HE染色、AB PAS染色检查 ,观察小鼠气道炎症情况 ,免疫组化染色观察CpG ODN对小鼠哮喘模型肺部GATA 3表达的影响。结果　CpG ODN治疗组BALF中IL 12和IFN γ的产生增加 ,IL 4、IL 5的产生减少 ,BALF中细胞总数及嗜酸性粒细胞比例降低 ,肺部炎症情况明显减轻 ,肺血管周围及支气管周围表达GATA 3的细胞数较哮喘模型组及对照寡核苷酸治疗组明显减少。结论　哮喘小鼠激发阶段气道内滴入CpG可能通过诱导IL 12、IFN γ产生 ,抑制GATA 3的表达 ,导致TH2型细胞因子的产生减少 ,从而减轻哮喘气道过敏性炎症。     

IL-2调节人外周血T淋巴细胞CTLA-4表达

目的 探讨人外周血T淋巴细胞CTLA-4的表达情况及IL-2对其表达的调节作用。方法 采用流式细胞仪定量测定人外周血T淋巴细胞内及细胞膜上CTLA-4的水平，半定量RT-PCR检测T淋巴细胞内CTLA-4mRNA的水平，并在体外用IL-2刺激T淋巴细胞后观察CTLA-4及CTLA-4mRNA水平的变化。结果 人外周血T淋巴细胞膜表面几乎不表达CTLA-4，7．6％-18．0％的T淋巴细胞有胞内表达，CD4^ T淋巴细胞表达CTLA-4的阳性比例略高于CD8^ T淋巴细胞；人T淋巴细胞可溶性形式的CTLA-4mRNA半衰期短于全长CTLA-4mRNA；IL-2可以通过诱导人T淋巴细胞CTLA-4mRNA的转录上调CTLA-4的表达，IL-2诱导的细胞多为CD25^ T淋巴细胞。结论 CTLA4多存在于人外周血T淋巴细胞内，参与T淋巴细胞活化过程的调节。IL-2的免疫抑制作用可能与其诱导T淋巴细胞内CTLA-4mRNA转录，从而上调CTLA-4的表达有关。     

应用酵母单杂交系统筛选CpG免疫激活序列的特异性结合蛋白

目的：寻找与CpG免疫激活序列（immunostimulatory sequence,ISS)有选择性相互作用的蛋白,以进一步探讨其分子作用机制。方法：采用酶母单杂交系统,以4重复的ISS为“锈饵”,对人骨髓细胞cDNA文库进行初步筛选,并对部分阳性克隆以电泳迁移率变动分析（EMSA）进行验证。结果：已获得4个双阳性克隆,其中两个编码功能未知的蛋白,而另外两个均属抗体轻链,分别与抗DNA抗体和抗乙肝表面抗原抗体（HBsAb)高度同源;EMSA发现HBsAb可在偏酸pH条件下（pH6.4和5．8时）特异性地与含ISS的寡核苷酸（CpG-ODN）结合。结论：HBsAb可与ISS特异性结合。