HPLC法测定复方咪康唑散中硝酸咪康唑含量

目的:建立高效液相色谱法测定复方咪康唑散中硝酸咪康唑的含量。方法:色谱柱:Angilent Eclipse XDB-C₁₈柱（150nn×4.6 mm,5μm）,流动相:甲醇-乙腈-0.5%乙酸铵（42.5:42.5:15）,检测波长:230 nm,流速:1.0 ml·min^-1,柱温:30℃。结果:硝酸咪康唑在0.010 8～1.080 0 mg·ml^-1浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0.999 9）,平均回收率为100.8%（RSD=1.05%,n=9）。结论:该法准确、重复性好、简便,可用于复方咪康唑散中硝酸咪康唑的含量测定。     

抗癌方治疗晚期肝癌的临床疗效评价

目的探索"抗癌方"治疗失去手术、放疗、化疗机会的原发性肝癌晚期的有效性。方法采用非盲法、非随机临床平行入组选取2013年1月至2016年12月江苏省中医院住院肝癌晚期患者,其中试验组入组11例,脱落2例。对照组入组9例。试验组予以"抗肝癌方"浓煎口服,同时抗病毒治疗,可联合一般综合支持治疗,对照组予抗病毒治疗,可联合一般综合支持治疗,连续服药30天为1个疗程,每30天复诊一次。观察时间为6个疗程。观察患者生存时间、生存质量、肝功能、PT、AFP指标。结果试验组生存时间及生存质量优于对照组,差别有统计学意义;试验组凝血功能短于对照组,差别有统计学意义;肝功能及AFP结果两组对比差别无统计学意义。结论抗癌方对肝癌晚期患者生存时间、生存质量、凝血功能有改善的作用。     

CCAAT/增强子结合蛋白α对K562细胞分化和凋亡的影响及其机制

目的:研究CCAAT/增强子结合蛋白α(CCAAT/enhancer-binding protein-alpha,C/EBPα)对K562细胞株分化和凋亡的影响及对相关基因的调控,为慢性粒细胞白血病的治疗提供新的治疗靶点.方法:将C/EBPα表达质粒pEGFP-C/EBPα及空载体对照质粒pEGFP分别经阳离子脂质体2000介导转染K562细胞,用G418筛选出C/EBPα稳定表达细胞株.Wright-Giemsa染色观察细胞形态学变化,FCM分析细胞表面分化抗原CD11b的表达、细胞周期及细胞凋亡,电子显微镜观察细胞凋亡,RT-PCR和Western印迹法检测细胞中相关基因Per 2、cyclin B1和C-myc的表达.结果:筛选得到稳定表达C/EBPα的细胞株pEGFP-C/EBPα-K562.与空载体转染组及对照组细胞相比,转染组K562细胞分化明显,同时粒系细胞表面分化抗原CD11b表达增加;细胞周期分析发现,转染组细胞中G2期细胞增多,与空载体组和对照组相比,差异有统计学意义(P＜0.05),同时出现细胞凋亡峰.细胞凋亡检测结果显示,转染组细胞凋亡明显增加(21.1%),与空载体组(6.0%)和对照组(4.2%)比较,差异有统计学意义(P＜0.05);电子显微镜观察发现,转染组细胞中出现染色质浓集、断裂和核固缩等现象,并见凋亡小体;RT-PCR和Western印迹法检测发现,C/EBPα明显上调Per 2 mRNA和蛋白表达,抑制cyclinB1、C-myc mRNA和蛋白的表达.结论:C/EBPα能促进K562细胞分化,并诱导细胞凋亡,其机制可能是通过对细胞周期相关基因的调控来实现的.     

