Th1/Th2细胞因子在小鼠真菌性角膜炎中的表达

目的 通过检测Th1/Th2细胞因子在小鼠真菌性角膜炎中的表达水平,探讨机体免疫在该病发展中的作用. 方法应用角膜表层镜法建立Balb/c小鼠茄病镰刀菌性角膜炎模型,在感染后第1、3、5、7天,裂隙灯显微镜观察角膜炎特点;HE染色观察角膜病理变化;半定量RT-PCR和ELISA检测角膜中Thl细胞因子(IFN-γL-12)及Th2细胞因子(IL-4、IL-10)基因mRNA和蛋白的表达,半定量RT-PCR检测T-bet基因mRNA的表达;直线相关分析检测T-bet mRNA与IFN-比值的相关性. 结果角膜接种菌液后,早期角膜浸润混浊进行性加重,第5天后新生血管大量生长;HE染色可见第1、3天在角膜缘、角膜基质及前房中有大量的炎症细胞浸润,第5天后炎症细胞减少,角膜基质中纤维细胞逐渐增多;RT-PCR与ELISA检测结果表明,Thl细胞因子(IFN-γL-12)和Th2细胞因子(IL-4、IL-10)基因mRNA及蛋白在角膜接种菌液后均出现表达,且IFN-γL-12的表达显著强于IL-4、IL-10;IFN-γ/IL-4比值在第3天达最高值,而后逐渐降低;T-bet mRNA在第3天达最高值;T-bet mRNA的表达与IFN-γ/IL-4比值呈正相关(P＜0.05). 结论在真菌性角膜炎中,Thl/Th2型免疫应答共同参与调节机体的抗真菌免疫,但以Th1型应答为主;角膜感染真菌后第3天机体的免疫力达最强.     

黄芪多糖促进人树突状细胞体外分化成熟的实验研究

目的：研究黄芪多糖（APS）对人树突状细胞（DCs）体外分化成熟及存活时间的影响。方法：健康志愿者外周血单个核细胞培养2 h获得贴壁的单核细胞,加入含rhGM-CSF（1000 U/mL）r、hIL-4（500 U/mL）的无血清培养基,实验组再加入3种浓度的APS（1μg/mL,10μg/mL,100μg/mL）,对照组加入等体积生理盐水,一组细胞体外培养7 d,收集悬浮细胞获得普通DCs（Mo-DCs）及APS诱导的DCs（APS-DCs）,流式细胞仪测定细胞免疫表型,同种异体混和淋巴细胞反应检测DCs的免疫激活功能,另外一组细胞体外连续培养14 d,光镜下观察细胞形态及存活时间。结果：APS能够显著促进DCs表面免疫分子HLA-DR、CD83、CD80、CD86、CD40、CD54的表达,APS-DCs较Mo-DCs具有更强的T细胞体外激活能力,并显著延长DCs的体外存活时间达2～3 d。结论：APS可以促进DCs的成熟和延长DCs的存活时间,从而发挥增强机体免疫力的功能。     

胡守友教授辨治淋巴瘤思想管窥

胡守友教授认为淋巴瘤的病因分内因和外因,内因多为情志不遂及脾肾亏虚,外因多为外感邪毒,治疗当先审其病因,分别予调畅情志、培补脾肾,并谨防邪毒致病,同时辨证论治,必要时对症处理,并注重中西医结合治疗。     

GM-CSF基因修饰瘤苗腹腔内免疫后对腹腔抗原提呈细胞和功能的影响

机体产生抗肿瘤免疫反应首先需要由抗原提呈细菌 (APCs)摄取、加工肿瘤抗原!并将之提呈给T淋巴细胞,促进 APC的功能将有利于机体免疫系统对肿瘤的识别和清除. GM-CSF可以增强巨噬细胞和树突状细胞(DCs)的抗原提呈 功能,延长它们的体外存活时间,并可在体内、体外诱导DC 的大量扩增,我们以腹水型FBL3白血病细胞制备成GM-CSF     

