DNA双链断裂修复蛋白表达水平与肿瘤细胞放射敏感性的关系研究

目的：检测肿瘤细胞株中DNA双链断裂修复蛋白（Ku80、DNA-PKcs和ATM）的表达水平和放射敏感性参数,探讨3个蛋白预示肿瘤细胞放射敏感性的价值。方法：培养4株人宫颈癌细胞HeLa、SiHa、C33A和Caski,3株人乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231和MDA-MB-453,及1株人肺癌细胞A549,Western blot检测这8株细胞中Ku80、DNA-PKcs和ATM蛋白的表达水平;流式细胞仪检测X线（10 Gy,6 MV）照射48 h后的凋亡率;克隆形成实验检测SF2（surviving fraction at 2 Gy）值和α、β值;Pearson线性相关分析蛋白表达水平与照射后凋亡率、SF2值和α/β比值的相关性。结果：3种蛋白在同一株细胞中的表达及同一蛋白在不同细胞株的表达均存在明显差异;DNA-PKcs的表达水平与SF2之间存在正相关关系（r=0.723,P=0.043）;Ku80和ATM的表达与SF2值间无明显相关关系（P〉0.05）。3种蛋白与凋亡率和α/β比值均无相关性（均P〉0.05）。结论：DNA-PKcs蛋白表达越高,细胞对放射线越抵抗,其表达水平可能成为指示肿瘤细胞放射敏感性的指标。     

高效液相色谱法测定寿星补汁中二苯乙烯苷的含量

目的建立寿星补汁中二苯乙烯苷的含量测定方法。方法采用HPLC,色谱柱为Kromasil C18(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈-水(25∶75);检测波长320 nm。结果二苯乙烯苷在0.01282~0.2564μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,回归方程为Y=3.5303×106X-2424.9,r=0.999 9;平均回收率为99.44%,RSD为0.72%。结论本法测定寿星补汁中二苯乙烯苷的含量简便、准确、快捷,可用于寿星补汁的质量控制。     

1例金黄色葡萄球菌肺炎的诊治

患者，男29岁。因“咳嗽、咳脓痰1月余，伴咯血1天”入院。病程1^＋月，院外未正规治疗，用药情况不详。发病前有痔疮手术史。首次入院时患者体温高，呼吸急促，双下肺有少量细湿鸣。胸片示双肺可见云片状及斑片状高密度影，不均，部分融合，中下为多，右下肺似有小圆形透光区，双肺门影不清。心影大小正常。双肺感染，建议CT检查除外空洞。     

腺样囊性癌组织中增殖细胞核抗原标志物的表达及其意义

目的：探讨增殖细胞核抗原标记物（Ki-67）在腺样囊性癌（ACC）组织中的表达情况及其意义。方法：采用免疫组织化学S—P法测定Ki-67在54例ACC组织中的表达情况，t检验统计分析其临床及病理学意义。结果：Ki-67在ACC组织中的表达与临床分期及病理类型有关。Ki-67的高表达预示着ACC的预后较差。结论：Ki-67可作为判断ACC恶性程度及预后的有效指标。     

反义寡核苷酸对转化生长因子β2刺激的人眼球筋膜囊成纤维细胞结缔组织生长因子表达的影响

目的 研究结缔组织生长因子(CTGF)在滤过泡瘢痕化形成中的作用.方法 对照实验研究.应用二甲基四氮唑盐(M1Tr)法检测脂质体对人眼球筋膜囊成纤维细胞(HTF)活性的影响;用脂质体包裹CTGF的反义寡核苷酸(ASODN)处理经转化生长因子β2(TGF-β2)刺激的HTF,然后用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术和免疫细胞化学法检测纤维连接蛋白(Fn)的合成,用RT-PCR和免疫印迹法检测CTGF的表达.结果 3个不同浓度组的脂质体作用HTF后,其吸光度(A)值分别为0.178±0.069、0.196±0.071、0.141±0.036,与正常对照组(0.202±0.073)比较,差异无统计学意义(F=1.65,P＞0.05);单纯的TGF-β2刺激组(T组)与加入了脂质体的TGF-β2刺激组(D组)分别从基因和蛋白水平比较CTGF和Fn的表达,差异无统计学意义(t=0.90,2.32,0.75,2.11;P＞0.05);转染12 h后CTGF与Fn的Mrna水平比较,脂质体介导的CTGF反义寡核苷酸治疗组(A组)的相对灰度RI值明显高于脂质体介导的CTGF正义寡核苷酸对照组(S组)和D组(F=15.25,19.73;P＜0.05);CTGF与FN的蛋白表达水平与Mrna表达水平相一致.结论 CTGF的ASODN能够抑制TGF-β2对HTF表达CTGF和Fn的刺激作用.     

