mec复合体和SCCmec盒与MRSA耐药性的研究进展

1961年，英国首次报道耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant S.aureus,MRSA)，随后波及日本、澳大利亚、美国，现已在世界各地广为流行，成为医院感染和社区感染的常见病原菌。     

肽核酸及其在生物学中的应用

肽核酸是一种核酸类似物 ,为电中性 ,不易被核酸酶和蛋白酶降解 ,能以高亲和性、高特异性与DNA或RNA杂交形成稳定的双螺旋和三螺旋结构。肽核酸在疾病的基因诊断、反义药物的开发、基因表达与调控、基因序列及结构分析中有广泛的应用价值 ,对生命起源研究也有重要启示     

携带新SCCmec型别菌株的耐药特点及PCR图谱多位点序列分析

目的了解前期研究中发现的3株携带有新型SCCmec聚合酶链反应（PCR）谱型的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的位点序列特性。方法在前期的分型研究中,从58株MRSA中检测到3株（5.17%）携带了一种新的SCCmec多位点PCR谱型,其含有5条扩增带,依次为A、F、H、B和M。对上述扩增产物测序,用BLAST与国际基因库内已知位点序列进行对比分析。结果测得序列与已有位点相应序列的同源性均在97%以上。结论此型为一新的SCCmec多位点PCR谱型,是传统Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型的重组型,与已有型别比较,不但有不同的位点图谱,且有多个点突变。     

海南省汉、黎族人群中缺失型α-地中海贫血的研究

目的:研究海南省汉、黎族人群中东南亚型缺失(-SEA)、右侧缺失(-α3.7)和左侧缺失(-α4.2)3种α-地中海贫血缺失突变的携带率、基因频率及基因型的分布特点.方法:应用聚合酶链反应(PCR)技术直接筛查海南省汉、黎族人群中的东南亚型缺失(-SEA)、右侧缺失(-α3.7)和左侧缺失(-α4.2)3种α-地中海贫血缺失突变.结果:在197例海南汉族人中检出25例α-地中海贫血携带者,携带率为12.69%,3种α-地中海贫血缺失突变的基因频率为0.0635,其中-SEA、-α3.7和-α4.2的基因频率分别为0.0127,0.0305,0.0203,共发现-SEA/αα、-α3.7/αα和-α4.2/αα 3种基因型,其中-SEA/αα 5例,-α3.7/αα 12例,-α4.2/αα8例;在201例海南黎族人中检出114例α-地中海贫血携带者,携带率为56.72%,3种α-地中海贫血缺失突变的基因频率为0.3607,其中-SEA、-α3.7和-α4.2的基因频率分别为0.0075,0.1716,0.1891,共发现-SEA/αα、-α3.7/αα、-α3.7/-α3.7、-α3.7/-α4.2、-α4.2/αα、和-α4.2/-α4.2 6种基因型,其中-SEA/αα 3例,-α/αα 39例,-α3.7/-α3.7 6例,-α4.2/-α4.2 18例,-α4.2/αα 38例,-α4.2/-α4.210例.结论:海南省汉、黎族人群是α-地中海贫血的高发群体.     

一株抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的海洋放线菌的鉴定及系统发育分析

从海南三亚海域的海绵中分离到一株抗耐甲氧西林金黄色芎芍merhieillin-resistant Staphylococcus aureus(MRSA)的海洋放线茵A115。该菌株在燕麦片琼脂上插片培养孢子丝螺旋形，孢子长圆形，表面有稀疏的短刺；菌株细胞壁含LL—DAP，糖型C；16S rDNA序列分析及系统发育分析表明，分离菌株A115与Streptomyces albogriseolus属同一分支．同源性为99．0％．但形态学、生理生化鉴定及活性情况存在一些差异。由此推断菌株A115为S．albogriseolus的海洋变种．命名为Streptomyces albogriseolus var．marine。     

利用组合筛选模型筛选海洋微生物抗肿瘤活性物质

建立了镰刀菌筛选模型并进行了验证，将镰刀菌筛选模型与肿瘤细胞毒筛模型组合。应用于海洋微生物抗肿瘤活性物质的筛选，从1585株海洋微生物中筛选到12株微生物，其发醇产物对体外培养的肿瘤细胞有较好的抑制作用。其中活性最强的细菌菌株为QK1-2708，其发酵产物对CNE，SMMC-7721和P388细胞的ID50分别是3520，3078，5061。     

葡萄球菌染色体mec盒多位点复合PCR分型测定

目的研究用多位点复合PCR分型法高效、快速、准确地测定金黄色葡萄球菌SCCmec型别。方法采用正交设计和平行对比分析,对影响测定结果的退火温度、延伸时间,MgCL2、dNTP、Taq DNA聚合酶、引物的用量进行了测试。结果获得多位点PCR测定的最佳退火温度为55℃、延伸时间为1 min,以及MgCl2、dNTP、TaqDNA聚合酶和各位点引物的最佳用量。结论多位点PCR测定是一种高效、快速、实用的SCCmec分型方法,可用于大规模的MRSA分子流行病学研究。     

海洋放线菌活性组分AM105-Ⅱ的分离与结构鉴定

目的对海洋来源的放线菌AM105发酵液中抗MRSA活性物质进行分离和鉴定。方法运用硅胶柱层析、制备薄层层析和Sephadex LH20柱层析从菌株发酵液中进行活性追踪分离,通过现代波谱数据分析进行化学结构鉴定,并采用MIC评价其生物活性。结果与结论从发酵液中分离得到活性组分AM105-Ⅰ,鉴定其属于利福霉素类抗生素,由rifamycin S及其异构体isorifamycin S组成。经检索,isorifamycin S是一种新结构的化合物。MIC结果反映isorifamycin S抑菌活性明显优于目前临床药物rifamycin SV。