系统性红斑狼疮患者眼表损害及相关抗体检测

目的　探讨系统性红斑狼疮 (systemiclupuserythemaitosus ,SLE)活动期与干燥性角结膜炎 (keratoconjunctivitiessicca ,KCS)、继发性干燥综合征及相关抗体的相关性。方法　对 90例SLE患者和 10 0例正常对照组的眼表检查及抗体检测资料进行分析。结果　眼表损害在所研究的SLE患者中的发生率为 2 5 6% ( 2 3 /90 ) ,正常对照组为 3 0 % ( 3 /10 0 ) ;且活动期发生率 3 4% ( 17/5 0 )明显高于非活动期的 15 % ( 6/4 0 ) ,P <0 0 5。抗dsDNA抗体、抗SSA抗体及抗SSB抗体在SLE患者的阳性率为 5 7 8% ( 5 1/90 )、 43 3 % ( 3 9/90 )及 2 8 9% ( 2 6/90 ) ,而正常对照组均阴性 ;且SLE患者活动期阳性率均明显高于非活动期患者 ,分别为 74% ( 3 7/5 0 )VS3 7 5 % ( 15 /4 0 ) ,P <0 0 1;5 6% ( 2 8/5 0 )VS2 7 5 % ( 11/4 0 ) ,P <0 0 1;以及 3 8% ( 19/5 0 )VS17 5 % ( 7/4 0 ) ,P <0 0 5。 2 3例SLE合并干燥性结角膜炎的患者抗SSA、SSB抗体阳性率分别为 10 0 0 % ( 2 3 /2 3 )和 91 3 % ( 2 1/2 3 )。 11例SLE继发性干燥综合征的患者抗SSA、SSB抗体阳性率分别为 10 0 0 % ( 11/11)和 90 9%( 10 /11)。结论　SLE活动期患者KCS发病率及抗dsDNA、SSA、SSB抗体阳性率明显高于SLE非活动期患者。抗SSA、SS     

糖尿病性角膜神经病变的研究进展

糖尿病性角膜神经病变是一种潜在的致盲性病变,观察角膜神经超微结构变化,探讨其发病机制,以及探索其有效的预防治疗措施是非常重要的。本文就糖尿病角膜神经细胞病理形态变化,及其病变机制的研究进展作一综述。     

人外周血树突状细胞体外稳定、高效培养的新方法

目的:建立稳定、高效的人外周血树突状细胞(dendritic cells,DC)体外培养的新方法。方法:离心获取人外周血白膜层细胞,裂解去除红细胞后获得全部白细胞,贴壁培养1 h获得单核细胞,加入重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)1 000 U/ml 重组人白细胞介素-4(rhIL-4)500 U/ml,体外培养7 d获得DC,以流式细胞术分析表型,体外混合淋巴细胞反应检测细胞抗原提呈功能。结果:从100 ml全血分离获得具有较好活力的贴壁单核细胞仅需2 h;部分肿瘤患者应用传统分离方法不能获得单个核细胞,用新方法仍能从患者外周血稳定地获得足够数量的单核细胞。新方法培养生成DC的数量为传统方法培养生成DC数量的1.8~2.6倍;其中40%~85%为CD1a ,表达高水平的HLA-DR、CD80、CD86,体外可以强烈刺激同种T细胞增殖。结论:建立了更为稳定的、得率更高的DC体外扩增培养的新方法。     

脾内途径的GM-CSF基因疗法对化疗后机体免疫功能恢复的影响

研究不同热休克条件对H22小鼠肝癌细胞的HSP70mRNA及蛋白表达的影响,以期获得最佳诱导条件.分别用MTT、RT-PCR、免疫荧光和FCM检测等方法观察不同热休克条件对鼠H22细胞的生存率、胞内HSP70mRNA转录水平及胞膜HSP70蛋白表达水平的改变.结果表明,H22细胞经轻度热休克(42～43℃),细胞生存率无影响,而中重度热休克(44～45℃)则随休克时间的延长,细胞生存率明显下降;42℃热休克初期(0.5～4小时)胞内HSP70mRNA水平低于对照组,休克后期(8～12小时)mRNA水平有所恢复并逐渐增高;不同时间热休克组H22细胞胞膜HSP70表达均较对照组显著增高(P相似文献