脑电图干扰和噪声原因分析

医用生物电诊断仪器在临床是普遍使用,但最常用的是心电图和脑电图。脑电图由于其性能的特殊性,它不单具有一般生物电诊断仪器的共性,又具有其独特的个性。可以说是一种特殊的生物电诊断仪器。本文对常见的故障——干扰和噪声原因进行分析,并提出处理方法。     

机械应力下成骨细胞外信号调节激酶ERK1/2的早期变化

目的:观察体外培养的成骨样细胞在不同机械应力下细胞外信号调节激酶ERK1/2的表达变化.方法:采用四点弯曲细胞力学加载装置系统,对人成骨样细胞进行加力:频率0.5 Hz,加力板变形量4000μstrain,按5,15,30 min和1h不同时间段,使细胞发生单轴牵张和压缩应变.运用Western Blot检测不同方向、不同作用时间的应力应变下细胞外信号调节激酶ERK1/2所产生的变化.结果:在4000μstrain的周期性应力作用时,细胞外信号调节激酶ERK1/2在5 min内被迅速激活,磷酸化程度大幅升高,牵张及压缩应力均有类似表现;1 h左右恢复至基态水平.牵张应力所引发的ERK磷酸化较压缩应力更强,其差异有统计学意义(P＜0.05).结论:较大的应力应变可以在早期激活成骨细胞内的MAPK/ERK信号转导通路,牵张应力所产生的效应较压缩应力更为明显,机械应力参与了细胞外信号调节激酶的活化.     

吗氟合剂预先镇痛对腰硬联合麻醉及术后镇痛的影响

目的 探讨硬膜外腔注射吗氟合剂预先镇痛对腰硬联合麻醉中及术后镇痛的影响.方法 60例在腰硬联合麻醉下全宫切除术,按美国麻醉医师协会病人ASA分级为Ⅰ-Ⅱ级病人,随机分成三组, A组为对照组,B组为全量预先镇痛组,C组为半量预先镇痛组,观察三组术中镇静程度(Ramesay评分)、 脉搏血氧饱和度(SpO2)、术后镇痛效果、疼痛视觉模拟评分(VAS评分)、镇痛有效时间.结果 Ramesay评分A组≈B组＞C组,VAS评分A组≈B组≈C组(所有病例均＜3分),镇痛有效时间A组≈C组＞B组.结论 对于腰硬联合麻醉辅助静脉镇痛镇静手术病人来说,硬膜外腔注射吗氟合剂预先镇痛可减少术中静脉辅助药量,对术后镇痛效果影响不大;但合理的用药时机可延长术后镇痛时间,使用术前硬膜外腔预注吗氟合剂半量,关腹前再注入余量的方法更能保证术后止痛有效时间.     

DHS内固定加中药内服治疗股骨粗隆间骨折

目的研究观察动力髋螺钉(dynamic hip screw,DHS)内固定配合中药内服治疗股骨粗隆间骨折的临床疗效。方法自2000年7月至2006年6月应用DHS内固定治疗股骨粗隆间骨折156例,其中单纯DHS内固定86例(对照组),DHS内固定 中药内服70例(治疗组)。中药内服按骨折三期辨证施治,早期以行气消瘀为主,中期以接骨续筋为主,后期以补肝肾为主。结果156例中148例获随访,随访时间8个月～3年,平均20.7个月,其中对照组78例获随访,治疗组70例获随访,骨折愈合时间治疗组为(12.3±2.2)周,对照组为(15.8±2.5)周,两组比较有显著统计学意义(P<0.05);治疗组髋关节功能优良率达90%,对照组为76%,两组比较有显著统计学意义(P<0.05)。结论DHS内固定配合中药内服可有效缩短骨折愈合时间,改善髋关节功能。     

RNA干扰技术沉默Smad4基因表达对ECV304细胞增殖和迁移的影响

目的：探讨利用RNA干扰技术下调Smad4基因表达对人脐静脉内皮细胞增殖和迁移能力的影响，初步了解Smad4在血管生成中的作用。方法：设计并合成靶向人Smad4基因的小分子干扰RNA（small interfering RNA，siRNA）片段siRNA1和siRNA2，脂质体介导转染入人脐静脉内皮细胞株ECV304。应用实时定量RT-PCR和Western印迹法检测转染前后Smad4基因表达水平；应用细胞周期分析和羧乙基锗倍半氧化物（6-carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester，CFSE）－流式细胞仪检测ECV304细胞转染前后细胞增殖能力的变化；通过单层细胞划痕实验观察细胞转染前后迁移能力的变化。结果：从2条siRNA中成功筛选出1条siRNA，于RNA和蛋白水平可明显下调Smad4基因的表达；ECV304细胞转染Smad4的siRNA后，细胞的增殖和迂移能力明显增强。结论：利用RNA干扰技术能够筛选出高效的特异阻断Smad4基因表达的siRNA；Smad4基因表达下调能够明显促进血管内皮细胞的增殖和迁移。