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目的探讨人源磷脂酶Cε(PLCε)特异性短发夹RNA(shRNA)对人膀胱癌增殖、凋亡、侵袭、转移能力的影响。方法用携带PLCεshRNA基因的真核表达质粒pGenesil-PLCε转染BIU-87细胞,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法检测各组细胞PLCεmRNA和蛋白的变化。分别用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)、流式细胞术和免疫组化检测BIU-87细胞及裸鼠移植瘤增殖情况和细胞周期的变化;采用RT-PCR检测各组细胞Bcl-2、Bax mRNA的变化;采用Transwell小室体外侵袭法及明胶酶谱分析细胞的侵袭能力。结果转染pGenesil-PLCε质粒的细胞可明显抑制PLCε基因和蛋白表达水平(P<0.05);MTT、流式细胞术与免疫组化检测结果表明转染pGenesil-PLCε质粒的细胞生长明显受抑制(P<0.05),且细胞周期阻滞于G0/G1期;转染pGenesil-PLCε质粒的细胞Bcl-2/Bax mRNA明显降低(P<0.05);明胶酶谱及侵袭实验显示转染pGenesil-PLCε质粒的细胞侵袭、转移能力明显下降(P<0.05)。结论特异性shRNA干扰PLCε基因可抑制... 相似文献
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泽泻鲨烯合酶(Ao SS)催化法呢基焦磷酸[(farnesyl diphosphate,FPP)]合成鲨烯,是碳源流向原萜烷型三萜生物合成的关键调节酶。为深入研究Ao SS基因的功能及表达,课题组将前期克隆获得的建泽泻鲨烯合酶基因(accession No.JX866770)的开放阅读框(ORF)构建到原核表达载体p Czn1上,并在大肠杆菌BL21(Roseta)中进行诱导表达,诱导表达出的融合蛋白主要以包涵体的形式存在,经纯化获得高纯度的目的蛋白;以此目的蛋白进行体外酶促反应验证其功能,其结果显示该目的蛋白具有催化法呢基焦磷酸生成鲨烯的活性;为进一步研究其表达规律,在此基础上,利用该蛋白免疫新西兰兔制备多克隆抗体并纯化,ELISA检测抗体效价大于1∶51 200,Western blotting检测表明其具有较好的特异性;用制备得到的抗体免疫检测建泽泻Ao SS在不同组织中的表达情况,结果显示建泽泻块茎中Ao SS表达最高,其次为叶,根中表达甚微。原核表达载体的成功构建、基因功能的进一步验证及快速免疫检测方法的建立,为进一步开展Ao SS基因功能及其调控的研究奠定基础,为泽泻资源性成分原萜烷型三萜的合成生物学应用提供科学依据。 相似文献
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背景与目的:放疗为食管癌重要的治疗方式之一,但疗效并不理想。目前认为肿瘤在PET-CT上高摄取的区域可能与放射抵抗有关。本文通过观察放疗前和放疗中两次PET-CT所显示的食管原发病灶18F-FDG高摄取区域的空间位置关系,从而推测依据放疗前的PET图像上所显示的食管癌原发灶高18F-FDG摄取的信息进行区域选择性加量放疗的可行性。方法:入组2011—2013年在复旦大学附属肿瘤医院放疗科接受同步放化疗治疗的初治食管鳞癌患者。所有患者在放疗前和放疗40 Gy时(第2次同步化疗前)分别行18F-FDG PET-CT扫描。在第1次PET图像上原发灶勾画首先以标准摄取值(standard uptake value,SUV)=2.5、5和40%~70%SUVmax-pre为阈值在PET图像上自动勾画得到大体肿瘤体积(gross tumor volume,GTV)2.5pre、GTV5pre、GTV40%pre、GTV50%pre、GTV60%pre和GTV70%pre。在第2次PET图像上,以SUV=2.5和70%~90%SUVmax-dur为阈值勾画得到GTV2.5dur、GTV70%dur、GTV80%dur和GTV90%dur。计算两次PET图像上以阈值自动勾画的区域的空间交集分数(overlap fraction,OF),即两个感兴趣区(region of interest,ROI)的交集的体积与两个ROI相对较小的体积的比值。结果:共入组22例患者。所有患者的原发灶SUVmax、SUVmean均有显著下降(P=0.003和P<0.0001)。残留高摄取区域与治疗前GTV50%pre的OF达到70%以上,其中热点区域GTV90%dur完全处于原发灶的高摄取区域内,OF达到100%。以不同阈值勾画的体积有很大差异,而放疗前和放疗中的食管癌原发灶高代谢区域尽管体积变化很大,但空间位置保持相对的稳定。结论:放疗中食管鳞癌原发灶的SUV显著下降,但食管癌原发灶残留的18F-FDG高摄取区域仍然较稳定的落在治疗前原发灶GTV及治疗前PET上所显示的18F-FDG高摄取区域内,提示依据治疗前PET图像来选择性对食管癌原发病灶的部分区域进行局部加量放疗是可行的。 相似文献
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目的:探讨CEA,CA125,CA199三种肿瘤标志物对卵巢癌的诊断。方法:采用化学发光发检测CEA,CA125,CA199水平。结果:卵巢癌患者血清CEA,CA125,CA199测定值均高于良性肿瘤及正常妇女,单独检测时敏感性分别为47.1%,83.1%,52.8%,而联合检测敏感性为92.5%。结论:联合检测有助于提高卵巢癌的诊断。 相似文献
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新型冠状病毒(简称新冠病毒)感染后综合征(Post-COVID -19 syndrome)又称为长新冠病毒感染(Long COVID)和新冠病毒感染后状态(Post-COVID -19 condition), 是发生于新冠病毒感染急性期后的一系列症状, 以疲劳、头痛、认知障碍、肌肉骨骼疼痛、胸闷气短、抑郁失眠为主要表现, 严重影响患者的生活质量和工作能力。新冠病毒感染后综合征已引起国外医学界的重视并对其发病机制和诊疗方案进行了一系列研究。由于中国在全球疫情开始的前三年采取积极有效的疫情防控措施, 国内新冠病毒感染的病例相对较少。随着2023年初国家疫情防控政策的调整, 短时期内出现了全国范围内的大规模感染。目前, 国内新冠病毒感染急性期的救治工作已基本结束, 新冠病毒感染后综合征的诊疗将是未来各级医院工作的重点。本文对新冠病毒感染后综合征的国外研究进展进行综述, 以期为国内新冠病毒感染后综合征的诊疗工作提供参考依据。 相似文献