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目的 :测定人喉鳞状上皮癌 hep- 2细胞的端粒酶活性水平并获得 hep- 2细胞中 h TERT c DNA片段的克隆。方法 :采用 TRAP- ELISA法测定酶活性水平 ,RT- PCR技术扩增获得目的片段。利用酶切法、PCR法和序列分析法对所获克隆进行检测。结果 :hep- 2细胞具有较高的端粒酶活性水平 ,获得含h TERT c DNA片段的克隆。结论 :利用 RT- PCR法能够从具有较高端粒酶活性水平的 hep- 2细胞中扩增获得 h TERT c DNA片段 相似文献
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目的:探讨缺氧反应元件(HRE)增强hTERT启动子-tk/GCV逆转录病毒基因系统对缺氧环境肿瘤细胞的体外杀伤作用。 方法:构建由HRE缺氧反应元件修饰的hTERT杂合启动子和hTERT单一启动子引导单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-tk)基因表达的重组逆转录病毒载体,在脂质体介导下分别转染PA317包装细胞,G418筛选,直至出现抗性克隆。将重组病毒感染人肺癌细胞SPC-A1和人肝癌细胞Bel-7402,G418筛选出抗性克隆肿瘤细胞。实验分为对照组、SPC-A1/tk组和Bel-7402/tk组。在缺氧处理条件下,MTT法检测前体药物丙氧鸟苷(GCV)对SPC-A1/tk和Bel-7402/tk细胞的杀伤效应,流式细胞仪检测其细胞凋亡率和细胞周期的变化。 结果:与对照组比较,缺氧环境培养的SPC-A1/tk和Bel-7402/tk细胞对GCV的敏感性明显增强,其中细胞凋亡率明显升高(P<0.001),细胞周期各期细胞数有所减少(P<0.05)。与hTERT启动子引导的tk基因系统组细胞比较,[HRE]hTERT杂合启动子引导的tk基因系统组肿瘤细胞存活率更低(P<0.01),诱导肿瘤细胞凋亡率明显升高(P<0.01),G1期和G0期细胞数有所增高(P<0.05),S期细胞数减少(P<0.05)。结论:HRE能增强hTERT启动子-tk/GCV自杀基因系统对缺氧环境中肿瘤细胞的体外杀伤作用。 相似文献
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现阶段使用的化疗药物(抗癌药物)多为细胞毒性,对肿瘤组织杀伤的同时对正常组织也有抑制作用,护士在接触抗癌药物时,如不注意防护,对正常人体易产生伤害。我国62.87%的医护人员在配置化疗药物时没有任何防护设备。因此,正确使用化疗药物,加强自身防护是至关重要的。 相似文献
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正确使用化疗药物加强自身防护 总被引:1,自引:0,他引:1
现阶段使用的化疗药物(抗癌药物)多为细胞毒性,对肿瘤组织杀伤的同时对正常组织也有抑制作用,护士在接触抗癌药物时,如不注意防护,对正常人体易产生伤害.我国62.87%的医护人员在配置化疗药物时没有任何防护设备.因此,正确使用化疗药物,加强自身防护是至关重要的. 相似文献
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人喉癌细胞端粒酶催化亚基cDNA片段的扩增与克隆 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:测定人喉鳞状上皮癌hep-2细胞的端粒酶活性水平并获得hep-2细胞中hTERTcDNA片段的克隆,方法:采用TRAP-ELISAS法测定酶活性水平,RT-PCR技术扩增获得目的片段,利用酶切法、PCR法和序列分析法对所获克隆进行检测。结果:hep-2细胞具有较高的端粒酶活性水平,获得含hTERTcDNA片段的克隆。结论:利用RT-PCR法能够从具有较高端业酶活性水平的hep-2细胞中扩增获得hTERTcDNA片段。 相似文献
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目的探讨黄曲霉毒素B1(AFB1)肝毒性修复进程中细胞自噬的作用。方法以经50μmol/L AFB1预处理24 h的永生化人正常肝L02细胞建立模型,检测AFB1处理撤除不同时间点的细胞DNA双链损伤指标γH2AX蛋白和自噬标志物LC3-Ⅱ蛋白的表达水平;采用免疫荧光法检测AFB1撤除后细胞中γH2AX蛋白荧光焦点和自噬体形成情况;在AFB1撤除后联合应用自噬抑制剂3-MA进行干预实验,检测细胞内γH2AX蛋白的表达水平。结果L02细胞中γH2AX蛋白的动态表达在AFB1处理撤除12 h后达到最高,并在24 h后逐渐降低;自噬蛋白LC3-Ⅱ和自噬体的形成在AFB1处理撤除后逐渐增强;3-MA可明显减缓AFB1撤处理后细胞内γH2AX蛋白的降低进程。结论细胞自噬参与了AFB1诱导肝细胞毒性损伤的修复进程,与促进DNA损伤的修复有关。 相似文献