农药百菌清和氯氰菊酯对蚕豆根尖细胞遗传损伤的研究

背景与目的： 研究不同浓度农药百菌清、氯氰菊酯对蚕豆根尖细胞的遗传损伤。 材料与方法： 分别用不同浓度的农药百菌清(5×10－10～5×10－4 g/L的7种浓度)、氯氰菊酯(5×10－10～5×10－4 g/L的7种浓度)处理蚕豆根后,测定蚕豆根尖细胞的微核率、有丝分裂指数和染色体畸变率。 结果： 百菌清、氯氰菊酯均能诱发较高的微核率,百菌清在5×10－10～5×10－6 g/L浓度范围内和氯氰菊酯在5×10－10～5×10－8 g/L浓度范围内,均随百菌清、氯氰菊酯处理浓度的升高而致使蚕豆根尖细胞的微核率增加(P<0.05),但高于一定浓度(在百菌清为5×10－6 g/L,在氯氰菊酯为5×10－8 g/L)后微核率反而呈下降趋势;不同浓度的百菌清和氯菊酯农药均可使蚕豆根尖细胞有丝分裂指数增大(P<0.05或P<0.01);并能诱导蚕豆根尖细胞产生较高频率的染色体畸变,且为多种类型的染色体畸变。 结论： 农药百菌清、氯氰菊酯对蚕豆根尖细胞具有明显的遗传损伤。     

A型肉毒毒素注射治疗慢性紧张型头痛的临床对照研究

目的 对A型肉毒毒素注射治疗慢性紧张型头痛的疗效及安全性进行临床观察和研究.方法 纳入慢性紧张型头痛病人共50例,分为A型肉毒毒素注射治疗组和传统药物治疗对照组,每组各25例,对两组疗效进行比较研究,并对A型肉毒毒素注射治疗的安全性进行观察.结果 肉毒毒素注射治疗组较传统药物治疗对照组在治疗后1、2及3个月各项指标(头痛发作天数、发作时头痛严重程度、头痛发作持续时间、需临时口服止痛药的天数)的改善均更加显著(P<0.05).肉毒毒素注射治疗组约72%的病例感颈部乏力,约在1周~1月内消失,无其他明显不良反应.结论 A型肉毒毒素注射治疗慢性紧张型头痛方法简便、起效快、效果显著、副反应小、药效维持时间长.     

经皮穴位电刺激联合帕洛诺司琼对腹腔镜非胃肠手术患者术后早期恢复质量的影响

目的 探讨经皮穴位电刺激（TEAS）联合帕洛诺司琼对腹腔镜非胃肠手术患者术后恶心呕吐和早期恢复质量的影响。

方法 选择择期全麻下行腹腔镜非胃肠手术患者648例,男28例,女620例,年龄18～50岁,BMI 15～40 kg/m²,ASA Ⅰ—Ⅲ级。采用随机数字表法将患者分为两组：TEAS组（T组,n=330）和对照组（C组,n=318）。两组患者均在麻醉诱导时预防性使用地塞米松和帕洛诺司琼,T组于麻醉苏醒后和术后第1天上午TEAS双侧内关穴和足三里穴,持续30 min;C组穴位选择同T组,患者连接电针刺激仪,但不给予通电刺激。记录术后24 h内恶心呕吐发生情况、40项恢复质量评分（QoR-40）、止吐补救和术后并发症发生情况。

结果 与C组比较,T组术后24 h内恶心、持续恶心、呕吐和呕吐累积发生率、恶心和呕吐最高VAS评分、止吐补救率和术后并发症发生率均明显降低（P＜0.05）,QoR-40总评分、身体舒适、情绪状态、心理支持、身体独立和疼痛评分均明显升高（P＜0.05）。

结论 术后TEAS双侧内关穴和足三里穴联合帕洛诺司琼可降低腹腔镜非胃肠手术患者PONV和术后并发症发生率,提高术后早期恢复质量。     

miR-146a-5p靶向肿瘤坏死因子受体相关因子6抑制缺血性脑卒中神经元凋亡和自噬

目的探究miR-146a-5p靶向肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)对缺血性脑卒中神经元凋亡和自噬的影响。方法将mimic-NC质粒、miR-146a-5p mimic质粒、pc-TRAF6质粒、miR-146a-5p mimic质粒联合pc-TRAF6质粒分别转染N2a细胞,然后构建氧、葡萄糖剥夺(OGD) 1 h/再灌注(R) 24 h模型进行体外实验观察。另取雄性C57BL/6小鼠90只,分为6组(n=15),将上述不同的质粒分别注射至小鼠右脑室,制作大脑中动脉闭塞(MCAO)模型进行体内实验观察。采用qRT-PCR方法检测miR-146a-5p和TRAF6表达,苏木精-伊红染色观察脑组织损伤情况,并进行神经功能评分,流式细胞术检测N2a细胞凋亡,TUNEL检测海马神经元凋亡,蛋白免疫印迹法检测TRAF6、Bax、Bcl-2、cleaved caspase-3、Beclin1、Atg7和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达。结果①OGD/R和MCAO后miR-146a-5p低表达,而TRAF6高表达,且miR-146a-5p靶向负调控TRAF6;②miR-146a-5p过表达后,MCAO致中脑损伤显著减轻、神经功能改善(P 0. 01);③miR-146a-5p过表达后,可明显降低OGD/R和MCAO神经元凋亡率,下调cleaved caspase-3、Bax、Beclin1、Atg7和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达,上调Bcl-2蛋白表达(P 0. 01)。结论 miR-146a-5p过表达通过靶向负调控TRAF6抑制缺血性脑卒中神经元凋亡和自噬。     

