正常人胚肺HELF、人肺腺癌细胞A549和转染RARβ表达载体的A549蛋白质组差异分析

目的:观察人肺腺癌细胞A549、正常人胚肺HELF、转染RARβ表达载体的A549细胞在蛋白质组学中的差异。方法:固相pH梯度双向凝胶电泳分离A549、HELF、RARβA549细胞的总蛋白,银染显色,应用软件对所得结果进行统计学分析。结果:A549的平均蛋白质点数为(1154±86)个,HELF的平均蛋白质点数为(1338±79)个,RARβA549的平均蛋白质点数为(987±64)个,不同胶间蛋白质点的位置偏差在IEF为(2.97±0.34)mm,在SDSPAGE方向为(2.73±0.45)mm,差异表达分析发现,A549细胞和HELF细胞双向电泳分离图谱有893个蛋白质点匹配;A549中有329个点未被匹配,HELF细胞中有445个点未被匹配。A549和RARβA549进行匹配,有634个点相互匹配,A549有520个点未被匹配,RARβA549有205个点未被匹配。方差分析结果:F=15.488,P<0.05。A549组与HELF组比较,差异具有统计学意义(P<0.05);A549组与RARβA549组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:人肺腺癌细胞A549、正常人胚肺HELF、转染RARβ表达载体的A549细胞中存在差异蛋白。     

NKX 3.1基因上游一个30 bp负调控区结合蛋白的初步鉴定

目的：鉴定NKX 3．1基因上游30bp负调控区的结合蛋白。方法：人工合成30bp负调控序列．用末端转移酶对其进行地高辛标记;提取细胞核蛋白,采用电泳迁移率变动分析(EMSA)方法．检测细胞核提取液中与30bp负调控序列特异结合的核蛋白。结果：在LNCaP细胞及其他不同肿瘤细胞系核提取液中,检测到与30bp负调控序列特异结合的核蛋白,但在不同的细胞系中有不同种类的结合蛋白。结论：NKX 3．1基因上游的30bp负调控机制在不同的细胞中普遍存在。不同的细胞核中有不同的结合蛋白．可能涉及不同的调控机理。     

黄河三角洲来源真菌Fusarium oxysporum RD-79次级代谢产物研究

研究一株黄河三角洲滨海湿地来源的真菌Fusarium oxysporum RD-79的次级代谢产物及其生物活性。利用硅胶柱色谱、ODS柱色谱、半制备高效液相色谱等分离方法对该菌株发酵产物进行分离纯化,通过核磁共振（NMR）、质谱（MS）等方法,结合相关文献对比鉴定化合物结构;分别采用CCK8法和Griess法对化合物进行抗肿瘤活性和抗炎活性测试。从Fusarium oxysporum RD-79的发酵产物中分离得到8个单体化合物,分别为5-bμtyl-4-methoxy-6-methyl-2H-pyran-2-one（1）、甲醛甲苯（2）、delitpyroneD（3）、3-hydroxymethyl-6,8-dimethoxycoμmaarin（4）、5-[(1S,2S)-1,2-dihydroxybμtyl]-4-methoxy-6-methyl-2H-pyran-2-one（5）、setosphapyroneA（6）、5-(1-hydroxybμtyl)-4-methoxy-6-methyl-2H-pyran-2-one（7）、9-O-methylscytalol A（8）。化合物1~8均可不同程度抑制NO的产生;在浓度为100μg/mL下,化合物1~8均无抗肿瘤活性。     

罕见病原体感染致移植肾动脉破裂出血二例并文献复习

正我国现阶段器官来源主要为中国公民逝世后器官捐献(Chinese donation after citizen's death,CDCD)。部分CDCD供者捐献前在ICU停留时间长,院内感染风险大,易导致供者来源的移植物感染,如肺部感染与移植肾血管感染。尽管肾移植技术日益成熟,但是术后感染仍然危及受者和移植物存活[1]。肺部感染治疗难度大、病死率高;而血管感染易导致动脉破裂     

低温机械灌注与单纯冷保存供肾对肾移植预后影响的Meta分析

背景：目前,国内外低温机械灌注与冷保存对肾移植预后影响的文章比较多,但结论各异,且由于大多单个研究样本量存在局限,对低温机械灌注的优缺点缺乏客观评价。 目的：比较低温机械灌注与冷保存对肾移植预后的影响。 方法：计算机检索PubMed、sinoMed、EMbase、Web of Science、the Cochrane Central Register of Controlled Trials (CENTRAL)、万方数据库及中国知网,查找并筛选出所有比较低温机械灌注与冷保存对肾移植预后影响的随机对照试验(Randomized Controlled Trial,RCT),同时手检纳入文献的参考文献,检索时限均为建库至2015年3月4日。按纳入排除标准由2位评价者独立进行RCT的筛选、资料提取和质量评价后,采用RevMan(5.3.0版)软件进行Meta分析,并采用GRADEpro3.6软件进行证据质量评价。 结果与结论：共纳入文献6篇,低温机械灌注保存供肾共619例,冷保存保存供肾共620例。结果显示：低温机械灌注组原发性移植物无功能发生率、功能性移植肾功能延迟恢复发生率、移植肾功能延迟恢复发生率均显著低于冷保存组(P < 0.05或0.01)。患者1年生存率、移植物1年存活率差异均无显著性意义(P > 0.05)。结果表明低温机械灌注保存供体只能降低肾移植后近期并发症的发生率,维护肾脏功能,但无法提高患者1年生存率和移植物1年存活率,相比较冷保存的保存方式,低温机械灌注对供体器官的保护无长期优势。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

