卵巢上皮性癌中p-AKT、PI3K和PTEN蛋白的表达及意义

目的：探讨磷酸化AKT（p-AKT）、3-羧基磷脂酰肌醇激酶（PI3K）与张力蛋白同源的第10染色体丢失的磷酸酶基因（ PTEN）在卵巢上皮性癌中的表达,分析它们之间的关系及其与卵巢上皮性癌患者预后的关系。方法应用免疫组织化学方法,检测10例正常卵巢组织,20例卵巢良性上皮性肿瘤,60例卵巢上皮性癌组织中p-AKT、PI3K和PTEN的表达。结果 P-AKT和PI3K在正常卵巢组织、卵巢良性上皮性肿瘤中的阳性表达显著低于卵巢上皮性癌组织,而PTEN蛋白在卵巢上皮性癌组织中的表达显著低于正常卵巢组织、良性上皮性肿瘤（ P均＜0．01）。P-AKT、PI3K和PTEN表达与临床分期、病理分级、是否存在淋巴结转移及远处转移有关（ P ＜0．01）,与年龄、病理类型及是否伴有腹水无关（ P ＞0．05）。 P-AKT和PI3K在卵巢上皮性癌中的表达呈正相关（ r ＝0．552, P ＜0．01）,P-AKT和PTEN卵巢上皮性癌中的表达呈负相关（ r ＝-0．497, P ＜0．01）,PI3K和PTEN卵巢上皮性癌中的表达呈负相关（ r ＝-0．535, P ＜0．01）。结论 P-AKT、PI3K的过表达伴随PTEN表达缺失参与卵巢上皮性癌的发生发展。     

舒筋汤溻渍联合三步理筋法治疗手部Ⅱ区屈肌腱术后粘连的效果观察

目的：探讨舒筋汤结合三步理筋手法用于手部Ⅱ区屈肌腱修复术后粘连的临床疗效。方法将90例（136指）手部Ⅱ区屈肌腱粘连患者随机分为治疗组（45例70指）和对照组（45例66指）。治疗组予以中药洗剂舒筋汤结合三部理筋手法治疗,对照组予以红外理疗灯照射结合手部术后常规功能锻炼法。通过测量手指总主动活动度（TAM）评定疗效。结果治疗组总有效率97.1%,对照组总有效率87.9%,两组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。结论舒筋汤结合理筋手法对于治疗Ⅱ区屈肌腱术后粘连疗效明显,可极大限度改善手部功能。     

SIRT1增强青光眼小梁网细胞DSBs修复能力及抗细胞衰老的研究

目的 研究Ⅲ类组蛋白去乙酰化酶SIRT1与青光眼小梁网细胞（GTM）DNA双链损伤（DSBs）修复能力及细胞衰老之间的关系。方法 首先通过RT-PCR和Western blot检测正常小梁网细胞（HTM）与GTM之间SIRT1表达的差异;然后将HTM、GTM细胞分别分为4组,白藜芦醇组（0.5 μmol/L Res干预24 h）、SIRT1-ShRNA组（构建成功的SIRT1干扰质粒转染细胞）、microRNA34a组（构建成功的microRNA34a表达质粒转染细胞）以及Control组,通过Western blot检测各组细胞中SIRT1表达水平的差异;SA-β-Gal衰老染色检测连续生长10 h、32 h、3 d、6 d后各组细胞的衰老变化;中性彗星电泳检测经1.33 mol/L H2O2液处理0 h、2 h时各组细胞中DNA双链损伤情况;Western blot检测1.33 mol/L H2O2液处理0 h、1 h、2 h后,各组细胞中γ-H2AX表达的变化情况。结果 HTM及GTM细胞中均存在SIRT1的表达,且HTM中的表达要高于GTM;HTM、GTM细胞各组内比较发现,SIRT1蛋白的表达水平呈Res组＞Control组＞microRNA34a组＞SIRT1-ShRNA组趋势;SA-β-Gal衰老染色则发现在相同时间点,GTM细胞的衰老程度均高于HTM细胞,而在同一类细胞中,SIRT1-ShRNA组细胞最先表现出衰老,且随着时间的延长,其衰老程度也最为严重,Res干预细胞24 h后,能明显延缓细胞衰老。中性彗星电泳检测表明经氧化剂处理后,GTM组双链DNA的损伤情况比HTM组严重,并呈现出SIRT1-ShRNA组>microRNA34a组>Control组>Res组的趋势,γ-H2AX表达量的检测结果与中性彗星电泳的结果一致。结论 SIRT1表达活性的下调可能是诱发青光眼的因素之一;Res能显著增强HTM细胞中SIRT1的表达活性,上调的SIRT1能促进HTM细胞DNA双链损伤修复的能力,维持细胞基因组的稳定性,进而减缓细胞的衰老。     