锁骨下动脉闭塞血管内开通评估量表初步应用研究

目的研究锁骨下动脉闭塞血管内开通评估量表(Accept量表)在临床上的应用价值。方法将本院经全脑血管造影确诊的锁骨下动脉闭塞患者59例,基于Accept量表分为Ⅰ级患者、Ⅱ级患者和Ⅲ级患者。比较各组患者手术成功率和手术不良事件发生率。结果本研究中手术成功43例(72.9%)。根据Accept量表评分,所有患者分为三组:Ⅰ级17例,Ⅱ级30例,Ⅲ级12例。Ⅰ级患者手术成功率(100%)明显高于Ⅱ级患者(76.7%)和Ⅲ级患者(25%),且Ⅱ级患者手术成功率亦明显高于Ⅲ级患者(均P0.05)。Ⅰ级患者中15例顺向开通,2例双向开通;Ⅱ级患者中5例顺向开通,18例双向开通;Ⅲ级患者3例双向开通。59例患者总共发生15次(25.4%)手术不良事件;其中Ⅰ级患者不良事件发生率为5.9%;Ⅱ级患者不良事件发生率为23.3%;Ⅲ级患者手术不良事件发生率为58.3%,显著高于Ⅰ级患者(P0.05)。结论应用Accept量表评估锁骨下动脉闭塞血管内开通术证明具有可行性和可靠性,有助于临床医师快速做出临床决策,具有一定的临床应用价值。     

大鼠海马HIF-1&agr;和EPO在衰老过程中的表达

目的:探讨大鼠海马组织中低氧诱导因子-1&agr;（HIF-1&agr;)和促红细胞生长素（EPO)在衰老过程中的表达规律及二者在神经系统衰老过程中的作用。方法:应用尼氏染色和免疫组织化学技术观察不同月龄组（3,18,24,30月)大鼠海马CA1区神经细胞尼氏体及HIF-1&agr;和EPO的表达情况。结果:随大鼠月龄的增大,海马CA1区神经细胞体积变大,排列稀疏,胞浆内尼氏体减少。随月龄增加海马CA1区HIF-1&agr;阳性细胞数增加,差异有统计学意义（P<0.05);大鼠海马CA1区EPO表达随月龄增加呈抛物线变化,由3月龄到18月龄,阳性细胞个数的增加有统计学意义（P<0.05),由18月龄到30月龄,阳性细胞个数减少有统计学意义（P<0.05)。结论: HIF-1&agr;与EPO在大鼠海马的表达在中年期之前,呈平行递增变化,在中年期之后,二者呈分离变化,提示HIF-1&agr;活性下降和蛋白质合成功能的减退是衰老过程中EPO表达减少的主要原因,通过加强内源性HIF-1&agr;的活性和补充外源性EPO有可能减缓神经系统的衰老。     

卵巢癌细胞株来源的外来体的抗原性初步研究

外来体（Exosomes）是一种直径30～90nm的膜性囊泡，最初在网织红细胞中被观察到并命名，后来发现多数细胞可分泌此囊泡，如血小板、B淋巴细胞、细胞毒性T淋巴细胞、树突状细胞（DC）、肥大细胞和一些肿瘤细胞。本研究培养了5种卵巢癌细胞系，试图从培养上清液中分离出外来体，经过免疫电镜和Western blot鉴定其是否携带有肿瘤细胞的特异性抗原，为外来体用于卵巢癌主动免疫治疗提供理论基础。     

p38MAPK在Aβ_(25-35)诱导AD大鼠海马CA1区表达的研究

目的 探讨p38MAPK在AD大鼠发病中的变化及其可能机制.方法 采用Aβ25-35单次侧脑室注射诱导AD大鼠模型,Y迷宫实验测定大鼠行为学变化,免疫组化法检测建模后4、7和14 d时痴呆组、生理盐水组、抑制剂组和抑制剂对照组大鼠海马CA1区磷酸化p38MAPK的表达.结果 Aβ注射7、14 d后,痴呆组的大鼠达到学习标准的训练次数(N)、错误次数(EN)和全天总反应时间(TRT)较生理盐水组均明显增加(P<0.05);抑制剂组N,EN,TRT均比痴呆组明显减低(P<0.05).免疫组化结果:痴呆组Aβ注射4 d起,海马CA1区磷酸化p38MAPK表达即增高(P<0.01),且随着观察时点的延长,这种表达进一步增高(P<0.01);抑制剂组p38MAPK的表达比痴呆组明显减低(P<0.01).结论 大鼠侧脑室注射Aβ 7d可成功诱导AD大鼠模型;p38MAPK的激活贯穿Aβ诱导AD大鼠模型的全过程;SB203580可抑制p38MAPK的表达,改善痴呆大鼠的学习记忆能力.     

K562细胞分泌的exosome的免疫电镜研究

目的:通过免疫电镜方法观察K562细胞分泌的exosome,探讨其潜在的临床应用价值. 方法:采用离心超滤和蔗糖密度梯度离心等方法分离出K562细胞释放的exosome,经透射电镜观察其超微结构. 采用固相免疫电镜法(SPIEM)制备exosome的HSP70,ICAM-1及ABL免疫电镜标本. 结果:K562细胞分泌的exosome为直径50～100 nm的膜性微囊结构,圆形或椭圆形,腔内为低电子密度成分. 经抗HSP70,ICAM-1和ABL抗体-胶体金免疫电镜标记,囊外膜及腔内可见点状﹑颗粒状电子致密物沉积. 结论:离心超滤和蔗糖密度梯度离心法纯化小量exosome方法可行,K562细胞分泌的exosome表达HSP70,ICAM-1和ABL蛋白,具备免疫原性.