经导管动脉化疗栓塞术对原发性肝癌外周循环肿瘤细胞及血管内皮生长因子的影响

目的 探讨经导管动脉化疗栓塞术（TACE）对原发性肝癌患者外周循环肿瘤细胞（CTC）数量及血管内皮生长因子（VEGF）浓度的影响。方法 选择2011年至2013年50例原发性肝癌患者为研究对象,应用免疫磁珠分离技术及酶联免疫吸附法检测在TACE术前1天及术后1天、3天、30天CTC数量和VEGF浓度的变化。结果 TACE术前1天和术后1天、3天、30天的CTC阳性率分别为84.0％和66.0％、58.0％、78.0％,CTC检测数量分别为（2.38±1.65）个、（1.24±1.06）个、（0.86±0.83）个、（2.10±1.63）个,手术前后比较差异均有统计学意义（P＜0.05）;术前1天及术后1天、3天、30天的VEGF浓度分别为（304.98±33.94） pg／ml、（262.93±28.22） pg／ml、（258.40±27.55） pg／ml、（283.08±37.19） pg／ml,手术前后比较差异有统计学意义（P＜005）。对CTC数量及VEGF浓度在术后30天与术后3天两时段的差值进行相关分析,两者呈线性正相关（r=0.710,P＜0.05）。结论 TACE治疗原发性肝癌术后1～3天内可以有效减少血液VEGF浓度并阻止肿瘤细胞进入外周血循环。     

板蓝根中红细胞凝集效应组分的谱效关系研究

目的研究板蓝根的红细胞凝集活性成分。方法对板蓝根药材进行系统化学部位分离,采用红细胞凝集活性检测法探讨各化学部位的抗病毒活性;针对活性最强的部位建立10批不同产地样品的HPLC指纹图谱并进行生物测定,运用数理统计方法研究谱效相关性。结果板蓝根正丁醇萃取部位对家兔红细胞的凝集作用最强;谱效相关性研究发现2号、11号共有峰(保留时间分别为7.23、43.00 min)的相对峰面积所占比例越大,样品的凝集作用也越强。结论 2号、11号峰可能为板蓝根抗病毒作用的特征峰,所建立的板蓝根HPLC特征图谱与药效作用的关系,可为建立"指纹图谱与药效关联"的中药质量控制模式提供理论依据和数据支持。     

高效液相色谱法测定板蓝根中fructopyrano-(1→4)-glucopyranose的含量

 目的 建立板蓝根中fructopyrano-(1→4)-glucopyranose（FG）的高效液相色谱-蒸发光散射器含量测定方法。方法 色谱柱为Agilent XDB-C₁₈ (4.6 mm×150 mm,5 μm),流动相为甲醇-水（5∶95）,漂移管温度为115 ℃,载气流速为3.0 L·min^-1。结果 在5 min内可完成对FG的测定,FG在8.40～21.00 ng内,其对数值与峰面积对数值线性关系良好（r=0.999 0）,加样回收率为97.27%～102.72%。结论 此方法准确、可靠、快速、灵敏、重现性好,可用于板蓝根中FG的含量测定。     

真核表达载体pEGFP-N1-ZIP10的构建及其对人乳腺癌细胞中其他锌转运体基因表达的影响

目的 构建pEGFP-N1-ZIP10表达载体,观察其在乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞中的表达,并检测ZIP10过表达对其他锌转运体的影响。方法 从外周血经 RT-PCR扩增ZIP10 cDNA序列,并将其定向克隆至真核表达质粒pEGFP-N1中,pEGFP-N1-ZIP10经酶切及测序鉴定后,转染乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞,RT-PCR检测ZIP10的表达及其他锌转运体ZnT1、ZIP1、ZIP6等表达的变化。结果 酶切和测序证实目的基因片段大小、方向均正确,转染MCF-7和MDA-MB-231细胞,RT-PCR检测到ZIP10在mRNA水平过表达,并发现使ZIP1的表达显著降低。结论 成功构建真核表达载体pEGFP-N1-ZIP10,并在乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞瞬时表达成功,转染后使细胞中ZIP1的表达明显降低,为进一步研究ZIP10在乳腺癌发生发展中的作用奠定基础。     

先天性甲状腺功能减低症患儿甲状腺球蛋白基因突变的研究进展

先天性甲状腺功能减低症(congenital hypothyroidism,CH)是儿童内分泌疾病中最常见的一种,甲状腺激素合成障碍是CH的病因之一,甲状腺球蛋白(thyroglobulin,TG)基因突变是引起甲状腺激素合成障碍的原因。本文对近年来与CH有关的TG基因研究进行综述,以进一步探索CH产生的分子机制,为与其相关的病理生理学提供基本理论。