利用锥体细胞失功能大鼠和先天性静止性夜盲大鼠对视锥与视杆通路振荡电位的分离研究

背景 振荡电位(OPs)是评估视网膜缺血缺氧性疾病视网膜功能变化的重要工具,利用视网膜退行性病变动物模型对视锥、视杆通路起源的OPs特点进行研究非常重要. 目的 在两种自发性视网膜退行性病变模型大鼠中分离视锥、视杆通路,对比分析视杆、视锥通路起源的OPs波的特点. 方法 采用雄性SD大鼠、锥体细胞失功能(RCD)大鼠、先天性静止性夜盲(CSNB)大鼠各6只,以RETI-scan视觉生理记录系统分别在暗适应(12h)和明适应(10 min)条件下,用不同强度的刺激光(-35、-25、-15、-5、0、5 db)进行刺激,记录各组大鼠的闪光视网膜电图(FERG),通过Matlab 7.0的Butterworth滤波提取OPs,采用快速傅里叶变换(FFT)对所得OPs进行频谱分析.结果 暗适应条件下SD大鼠和RCD大鼠的ERG均可见a波和b波,但CSNB大鼠b波阙如;明适应条件下,SD大鼠和CSNB大鼠可见b波,但RCD大鼠各波阙如.暗适应较高刺激光强度下,SD大鼠和RCD大鼠均有低频(主频)和高频(次频)两个明显的频峰,分别为75 ～ 110 Hz、90～120 Hz和90～ 120 Hz、110 ～ 135 Hz;不同刺激光强度下,CSNB大鼠只有一个频峰,为70～100 Hz.而明适应不同刺激光强度下,SD大鼠和CSNB大鼠均只有一个频峰,分别为75～95 Hz和70～85 Hz.明适应条件下与SD大鼠比较,CSNB大鼠b波隐含时延长,b波振幅明显下降,差异均有统计学意义(P＜0.05);暗适应条件下,RCD大鼠b波隐含时和振幅与SD大鼠比较,差异无统计学意义(P＞0.05);与SD大鼠比较,RCD和CSNB大鼠OPs波振幅下降,隐含时延长,差异均有统计学意义(P＜0.05);明适应条件下不同刺激光强度下CSNB大鼠OPs波的隐含时明显长于SD大鼠,振幅明显低于SD大鼠,差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 视锥、视杆通路起源的OPs有不同特性,自发性视网膜退行性改变大鼠的视杆OPs有两个频峰,正常情况下,视杆通路对OPs的贡献比视锥通路大.     

恒温摇动法纯化培养大鼠视网膜Mǖller细胞的技术研究

目的 建立一种新的纯化Mueller细胞的技术方法。方法 将原代培养后的混合性视网膜细胞固定在一个摇床平台上，保持在37℃，摇床转速调整到使培养液不生成泡沫的速度，过夜（18-24h)摇动后，将培养液上清弃去，通过免疫细胞化学的方法鉴定原代和摇动法得到的Mueller细胞的纯度。结果 原代培养的视网膜细胞有大量神经元和Mueller细胞混杂，摇动过程使得附着于Mueller细胞上的神经元细胞脱落，Mueller细胞的纯度通过GFAP确定可达95%以上。结论 恒温摇床摇动的方法，提供了一种快速可靠的纯化视网膜Mueller细胞手段。     

暗适应及明适应状态下正常SD大鼠视觉诱发电位的比较

目的 :探索明暗适应条件下正常SD大鼠视觉诱发电位 (visualevokedpotential,VEP)的区别 .方法 :大鼠都给予1 2h以上的暗适应 ,一组即时开始记录 ,另一组在 37cd·m-2的背景光下明适应 1 0min后再进行记录VEP .刺激光强为0 .0 1 1 ,0 .0 35 ,0 .1 1 ,0 .35 ,1 .1 ,3.5 ,1 1 ,35和 1 1 0cd·s·m-2 ,叠加 1 0 0次 ,不同光强间间隔 1～ 4min ,随光强增加而延长间隔时间 .结果 :正常SD大鼠在暗适应及明适应状态下均能记录出满意的波形 ,明适应时N1 波的潜伏期较暗适应时为长 .3.5cd·s·m-2 以上光强 ,两种适应状态下 ,可在 1 0ms左右见到一正向波 ,同时P1 及N1 波上叠加有小的子波 .结论 :视锥和视杆系统的视传导通路结构的可能差异导致了暗适应比明适应条件下潜伏期为短 ,高光强时出现的 1 0ms左右的正向波及P1 和N1 上的子波可能与机器设置、记录参数、以及其他皮质中枢的活动等有关 .     

缺氧对视网膜Müller细胞超微结构及GFAP表达的影响

目的探讨持续低流量缺氧条件下视网膜Müller细胞超微结构的改变及缺氧对神经胶质酸性蛋白(GFAP)表达的影响. 方法采用透射电镜、western blot方法对缺氧条件下培养的视网膜Müller细胞进行观察. 结果缺氧48 h后,视网膜Müller细胞的超微结构发生改变,细胞内GFAP表达较对照组增高. 结论持续低流量缺氧48 h,即可对视网膜Müller细胞造成一定的损伤.     

