引入CpG基序的嗜肺军团菌lvgA基因真核表达质粒的构建及其在NIH3T3细胞中的表达

目的构建了引入CpG基序的lvgA基因的真核表达质粒pclvgA/CpG,并在NIH3T3细胞中表达。方法采用PCR方法将特定CpG基序作为核酸佐剂构建于嗜肺军团菌lvgA基因侧翼,定向克隆入真核表达载体pcDNA3.1/myc-his(+),构建重组质粒pclvgA/CpG,体外阳离子脂质体转染法转染NIH3T3细胞。结果通过测序证实真核表达质粒pclvgA/CpG中lvgA/CpG克隆片段长为657bp,推测lvgA基因编码蛋白大小约为27.7Ku,lvgA基因及两侧翼原设计CpG基序完整扩出,测序序列与设计序列完全符合。用免疫荧光检测重组质粒在NIH3T3细胞中瞬时表达。结论本实验成功构建了嗜肺军团菌pclvgA/CpG真核表达质粒,并在NIH3T3细胞检测到其瞬时表达信号。     

山东口岸核与辐射有害因子监测处置工作现状

目的分析山东口岸核与辐射有害因子监测处置工作现状并提出相应的建议。方法通过分析2011年山东口岸核与辐射有害因子监测阳性案例和处置情况,探讨口岸核与辐射有害因子监测处置工作现状与对策建议。结果口岸核与辐射有害因子监测处置工作总体情况良好,但在有害因子确认、事件追踪与判定、标准体系等方面存在不足。结论结合口岸工作实际,在全国建立更加合理、有效的口岸核与辐射监控体系。     

眼压降低对慢性闭角型青光眼视野和视盘形态的影响

目的 观察眼压降低对慢性闭角型青光眼视野和视盘形态的影响.方法 经眼压、房角镜、视野及OCT检查确诊的原发性慢性闭角型青光眼患者32例（45只眼）依据病情的严重程度分别或联合给予YAG激光虹膜根部打孔术,药物,小梁切除术等治疗使眼压控制在＜21 mm Hg,记录患者治疗前以及治疗后的视力、眼压、房角、眼底检查、视野检查及OCT检查结果,比较治疗前及最终随访的MD、LV、RNFL平均厚度、平均C/D、垂直C/D.结果 治疗前及随访结束的MD分别为（-13.58±3.74）、（-12.20±3.59）dB,LV分别为（43.2±7.52）、（41.8±7.82） dB2,差异均有统计学意义（P＜0.05）.治疗前及随访结束的平均C/D分别为0.736±0.078、0.725±0.075,垂直C/D分别为0.725±0.076、0.715±0.074,差异均有统计学意义（P＜0.05）.治疗前及随访结束的RNFL平均厚度分别为（71.0±11.9）、（69.9±12.0） μm,差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 眼压降低可改善慢性闭角型青光眼的视功能和视盘形态,OCT检查为眼压降低对视盘形态产生的影响提供了客观依据.     

撞针式底层液体采样器的设计研究

[目的]解决大型液体装载器皿底层液体采样难的问题.[方法]利用机械和力学原理设计了撞针式底层液体采样器.[结果]对中、外籍大、中小型船舶进行底层压舱水采样试验,结果均获成功.[结论]撞针式底层液体采样器的研制成功,将对船舶压舱水采样、监测、卫生除害处理和其它液体底层采样,分层采样工作有着重要的现实意义,具有极高的推广和使用价值.     

大林姬鼠中汉坦病毒的分离及M片断全基因序列分析

目的研究吉林省疫区大林姬鼠中携带的汉坦病毒的分子生物学特征，并探讨其分子进化规律。方法应用直接免疫荧光、RT-PCR法进行分型检测；阳性鼠肺标本用Vero-E6细胞分离病毒；测定汉坦病毒CJilin 93株的M片断序列，并进行同源性比对和进化树分析。结果从58份大林姬鼠肺组织标本中共检测到4个阳性标本，从中分离出2株病毒：CJilin 89和CJilin 93；测序结果显示CJilin 93株M基因全长3577bp，编码一个含有1135氨基酸的G蛋白前体(GPC)。序列分析表明CJilin 93株与分离自黑线姬鼠的Bao14株核苷酸序列同源性为97．2％，氨基酸同源性为99．4％；而与同样分离自俄罗斯远东地区大林姬鼠的AMR系病毒的同源性较远。系统发生树表明CJilin 93株和Bao14株最为接近，共处于同一分支。结论在俄罗斯远东地区和我国东北地区的大林姬鼠中携带不同种系的汉坦病毒。     