DNA损伤修复基因XRCC4、RAD51单核苷酸多态性与中国地区食管癌易感相关性研究

目的 探究DNA双链断裂修复基因XRCC4、RAD51单核苷酸多态性与食管癌易感性的关系。 方法 采用以医院为基础的病例-对照研究方法,应用PCR限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)检测包括正常对照61例,食管癌患者123例XRCC4基因启动子区G-1394T(rs6869366)位点,以及RAD51-G135C位点的单核苷酸多态性。通过logistic回归分析计算出比值比(OR)和95%置信区间(95%CI)。 结果 XRCC4 rs6869366位点G等位基因的基因型(GT+GG)的携带者患食管癌的风险显著增加(OR=3.022,95%CI=1.487~6.142,P=0.002)。RAD51基因型GC和CC与携带GG的野生型个体相比,携带RAD51变异基因型(GC和CC)的个体具有更高的患癌风险(OR=3.643,95%CI=1.501~8.842,P<0.05)。 结论 DNA损伤修复系统中的基因多态性很可能与食管癌发生的易感性有关,XRCC4 G-1394T,RAD51-G135 C位点多态性改变均可增加食管癌的发病风险。     

先天性甲状腺功能减退症患儿DUOX2基因突变的研究

目的 研究先天性甲状腺功能减退症(congenital hypothyroidism, CH)患儿DUOX2 基因突变类型和特点,并初步探讨基因型- 表现型的关系,为CH 患儿的基因诊断和基因治疗提供理论依据.方法 从10例CH 伴甲状腺肿大患儿外周血白细胞中提取基因组DNA,采用PCR 扩增和直接测序的方法对DUOX2 全部外显子进行基因突变检测.结果 在1 例患儿中发现DUOX2 基因第28 外显子cDNA 的3632 位点发生了G>A 的突变(c.G3632A),导致第1 211 密码子的精氨酸变为组氨酸(p.R1211H).在3 例患儿中发现DUOX2 基因第17 外显子cDNA 的2 033 位点发生了T>C 的突变(c.T2033C),导致第678 密码子的组氨酸变为精氨酸(p.H678R).此两种突变均为杂合型的错义突变.结论 CH 患儿存在DUOX2 基因杂合突变,该杂合突变可能引起蛋白质功能的改变从而导致CH;基因型与表现型的关系尚不明确,需要进一步的研究.     

应用显微外科技术治疗肘管综合征22例分析

目的应用显微外科技术行尺神经松解治疗肘管综合征的疗效分析。方法镜下神经松解解除神经内外瘢痕对神经的压迫,并保护神经束间交通支及营养血管,恢复神经传导功能。结果本组22例,优14例,良6例,差2例。优良率90.9%。结论应用显微外科技术无损伤操作使尺神经松解彻底而适度,疗效确切,是治疗肘管综合征的行之有效的方法。     

利多卡因联合山莨菪碱治疗椎动脉型颈椎病的疗效观察

目的:观察利多卡因联合山莨菪碱治疗椎动脉型颈椎病的临床疗效。方法:将158例椎动脉型颈椎病患者随机分为2组。实验组73例,采用颈椎牵引、理疗、利多卡因联合山莨菪碱静脉滴注治疗;对照组85例,采用颈椎牵引、理疗、复方丹参静脉滴注治疗。结果:158例患者均获随访,随访时间3～7个月,平均4.1个月。实验组疗效优于对照组,差异有统计学意义(Z=3.087,P=0.002)。结论:在颈椎牵引、理疗的基础上,应用利多卡因联合山莨菪碱静脉滴注治疗椎动脉型颈椎病疗效确切,值得临床推广。     