麻醉间隔时间对SD大鼠视觉电生理的影响

目的：观察短时间内重复麻醉对SD大鼠视觉电生理的影响．方法：采用RETl-scan系统，自制的银-氯化银角膜电极和不锈钢针状电极，观察重复麻醉对SD大鼠暗适应视网膜电图、振荡电位、明适应视网膜电图、20Hz闪烁反应和视觉诱发电位的变化．结果：麻醉间隔时间为12，24和48h组的明、暗适应视网膜电图，振荡电位和20Hz闪烁反映的结果波动很大，而麻醉间隔时间为72h组则与首次麻醉记录的结果相似．再次麻醉对大鼠诱发电位记录结果没有显性的影响．结论：结果表明在麻醉3d后，麻醉因素对视觉电生理检查结果的影响基本可以得到恢复，对同一大鼠进行重复视觉电生理检查时每次检查间隔3d以上，以消除麻醉本身对检查结果的影响．     

正常青年人暗室条件下颜色光多焦点视网膜电图的特点

目的：探索正常青年人在暗室条件下颜色光多焦点视网膜电图的特点，方法：应用德国RETIscan系统测定17例健康青年人(34只眼)暗室条件下红、蓝、绿3种颜色光及白光的多焦点视网膜电图，并进行统计学分析．结果：在4种测试条件下，多焦点视网膜电图大多均有双峰波的产生，其中在第一环出现双峰波的比例为红光7例(20.6％)，绿光23例(67．6％)，蓝光17例(50．0％)，白光9例(26．5％)；在第二环出现双峰波的数量为红光22例(64．7％)，白光28例(82．40h，)，而绿光和蓝光则均为双峰波(100％)．4种颜色光在第三，四，五环均呈现双峰波(100％)。在第一环为双峰波形的被试中，以后各环均为双峰波．各色光刺激下的多焦点视网膜电图波形中的第一个波峰的功率密度和峰时在不同环形分野上均有相似的变化趋势，而第二个波峰却不完全相同。结论：在暗室条件下4种测试条件多焦点视网膜电图的波形特点各不相同，环形野分析波形有其明显的特点．我们推测在此种测试条件下，第一个波来自于视锥系统，而第二个波来自于视杆系统。     

“瞎”老鼠什么都看不见吗?

视网膜色素变性(RP)是一种常见的遗传性致盲性疾病,视网膜退变(rd)小鼠与RP患者突变基因较一致,表型相似,对于研究RP有着重要的作用。研究发现,光照刺激能够使rd小鼠产生明显的瞳孔对光反射,且rd小鼠光协同性昼夜节律无明显改变,继而发现哺乳动物的视网膜上除了视锥、视杆细胞外,还有第三种感光细胞即内在感光型视网膜神经节细胞(ipRGCs)。通过对ipRGCs的发现及研究过程进行文献回顾,探讨ipRGCs的形态、分布、功能及研究意义。     

浅谈空勤人员健康鉴定工作的改进

空勤人员健康鉴定的目的是早期发现和治疗疾病、积极预防易患因素,以防止疾病的发生与发展,保持空勤人员的健康状态,降低停飞率[1],它对保障空军部队的战斗力有明显的促进作用。     

氢饱和生理盐水对视神经挫伤大鼠闪光VEP的影响

【摘要】 目的 探讨氢饱和生理盐水对视神经挫伤大鼠视觉功能的保护作用。设计 实验 性研究。研究对象 健康成年雄性SD大鼠12只。方法 12只SD大鼠随机分为氢饱和生理盐水组和对照 组,每组6只,均选取左眼作为实验眼,右眼作为正常对照。利用压力恒定的无创反向镊在大鼠视 神经球后2 mm处夹持10 s建立视神经挫伤模型。氢饱和生理盐水组大鼠按5 ml/kg/d氢饱和生理盐 水腹腔注射,对照组大鼠按照相同剂量给予生理盐水腹腔注射,连续2周。在夹伤前及夹伤后1、3 、5、7、9、11、14天分别检测大鼠左眼F-VEP,观察P1波的峰时值及振幅的变化。主要指标 F-VEP 的P1波峰时值和振幅。结果  损伤后第1天,P1波峰时值氢饱和生理盐水组和对照组分别为（88.61 ±2.81）ms和（88.33±1.51）ms,与损伤前的（72.45±1.47）ms和（72.44±1.03）ms相比,差 异均有统计学意义（P均＜0.01）。损伤后第3天,氢饱和生理盐水组大鼠的P1波峰时值缩短为 （80.28±1.25）ms,到损伤后14天一直在该水平范围波动,而对照组大鼠的P1波峰时值为（88.61 ±1.20）ms,各时期的氢饱和生理盐水组大鼠与对照组大鼠的P1波峰时值相比明显缩短,差异均有 统计学意义（P均＜0.001）。  结论 氢饱和生理盐水能够改善大鼠视神经挫伤后F-VEP的峰时值延 长,对其视觉传导功能起到一定的保护作用。（眼科, 2012, 21： 409-413）