二烯丙基二硫诱导人白血病HL-60细胞分化差异表达cDNA文库的构建

目的　应用抑制性消减杂交技术构建二烯丙基二硫(diallyldisulfide ,DADS)诱导人白血病细胞分化的消减杂交cDNA文库 ,以期克隆DADS诱导人白血病HL 6 0细胞分化的相关基因。方法　用DADS诱导人白血病HL 6 0细胞分化 ,提取polyA+ RNA ,反转录合成cDNA ,消化成短片段后分成两组 ,分别与两种不同的接头连接 ,再与未处理的白血病细胞cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性PCR扩增 ,将PCR产物与pGEM T线性载体连接 ,转化大肠杆菌进行文库扩增 ,随机挑取克隆进行酶切鉴定。结果　成功地构建了具有高消减效率的DADS诱导白血病细胞分化的cDNA文库 ,随机挑取消 2 0 0个克隆制备质粒并酶切分析 ,其中 84 5 %的克隆均具有 1 0 0～ 6 0 0bp左右的插入片段 ,说明每一克隆中均含有特异性的目的片段 ,从而为大批量筛选、克隆DADS诱导人白血病细胞分化的相关未知新基因奠定了基础。结论　DADS能诱导人白血病HL 6 0细胞分化 ,并引起相关的基因发生改变 ,而抑制性消减杂交技术能有效地分离差异表达的基因。     

Effect of TCDD on Maternal Toxicity and Chorionic Gonadotropin——Bioactivity in the Immediate Post-implantation Period of Macaque

The pupose of this experiment was to observe the alterations in bioactivity of chorionic gonadotropin(CG) associated with early fetal loss(EFL).induced by the environmental toxin TCDD(1,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin) in the cynomolgus macaque.Ten of twelve females administered single doses of 1,2,or 4ug/kg TCDD on gestational day(GD) 12 had EFL from ten to twenty days later,Seven control animals treated only with the vehicle had normal pregnancies,Blood samples were repeatedly collected for hormone evaluation,from two days befor treatment to thirty-one days following treatment.Immunoreasctive monkey chorionic gonadotropin(mCG) was measured in serum using ELISA,and bioactive mCG was measured using a luminescence LH/CG bioassay.No change in immunoreactive mCG levels was detected as a result of TCDD,treatment,but bioactive mCG levels were significantly lower in TCDD-treated animals compared to controls.This change in bioactivity of mCG was also reflected in the ratio of mCG bioactivity to mCG immunoreactivity(B/I ratio) which began to rise in normal pregnancies by GD20,but did not rise in TCDD treated animals,These results demonstrate that normal pregnancy in the monkey,as in humans,is characterized by a post-implantation change in the B/I ratio of CG.These findings therefore suggest that changes in the production of bioactive CG may be used as a biomarker of environmental toxicant exposures which lead to EFL.     

北京协和医院食管恶生肿瘤的外科治疗

目的：探讨如何延长食管恶性肿瘤患者术后生存期。方法：回顾性分析１９６１￣１９９２年我院１０９８例食管恶性肿瘤患者的临床资料,并采用ＰＣＲ及ＲＴ－ＰＣＲ方法检测１９９６年３０例信管癌新鲜标本的抑癌出因脆性组氨酸三联体（ＦＨＩＴ）的缺失情况。结果：食管恶性肿瘤手术切除率不断提高,手术并发症和手术死亡率不断降低,但术后５年生存率无明显改变,延误诊断及非根治性切除影响了术后长期生存。ＦＨＩＴ基因的ｃＤＮＡ缺失在食管癌组织为６４．２％,在癌旁组织为２０％。结论：食管上皮高度不典型增生和ＦＨＩＴ基因在食管及其癌旁组织的缺失分别是早期食管癌诊断的病理学及分子生物学指标,后者也可作为食管癌切除范围的指标之一。早期诊断和治疗、根治性切除及术后营养支持对延长术后生存期十分重要。     

多种类型趋化性细胞因子在小鼠胸腺基质细胞系中的表达

目的分析趋化性细胞因子 SDF- 1α、 IP- 10、 KC、 MCP- 1和 RANTES在小鼠胸腺基质细胞系 MTEC1、 MTDC、 D2SC、 MTECB、 TEC 1C8、 TNC及原代培养胸腺基质细胞的半定量表达情况,并检测重组的趋化性细胞因子纯品 SDF- 1α、 IP- 10、 MCP- 1和 RANTES对小鼠胸腺细胞的趋化活性。方法以β- actin为内对照,用 RT- PCR方法,对上述 5种趋化性细胞因子进行 30个循环 PCR扩增,用凝胶成像系统观察扩增结果 ,并对各电泳带进行积分光密度扫描分析。用 Boyden小室法检测重组趋化性细胞因子 SDF- 1α、 IP- 10、 MCP- 1和 RANTES对全胸腺细胞的趋化活性,并计算其趋化指数。结果 SDF- 1α、 IP- 10、 KC、 MCP- 1和 RANTES在被检测胸腺基质细胞系的表达谱不同,表达强度亦有差异。 SDF- 1α和 MCP- 1在 D2SC和 TEC 1C8中未出现可见扩增条带;在 TEC 1C8中也未见 KC的扩增条带。重组趋化性细胞因子 SDF- 1α、 IP- 10、 MCP- 1和 RANTES对胸腺细胞的趋化指数分别为 3.7、 4.5、 6.2和 2.6。结论不同的胸腺基质细胞系,其趋化性细胞因子的表达谱和表达强度不同, 4种重组趋化性细胞因子对胸腺细胞表现出不同的趋化活性。     

