LncRNA LINC00987通过靶向miR-375抑制肺癌细胞的增殖、侵袭和迁移

【摘要】 目的 探讨lncRNA LINC00987对肺癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。 方法 以正常肺泡上皮细胞HPAEPIC为对照,qRT-PCR检测肺癌细胞株A549、HCC827和H1299中LINC00987表达量,选择表达差异较大的A549细胞进行后续实验。将A549细胞分为pcDNA-control组、pcDNA-LINC00987组、LINC00987（WT）+miR-control组、LINC00987（WT）+miR-375组、LINC00987（MUT）+miR-control组、LINC00987（MUT）+miR-375组、si-control组、si-LINC00987组、miR-control组、miR-375组、anti-miR-control组、anti-miR-375组、pcDNA-LINC00987+miR-control组和pcDNA-LINC00987+miR-375组。CCK8法和Transwell实验分别检测细胞增殖、侵袭和迁移能力,双荧光素酶报告系统验证LINC00987和miR-375的调控关系。 结果 与正常肺泡上皮细胞HPAEPIC相比,在肺癌A549、HCC827和H1299细胞中LINC00987表达量均显著降低（P＜0.05）;pcDNA LINC00987组可抑制A549细胞增殖、侵袭和迁移;LINC00987靶向抑制miR-375的表达;miR-375组可促进A549细胞增殖、侵袭和迁移,anti-miR-375组结果反之;pcDNA-LINC00987+miR-375组提高A549细胞增殖、侵袭和迁移。 结论 LncRNA LINC00987靶向miR-375抑制肺癌A549细胞增殖、侵袭和迁移。LINC00987可能是肺癌的潜在分子靶点。     

HPLC法测定云南红豆杉细胞悬浮培养中10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ

目的 测定经寡聚半乳糖醛酸(oligogalacturonic acid,OGA)诱导的云南红豆杉Taxus yunnanensis细胞悬浮培养物中10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ(10-deacetyl baccatin Ⅲ,10-DAB Ⅲ)的量.方法 采用不同质量浓度的OGA处理云南红豆杉悬浮培养细胞,通过RP-HPLC法测定细胞和培养液中的10-DAB Ⅲ的量,甲醇-乙腈-水(2∶3∶8)为流动相,检测波长为232 nm.结果 10-DAB Ⅲ在0.05～2.06 μg与峰面积线性关系良好,回归方程为y=89.146X 27.067(R2=0.999 6),细胞内、外样品平均回收率分别为94.96%、100.72%,RSD分别为0.44%、0.81%.OGA(40 μg/mL)可显著提高云南红豆杉细胞中10-DAB Ⅲ的量.结论 10-DAB Ⅲ的RP-HPLC方法 可靠简便、重现性好、灵敏度高,具有较高的实用价值,可用于对红豆杉细胞诱导培养研究中的分析,OGA是10-DAB Ⅲ细胞生产的有效诱导子.     

蓝萼甲素诱导K562细胞毒作用机制的初步研究

目的:探讨活性氧(reactive oxygen species,ROS)在蓝萼甲素(glaucocalyxin A,GLA)诱导的人慢性粒细胞白血病K562细胞毒性中的作用。方法:GLA(0.313,0.625,1.250,2.500,5.000,10.000 mg.L-1)处理K562细胞12,24,48 h后,噻唑蓝(MTT)法观察细胞毒作用;流式细胞术检测GLA(2.5,5.0,10.0 mg.L-1)对K562细胞周期的阻滞作用;流式细胞术检测5.0 mg.L-1 GLA作用后K562中的ROS变化;利用MTT法检测抗氧化剂氮乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)对GLA诱导下K562细胞毒作用的影响;流式细胞术检测NAC对GLA诱导下K562细胞周期的影响。结果:GLA对K562细胞的生长抑制呈明显的剂量和时间依赖关系,12,24,48 h的IC50分别为6.168,2.968,1.086 mg.L-1;GLA对K562细胞周期的阻滞作用主要发生在G0/G1期;5.0 mg.L-1 GLA作用K562细胞2 h后ROS较空白组上升1.3倍;NAC对GLA细胞毒作用有明显的抑制作用,且随NAC浓度上升,抑制作用增强;NAC能减弱GLA对K562的细胞周期阻滞作用。结论:GLA对K562细胞具有细胞毒及细胞周期阻滞作用,且这些作用与ROS有关。     

消化道手术患者在全麻后置胃管的探讨

目的对全麻下进行的消化道手术并需要置胃管患者,探讨由传统的术前插胃管方法改为麻醉后插胃管的应用效果。方法总结我院63例消化道手术患者在麻醉完成气管插管后再进行胃管置人的临床护理资料。结果63例中,51例均在1～4次内置管成功,12例胃管盘人口中,通过麻醉师利用喉镜并用专麻醉钳夹持胃管末端送人食管。结论对需要全麻下进行消化道手术的患者,可选择在完成气管插管全麻后再进行置胃管术,因为这种方法既可以减少患者在进入手术室之前、患者在神志完全清醒下插胃管给患者心理造成恐惧感和由于插胃管引起的强烈刺激反应或并发鼻咽喉部黏膜所造成的痛苦或损伤等外,同时又可以减少病房护士术前的工作量和工作压力。     