泛素连接酶β-TrCP降解BCR-ABL 融合蛋白对白血病K562 细胞增殖的抑制*

目的:t（9;22）（q34;q11）突变导致的BCR-ABL融合基因及其编码的融合蛋白在慢性粒细胞白血病（chronic myeloid leukemia,CML ）发病中发挥重要作用。本研究观察可与BCR-ABL融合蛋白N 端寡聚化区域（Oligomerization domain,OD）特异性结合的嵌合泛素连接酶E3 β-TrCP 的β-TrCP-OD-HA 的重组腺病毒载体,经泛素- 蛋白酶体途径降解BCR-ABL融合蛋白对白血病K562 细胞增殖的影响。方法:HEK293 细胞扩增野生型Ad5β-TrCP-OD-HA、突变型Ad5 Δ F-TrCP-OD-HA 及空载Ad5GFP 重组腺病毒载体,感染K562 细胞。以未感染K562细胞作空白对照,流式细胞术检测重组腺病毒载体感染效率,Western blot检测外源性重组蛋白和BCR-ABL融合蛋白的表达,通过细胞增殖曲线、甲基纤维素集落形成试验、细胞周期检测β-TrCP-OD-HA 对K562 细胞增殖的影响。结果:成功建立携β-TrCP-OD-HA 重组腺病毒载体的K562 细胞株,重组腺病毒载体感染效率达66.4% 以上,β-TrCP-OD-HA、Δ F-TrCP-OD-HA 可在K562 细胞中表达。三组重组腺病毒载体感染K562 细胞后,Ad5β-TrCP-OD-HA 组Western blot检测BCR-ABL融合蛋白含量下降;K562 细胞生长和集落形成能力均受抑制;细胞周期显示S 期细胞数下降至10.88%±2.42% 、G0/G1 期升高至85.6%±5.61% ,与Ad5 β-TrCP-OD-HA 组、Ad5GFP 组及对照组相比,差异具有统计学意义（P 均<0.05）。 结论:重组腺病毒介导的β-TrCP-OD-HA、Δ F-TrCP-OD-HA 能够在白血病K562 细胞中表达;β-TrCP-OD-HA 可以抑制K562 细胞的生长增殖,其机制可能与其降解BCR-ABL融合蛋白、阻滞细胞周期而实现。      

首诊为急性缺血性脑卒中患者的骨髓增殖性肿瘤相关基因突变研究

目的 分析首诊为急性缺血性脑卒中(AIS)患者的骨髓增殖性肿瘤(MPN)相关JAK2、MPL和CALR基因突变发生情况.方法 收集378例AIS患者的外周血标本和临床资料.用等位基因特异性PCR和Sanger基因测序法检测患者基因组DNA中JAK2 V617F、JAK2 Exon12、MPL Exon10和CALR Exon9基因突变,并分析突变阳性患者的病史、临床资料、外周血细胞分类计数以及其他辅助检查结果.结果 共检测到5例(1.3％)患者JAK2 V617F突变阳性,1例(0.3％)CALR基因突变阳性,总阳性率为1.6％.其中2例JAK2 V617F突变阳性患者的外周血血红蛋白水平达到MPN的诊断标准.结论 约1.6％的首诊为AIS的患者可检测到JAK2 V617F或CALR突变,这部分患者可能处于MPN的早期阶段.     

非酒精性脂肪肝人群合并胆囊结石病发生危险因素分析

目的分析非酒精性脂肪肝( non?alcoholic fatty liver disease,NAFLD)病人的临床特征,并分析其与胆囊结石病( gall? stone disease,GD)的危险因素。方法回顾分析 2016年 1月至 2017年 1月在南京中医药大学附属医院门诊或住院的 NAFLD病人 405例的基本信息、既往史、实验室检查、瞬时弹性 B超等临床资料,两组间比较用单因素分析,非条件二分类 logistic回归分析筛选 NAFLD合并 GD的危险因素。结果共纳入符合入选标准者 405例,其中 GD病人 85例,非 GD病人 320例,两组病人在女性、丙氨酸氨基转移酶( alanine aminotransferase,ALT)、体质量指数( body mass index,BMI)、糖尿病、肝脏硬度测定值( liver stiffness measurement,LSM)方面差异有统计学意义( P＜0.05)通过多因素分析,得出糖尿病( OR＝2.10,95% CI:1.25~3.52)BMI(OR＝1.09,95% CI:1.02~1.17)及瞬时弹性超声的 LSM＞9.8,kPa(OR＝3.08,95% CI:1.49~6.36)是 NAFLD合并 GD的危险,因素。结论当 NAFLD合并 GD时,女性多见, BMI偏高,患有糖尿病者多, ALT异常多见;合并 GD的 NAFLD病人较单纯 NAFLD病人肝功能受损更明显,肝纤维化程度更严重。糖尿病、高 BMI及瞬时弹性超声的 LSM＞9.8 kPa是 NAFLD合并 GD的危险因素。     