霍乱弧菌ctxB基因真核重组质粒的构建及表达

目的构建霍乱孤菌ctxB基因真核表达重组质粒,并在NIH3T3细胞中进行表达。方法用限制性核酸内切酶从重组质粒pET32a-ctxB上切下ctxB基因,导入真核表达载体pcDNA3·1( ),重组子经限制性酶切分析、PCR鉴定正确后,命名为pcDNA3·1-ctxB。用脂质体法将重组质粒pcDNA3·1-ctxB转染NIH3T3细胞,采用免疫荧光法对pcDNA3·1-ctxB的瞬时表达产物进行鉴定。结果约380bp的ctxB被克隆到pcDNA3·1( )真核表达载体中,经测序无误后,用阳离子脂质体转染的方法,检测到重组质粒pcDNA3·1-ctxB在NIH3T3细胞的胞浆和胞膜上得到了表达。结论ctxB真核表达的成功构建及表达为进一步从分子水平研究霍乱肠毒素B亚单位的免疫原性及其作为佐剂的应用价值提供研究基础。     

霍乱弧菌毒力表达调控基因及霍乱、黑热病双价口服活疫苗候选株的研究

目的：研究霍乱弧菌毒力表达调控基因与霍乱弧菌毒力之间的关系，构建霍乱、黑热病双价口服活疫革候选株。方法：首先采用PCR扩增、Southern印迹杂交及原位杂交对我国不同群型霍乱弧菌毒力表达调控基因toxR、toxS、toxT的分布进行研究；然后采用自杀性质粒和接合转移技术构建霍乱弧菌toxR基因缺失株，并与原发菌株比较，确定toxR基因对霍乱弧菌毒力表达调控机制；再用基因定向置换技术构建霍乱、黑热病双价口服疫苗候选株。结果：霍乱弧菌毒力表达调控基因与霍乱弧菌毒力表达有关；霍乱弧菌toxR蛋白是霍乱肠毒素的正调控因子，是霍乱弧菌主要外膜蛋白（40kDa、43kDa）编码基因的负调控因子。结论：初步构建霍乱、黑热病双价口服活疫苗候选株。     

从褐家鼠体内检出流行性出血热抗体案例分析

目的对褐家鼠体内检出流行性出血热抗体的情况进行分析,为鼠传疾病的防治提供科学依据。方法应用双抗原夹心法对褐家鼠血清中流行性出血热IgG抗体浓度进行定量检测。结果检测出血清中流行性出血热抗体IgG的浓度为46.50ng/ml。结论医学媒介携带病原微生物潜在危险性存在且不容忽视,为保障口岸卫生安全,口岸医学媒介监测工作应由单一的种群本底调查转向种群、病原体等多元化监测。     

苯甲酸锌的制备与临床应用

苯甲酸为一外用抗真菌药，具有软化角质作用，但有一定刺激性。我院合成了苯甲酸锌，制成软膏剂经临床两年来应用，对治疗神经性皮炎、慢性湿疹等皮肤病取得了满意效果，现报道如下。1苯甲酸锌制备1．1试药苯甲酸（武汉有机合成化工厂，批号880627）；硫酸锌（北京57601化工厂，批号890325）；氢氧化钠（天津市化学试剂三厂，批号921102）。1·2制备方法取氢氧化钠509溶于2000ml蒸馏水中，分次加入苯甲酸1409，边加边搅拌，至全部溶解。另取硫酸锌1459加蒸馏水3000ml溶解后，缓慢倒入苯甲酸钠液中，边加边搅拌，温度保持在70t～75（：。静置…     

化学性浆膜炎7例报告

有毒有害气体引起中毒性呼吸系统疾患较多，常导致急性肺损伤，危害最大的是急性肺水肿^[1]；由于毒物的理化特性不同，吸人速率不同，可能引起不同部位的病变。现将我院就诊并于北京朝阳医院职业病及呼吸科确诊治疗的7例化学性浆膜炎患者报告如下。