黄花蒿发根的生长及部分代谢成分的特征研究

目的:研究黄花蒿发根的生长形态和部分次生代谢物特征。方法:比较发根和未转化根的形态差异,测定生长调节剂如萘乙酸(NAA)和赤霉素(GA3)对根生长的影响,分析了发根和未转化根的部分次生代谢物的含量特征。结果:低浓度NAA(0.01～0.05 mg.L-1)能明显促进发根侧根和次侧根的形成,对未转化根则无显著作用,高浓度NAA(0.1 mg.L-1)抑制发根的生长,而对未转化根的生长起促进作用。未转化根中不含有青蒿素,而在发根中检测到较高含量的青蒿素(0.64 mg.g-1),未转化根中青蒿乙素含量较高(1.24 mg.g-1)。在未转化根和发根中,青蒿黄酮chrysoplenetin含量相当,而发根中另一种黄酮化合物artemitin含量(0.76 mg.g-1)是未转化根的3.5倍。结论:黄花蒿发根具有较独特的生长和次生代谢特征。     

球囊扩张经皮椎体后凸成形术治疗胸腰椎骨质疏松性骨折

胸腰椎骨质疏松性骨折后疼痛多十分剧烈,传统的保守治疗效果较差且并发症较多,如泌尿系感染、肺部感染及褥疮等。2007年10月～2008年9月,我科采用球囊扩张经皮椎体后凸成形术治疗胸腰椎骨质疏松性骨折患者46例,取得良好疗效,报道如下。     

椎体后凸成形术治疗老年骨质疏松性胸腰椎压缩性骨折

目的探讨经皮穿刺球囊扩张椎体成形术(PKP)治疗老年骨质疏松椎体压缩骨折(VCFs)的初步疗效。方法在C臂X线机监视下经皮穿刺,经椎弓根建立管性通道,将可扩张球囊置入伤椎,高压注入造影剂使球囊扩张,X线确认椎体骨折基本复位,骨水泥注入扩张产生的空腔。结果46例患者术后腰背部疼痛明显缓解或消失,术后均行X线检查,病椎椎体高度恢复满意,后凸畸形矫正15～28°,平均20°,骨折脊柱后凸明显得到矫正,有2例骨水泥渗漏,未发生严重并发症。随访5～18个月,平均6.5个月,未发现强化椎体高度丢失。1例L2椎体骨折PKP治疗后6个月出现T11椎体新鲜骨折。结论应用PKP治疗老年骨质疏松性椎体压缩骨折能明显改善患者疼痛症状,恢复椎体高度,矫正后凸畸形,是一种安全的微创方法。     

药用活性成分的植物酶生物转化研究进展

利用植物酶进行生物转化已成为药用活性成分研究的重要手段。植物酶的多样性、特异性为药用活性成分生物转化提供了可能,其潜力有待进一步开发,并将在医药产业中得到应用。综述了植物酶生物转化的发展概况,介绍了植物转化酶的提取、纯化及固定化方法,重点归纳了植物酶生物转化的类型及活性产物。     

椎间盘源性下腰痛治疗研究进展

腰痛是临床中的常见和多发症状,是较复杂的一组临床综合征。60％-80％的成人均经历过不同程度的腰痛。椎间盘源性下腰痛（discogeniclowbackpain）是指椎间盘内各种病变刺激椎间盘内疼痛感受器所引起的腰痛。近年来,随着对该疾病认识的逐步提高,各种各样的治疗方法应用于临床,其适应证不一,治疗效果也有很大差别,结合近年来国际、国内的资料和笔者的一临床体会就椎间盘源性下腰痛治疗方法的进展作一综述。     

生脉成骨胶囊对激素性股骨头坏死髋周间充质细胞增殖的影响

目的观察生脉成骨胶囊对激素性股骨头缺血性坏死大鼠股骨和髂骨间充质干细胞增殖及成骨细胞矿化结节生成的作用。方法将60只SD雄性大鼠随机分为6组：空白对照组、模型组、生脉成骨预防组、阿仑磷酸钠治疗组、丹郁骨康治疗组、生脉成骨治疗组,通过测定骨髓间充质细胞的增殖能力、成骨细胞矿化结节数,观察生脉成骨胶囊对股骨和髂骨近端成骨能力的影响。结果生脉成骨胶囊组股骨、髂骨骨髓间充质干细胞向成骨细胞转化增殖的水平和股骨、髂骨成骨细胞矿化结节数明显高于模型组,且生脉成骨预防组髂骨上述指标显著高于其他治疗组。结论生脉成骨胶囊能促进股骨、髂骨骨髓间充质细胞向成骨细胞转化增殖及促进矿化结节形成,从而促进激素性股骨头缺血性坏死模型大鼠成骨。