甲状腺功能亢进患者配偶心理健康水平的影响

甲状腺功能亢进(甲亢)是由于各种病因使甲状腺激素分泌过多,从而导致机体出现以代谢亢进为主要特征的疾病。主要表现为高代谢症候群、眼征、精神神经系统、心血管等多脏器功能的改变、交感神经兴奋性显著增高。如情绪易激动、多虑、失眠,甲状腺弥漫     

腹腔镜辅助阴式子宫切除81例

<正>我院从2006年开展腹腔镜手术,5年妇科手术近2 000例,其中腹腔镜辅助阴式子宫切除81例,现回顾分析如下。1资料与方法1.1一般资料子宫肌瘤58例(其中4例伴子宫脱垂,阴道前壁膨出),子宫腺肌瘤15例,难治性功血8例,术前B超检查及妇科双合诊检查提示:宫体未超过妊娠12周大小。1.2方法所有手术均在全麻下进行,取膀胱截石位、头低臀高,阴道举宫,气腹压力维持在15 mm Hg,在脐轮置腹腔镜,取四孔技术(脐孔、麦氏点孔,反麦氏点孔,耻骨联合右上方适当位置再取1孔)。在腹腔镜下,依次电凝切断左侧圆韧带,左卵巢固有韧带(需切除附近者为骨盆漏斗韧带)及阔韧带,对侧同法处     

钟基因Per2对白血病K562细胞增殖、分化、凋亡的影响及其机制研究

目的 研究钟基因Period2(Per2)对慢粒急变K562细胞株增殖、分化、凋亡的影响及可能的分子机制.方法 将Per2表达质粒pcDNA3.1-Per2及空载对照质粒pcDNA3.1分别经阳离子脂质体介导转染K562细胞,用G418筛选出Per2稳定表达细胞株.瑞氏染色观察细胞形态,台盼蓝拒染法和MTT法检测K562细胞增殖,流式细胞仪分析细胞周期和凋亡,电镜观察细胞凋亡,RT-PCR及Western blot方法 检测该细胞株中增殖、凋亡相关基因p53、cyclin B1和c-myc等的表达.结果 筛选到稳定表达Per基因的稳定表达细胞株K562/Per2细胞,与空载体转染组及未处理对照组细胞相比,K562/Per2细胞体积缩小,但是分化不明显;台盼蓝拒染法和MTT实验发现Per2抑制细胞生长与增殖能力;流式细胞仪检测周期结果 K562/Per2细胞中G2期细胞增多[转染组(36.1±5.5)%,空载组(12.5±2.9)%,未处理对照组(9.7±2.3)%,P<0.05],凋亡检测显示转染组细胞凋亡明显增加[14.8%P<0.05];电镜结果 显示染色质浓集、断裂,核固缩和凋亡小体;RT-PCR及Western blot显示Per2明显上调p53基因的mRNA和蛋白表达,而抑制cyelin B1、c-myc基因mR-NA和蛋白的表达.结论 钟基因Per2能抑制K562细胞的生长和增殖,并诱导其发生凋亡,但对分化无明显作用.其机制可能是通过对细胞周期相关基因的调控并阻止细胞周期进程来实现的.