雷公藤单体T4对IL—1刺激引起的类风湿患者关节滑膜成纤 …

目的 探讨雷公藤单体Ｔ４对经ＩＬ－１刺激的体外培养的类风湿关节炎（ＲＡ）患者的关节滑膜成纤维细胞增殖和产生ＩＬ－６的影响。方法 关节滑膜组织来自行关节置换术或滑膜切除术的类风湿患者。滑膜组织经体外消化使细胞分散后,传代培养,以培养３代后的滑膜成纤维细胞为对象,先给予ＩＬ－１刺激,再加入雷公藤Ｔ４单体。结果 Ｔ４可抑制由Ｉ－１刺激的滑膜成纤维增殖,但不影响ＩＬ－６的产生。结论 Ｔ４的上述作用可能是其     

5,7双羟色胺对不同功能运动神经元群调质CGRP配布式？…

目的 研究５,７双羟色胺（５,７－ＤＨＴ）对不同功能运动神经元（Ｍｎ）群调质ＣＧＲＰ配布式样的影响。方法 利用霍艉毒素Ｂ亚单位结合胶体取长补短地标记神经元复合化学的非荧光双标记方法。结果 大鼠比目鱼肌（慢肌）Ｍｎ（ＳＯＬ－Ｍｎ）群和趾长伸肌（快ｎ（ＥＤＬ－Ｍｎ）群ＣＧＲＰ配布式样不同,即ＳＯＬ－Ｍｎ群含较高比率（ＣＧＲＰ－ＬＩ）阴性和弱阳性Ｍｎ,ＥＤＬ－Ｍｎ群含较高比率ＣＧＲＰ－ＬＩ强阳性Ｍｎ,于     

面神经水平段梳理术治疗半面痉挛

半面痉挛（HFS）病因机理不清，有神经冲动短路、局部癫痛、微血管压迫学说，尚无特效药物治疗。本文报告经鼓室探查术进路行面神经水平段减压术治疗HFS6例，平均随访1.2年，显效4例，复发2例，但程度减轻。5例术中未分离砧镫关节，听力不变。HFS行水平段神经梳理术不复杂，安全有效，是多种手术疗法中可取的一种。作者介绍提高手术效果的几点经验：①鼓室探查术外耳道鼓膜皮瓣比常现大一点，有利于暴露面神经水平段；②镫骨上层结构及砧镫关节是定位面神经骨管的重要标志；③为保持听力，一般不要分离砧镫关节；④面神经水平段骨管近卵圆窗缘较薄，可用细钩针挑开；⑤根据面痉挛病程和痉挛程度的不同，进行不同强度的梳理；⑥对病情顽固者，可行第二次梳理术。     

慢性鼻窦炎内窥镜手术上颌窦粘膜扫描电镜观察

为了对行内窥镜鼻窦手术的慢性鼻窦炎患者上颌窦粘膜的术后超微结构变化进行评价，利用扫描电镜及图像分析技术对１６例（２０侧）术中和术后上颌窦粘膜及自然孔粘膜的纤毛面积进行定量测定。发现术前上颌窦及其自然孔粘膜纤毛细胞明显减少，杯状细胞，微绒毛细胞增多，部分病例有鳞状上皮化生。术后６个月￣１年，大部分病例受损的纤毛细胞明显恢复，纤毛细胞覆盖面积增加，有统计学意义，通过内窥镜手术，改善上颌窦的通气、引流、     

直流电脉冲刺激豚鼠耳蜗基底膜振动研究

为了在活体上研究哺乳类动物耳蜗基底膜的电－机械特性、将一对铂－铱电极分别置于３０只豚鼠耳蜗底回的前庭阶和鼓阶。用矩形直流脉冲电刺激蜗管，用激光多普勒汛速仪测定电刺激诱发的耳蜗基底膜振动的幅度和速度。结果表明，在听敏度正常豚鼠的耳蜗，电刺激可诱发基底膜向正电极方向位移，其位移波形类似于电脉冲的矩形波。在矩形脉冲的起始沿和结束沿，由于外毛细胞的瞬态反应，可诱发与该部位特征频率一致的共振运动。据分析，这     

正常与病态下嗓音的客观指标的评价

对158例正常人和136例各种喉疾病患者连续元音[i]发声时的平均气流率、声强、频率、频率微扰商和发声效率同步进行了测定.并对各测定指标间的相互关系进行了探讨.频率微扰商是表示连续元音发声时声带振动相邻周期间的微细变动量;发声效率反映平均气流率与声能的有效转换率.在低、中和高强度发声时.随发声强度的提高,平均气流率.频率和发声效率随之提高而频率微扰商则变小.中等声强发声时.平均气流率与声强,声强与频率均呈正相关;而平均气流率与发声效率.声强(男性)和频率(女性)与频率微扰商均呈负相关.多数喉疾病患者显示出较正常人高的平均气流率和频率微扰商,发声效率则降低.当声强和频率作为参考指标时,平均气流率,频率微扰商和发声效率可作为评价喉发声功能的客观、定量指标.