新基因BC047440原核表达载体构建及其重组蛋白的表达纯化

目的 构建肝癌相关新基因BC047440原核表达载体,表达并纯化出其重组蛋白.方法 从HepG2细胞中提取总RNA,经逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增BC047440cDNA,克隆进质粒pMD19-T,转化E.coliDH5α,测序正确后,酶切目的基因片段,插入质粒pET-28a(+),转化E.coliBL21,IPTG诱导蛋白表达,Ni-NTA柱亲和层析纯化重组蛋白.结果 电泳证实RT-PCR扩增产物与预期目的基因BC047440长度一致.RT-PCR纯化产物与载体pMD19-T连接后,经蓝白斑筛选,挑出5个白色菌落做酶切鉴定,其中2个菌落被证实为阳性克隆.测定其基因序列,结果显示与Genbank公布的BC047440基因序列完全一致.将BC047440cDNA插入质粒pET-28a(+),转化E.coliBL21,培养过夜后,挑选7个白色菌落做酶切鉴定,证实均为阳性克隆.IPTG诱导其中一个克隆表达蛋白,SDS-PAGE电泳分析表明,在相对分子质量23000左右出现新的蛋白表达条带,诱导4h后表达蛋白量最多,占菌体总蛋白的22.3%.将诱导3h的菌体超声破碎后,Ni柱亲和层析,50和125mmol/L咪唑洗脱液SDS-PAGE电泳显示出清晰的单一条带.结论 成功构建BC047440基因原核表达载体,表达并纯化出重组蛋白,为深入研究其临床应用打下基础.     

PBL模式在肝癌介入外科教学中的应用研究

以问题为中心（Problem-Based Learning,PBL）的讨论式教学作为一种新型教学模式,近年来在世界各大高等院校日益受到重视[1]。PBL是一种以学生为中心,以教师为导向,以小组为单位,围绕实际问题进行讨论的启发式教学形式[2]。我科自2009年以来将PBL教学法应用于肝癌血管介入的教学实践,取得了较好的教学效果,现总结报告如下。     

基于即时通讯平台课外CBL教学对临床医学教学作用的观察

研究基于及时通讯平台的课外CBL教学对提高临床本科教学的效果。根据目前临床本科教学的课时不够,缺乏足够CBL教学条件的现状,在及时通讯平台上建立教学QQ群,在课后开展CBL教学,课程考试和实习考试成绩均证实可采用该教学模式可有效提高学生成绩和临床实际工作能力。因此,该教学模式能够提高临床本科教学效果。     

新生儿梅毒1例

报告１例新生儿梅毒，用阿奇霉素治疗，疗效佳。     

慢性结石性萎缩性胆囊炎的腹腔镜手术治疗

慢性萎缩性胆囊炎并胆囊结石是腹腔镜胆囊切除术中较难处理的一种类型,由于长期炎症刺激,胆囊与周围组织或器官粘连以及胆囊本身萎缩,致使囊壁纤维化,浆膜下层间隙变小甚至无明显间隙,有时同时存在胆囊颈部或胆囊管结石嵌顿均给行腹腔镜胆囊切除术(laparoscopiccholecys-tectom     

生物可吸收"胃背心"在门奇断流术中的临床应用与近期观察

为减少门奇静脉断流术后创面粘连而导致的侧支血管再通,我们于2001年12月至2003年2月在断流术中加用生物可吸收医用膜"胃背心"方法共11例,报告如下.     

血清CRP作为感染性标志的临床应用研究

目的　对血清CRP作为感染性标志物的临床价值作一探讨。方法　采用快速透射免疫比浊分析技术检测了1 1 6例感染性疾病和 350例其他具有感染和炎症并发病症的患者及 91名健康人血清CRP的含量。结果　感染性疾病组中CRP升高者占 67.2 % (78/1 1 6) ,其他各组疾病中血清CRP升高率也分别有 44 .6 %～ 87.5 % ,与健康对照组比较 ,差异均有高度显著性 (P<0 .0 1 )。结论　透射免疫比浊分析法检测CRP ,方法简便 ,快速 ,灵敏 ,准确 ,可用于感染性疾病或并发感染的诊断与监控 ,适合于各类实验室常规应用     

BC047440基因在肝细胞癌中的表达及其意义

目的:探讨肝癌相关的新基因BC047440在肝细胞癌(HCC)中的表达及其病理学意义。方法：采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)半定量检测36例HCC及其相应的癌旁肝组织中BC047440 mRNA的表达，并将该基因在HCC中的表达分为过高表达组及较高表达组，分析其与肿瘤病理变化的关系。〖KG(*8〗结果：36例HCC中BC047440基因mRNA的表达较癌旁肝组织高,其平均光密度比值分别为0.2594±0.0928和0.0942±0.0443,差异有极显著性意义（P<0.01）;过高表达组与较高表达组相比较，前者肝癌直径较大，门静脉受侵较严重，差异有显著性（P<0.05）。结论：BC047440基因与HCC的发生、发展和侵袭转移有关。     

胰腺囊实性乳头状上皮性肿瘤1例

1病例资料患者女性,25岁,因发现上腹部包块10余天,于2005年11月9日入院。查体:右中上腹可扪及一包块,质地较韧,表面光滑,边界较清,活动度可,无压痛。B超检查示胰头区6.5cm×4.9cm囊实混合性肿块;CT提示胰头区类圆形低密度影,大小约5.0cm×5.0cm,边界清晰,其内密度不均,考虑胰头     

细胞间黏附分子-1及热休克蛋白70与猪同种异体胰腺移植排斥反应的关系

目的 探讨细胞间黏附分子-1（ICAM-1）及热休克蛋白70（HSP70）与猪同种异体胰腺移植排斥反应发生的关系。方法 建立小型猪胰腺移植动物模型，通过移植胰腺穿刺活检组织学检查将标本分为Ⅰ（无排斥反应）、Ⅱ（轻度排斥反应）、Ⅲ（中度排斥反应）及Ⅳ（重度急性排斥反应）组。进一步行ICAM-1及HSP70免疫组织化学检查和图像分析。结果 当移植胰腺发生排斥反应时，ICAM-1及HSP70的表达均升高，并随着排斥反应的加重而呈进行性升高。结论 ICAM-1及HSP70均参与了胰腺排斥反应的发生过程，通过胰腺穿刺活检行ICAM-1及HSP70免疫组织化学检查可早期诊断排斥反应并判断排斥反应的严重程度。