细胞外超氧化物歧化酶DNA 甲基化对动脉粥样硬化的诱导作用及作用靶点

目的 探讨细胞外超氧化物歧化酶DNA（EC-DNA）甲基化水平改变在动脉粥样硬化发病中的 作用。方法 16 只ApoE-/- 小鼠（ApoE-/- 组）给予高脂饲料喂养，16 只C57BL/6 小鼠（WT 组）给予不含 任何高脂成分的普通饲料喂养，分别于喂养第8、12、16 和20 周检测小鼠血脂、主动脉组织形态及丙二醛 （MDA）、活性氧（ROS）含量，采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测主动脉组织细胞外超氧化物歧 化酶（EC-SOD）、DNMT1 mRNA 水平，巢式甲基化特异性聚合酶链反应检测主动脉组织EC-SOD DNA 甲基化程度。将THP-1 诱导为巨噬细胞，分为3 组：空白对照组（NC 组）、空白质粒组（pEGFP-N1 组） 和重组质粒组（pEGFP-N1-DNMT1 组），NC 组用不做任何处理，继续培养，pEGFP-N1 组加入10μl 脂质 体Lipofectamine 和20μg 空质粒载体pEGFP-N1，pEGFP-N1-DNMT1 组加入10μl 脂质体Lipofectamine 和 20μg pEGFP-N1-DNMT1 重组质粒载体，培养24 h 后检测细胞EC-SOD、DNMT1 蛋白表达和EC-SOD DNA 甲基化程度。结果 第8、12、16 和20 周，ApoE-/- 组TC、LDL、TG 呈升高趋势，HDL 无明显变化； 各时段ApoE-/- 组TC、LDL、TG、HDL 与WT 组比较，差异有统计学意义（P <0.05），TC、LDL、TG 高于 WT 组，HDL 低于WT 组。第16 和20 周，WT 组动脉组织内皮细胞结构规则有序，ApoE-/- 组主动脉内膜明 显增厚并伴炎症浸润。第8、12、16 及20 周，ApoE-/- 组MDA、ROS 呈升高趋势，各时段ApoE-/- 组MDA、 ROS 高于WT 组。ApoE-/- 组EC-SOD mRNA 表达水平、DNMT1 mRNA 表达水平和EC-SOD 甲基化水 平与WT 组比较，差异有统计学意义（P <0.05），EC-SOD mRNA 表达水平低于WT 组，DNMT1 mRNA 表 达水平和EC-SOD 甲基化水平高于WT 组。pEGFP-N1-DNMT1 组DNMT1 蛋白表达、EC-SOD 甲基化 水平及EC-SOD 蛋白表达水平与pEGFP-N1 组和NC 组比较，差异有统计学意义（P <0.05），pEGFP-N1- DNMT1 组DNMT1 蛋白表达、EC-SOD 甲基化水平高于pEGFP-N1 组和NC 组，EC-SOD 蛋白表达水平 低于pEGFP-N1 组和NC 组，pEGFP-N1 组和NC 组EC-SOD、DNMT1 蛋白及EC-SOD 甲基化水平比较 差异无统计学意义（P >0.05）。结论 EC-SOD 甲基化程度升高，导致EC-SOD 表达降低，机体抵抗氧化应 激反应能力减弱，最终发展成动脉粥样硬化。     

计划生育手术致子宫穿孔临床诊治与预防探讨

目的:探讨计划生育手术导致子宫穿孔的临床诊治和预防措施。方法:系统性回顾5例计划生育手术致子宫穿孔患者的临床资料。结果:2例因人工流产吸刮术导致,1例因宫内放置节育器导致慢性穿孔,1例在放置宫内节育器时引起,1例为术前取环时探查子宫的深度及环位时、探针引起穿孔。均采用保守治疗,患者痊愈出院。结论:计划生育手术中多项因素可致子宫穿孔,应对此并发症引起重视,提高责任心,规范操作,以减少子宫穿孔的发生。     

比较直肠癌不同手术方式的临床疗效

目的比较直肠癌不同手术方式的治疗效果,讨论不同手术方式的优缺点。方法随机将65例直肠癌患者分成实验组(33例)和对照组(32例)。对照组患者进行传统的Miles术,实验组患者进行保肛手术,观察2组患者的治疗效果。结果实验组患者的术后出血量、住院时间、并发症的发生率、导尿管放置时间均优于对照组,随访后发现实验组患者的复发率低于对照组,且组患者生活质量较对照组高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论选择恰当的手术方式能够有效减少并发症,提高患者的治愈率。保肛手术,术后恢复时间短,患者生活质量高。