RNA干扰抑制PC-3细胞survivin基因表达并诱导细胞凋亡的实验研究

目的:研究RNA干扰抑制人前列腺癌PC-3细胞survivin mRNA和蛋白表达并诱导细胞凋亡的效果。方法:设计、构建针对survivin基因的RNAi表达载体,分别以质粒A、B组,阴性序列组和空白对照E组用脂质体法转染PC-3细胞,应用RT-PCR及Western印迹、流式细胞术检测其对survivin mRNA和蛋白表达并诱导细胞凋亡的效果。结果:各组细胞survivin蛋白的表达强度分别为(18.94±0.63)%、(16.35±0.23)%、(46.41±0.76)%、(46.20±1.47)%。各组细胞中survivin mRNA的表达强度分别为(27.94±1.43)%、(24.51±1.37)%、(49.46±0.71)%、(48.49±1.32)%。各组细胞凋亡率分别为(12.80±1.33)%、(16.48±1.00)%、(3.03±0.62)%、(2.96±0.41)%。统计学表明构建的两种阳性表达载体均有效抑制了survivin mRNA和蛋白表达并诱导细胞凋亡。结论:RNAi可有效抑制PC-3细胞survivin mRNA和蛋白表达,并诱导细胞凋亡。     

人巨细胞病毒被膜磷蛋白pp65的检测及其在肾移植的临床应用

目的建立一种快速、简便诊断肾移植受者人巨细胞病毒（human cytomegalovirus，HCMV）活动性感染的方法。方法运用免疫组织化学的催化信号扩增法检测外周血白细胞中的人巨细胞病毒磷蛋白（phosphoprotein，pp65），并与抗HCMV-IgM检测法、巨细胞病毒信使核糖核酸（pp67-mRNA）检测法作比较。结果检测53例肾移植受者中，HCMVpp65抗原阳性26例，IgM抗体阳性17例，pp67-mRNA检测阳性27例，pp65抗原阳性细胞指数为（71±45）个／2×10^5个白细胞（WBC），而有症状的CMV病16例，抗原阳性细胞指数为（83±46）个／2×10^5个WBC。pp65的敏感性、特异性、阳性预测值与阴性预测值分别是100％、73．0％、61．5％和100％。结论该法敏感，简便，可作为肾移植术后HCMV病的早期诊断，并可指导抗病毒治疗。     

不同介入模式治疗伴失代偿性肝硬化肝癌

目的 探讨伴失代偿性肝硬化原发性肝癌(HCC)不同介入模式的临床价值.方法 在内科治疗稳定后,132例伴肝功能失代偿HCC患者接受不同介入模式治疗;36例采用肝动脉化疗栓塞(TACE,A组),54例采用肝动脉节段性化疗栓塞治疗(S-TACE,B组),42例采用S-TACE后序贯射频消融(RFA)和无水乙醇局部注射(PEI)的综合介入治疗(C组).结果 随访3～48个月,A组、B组和C组患者AFP复常率分别为23.3%、60.5%(P＜0.05)和75.0%(P＜0.01),瘤体缩小(＞50%)分别占8.3%、31.5%(P＜0.05)和54.8%(P＜0.01和P＜0.05),中位生存期分别为4.1个月、9.4个月(P＜0.05)和14.1个月(P＜0.01和P＜0.05),累计生存率6个月分别为22.2%、51.8%(P＜0.05)和78.6%(P＜0.05和P＜0.01),12个月分别为5.6%、31.5%(P＜0.05)和40.5%(P＜0.05),24个月分别为0、9.3%和19.1%(P＜0.05);单变量分析显示包括HBV DNA在内的14项因素与预后显著相关,多因素COX模型分析显示肝功能Child-Pugh分级、ICGR15、门静脉癌栓、治疗模式及AFP术前升高者介入治疗后变化与预后显著相关.结论 综合介入治疗是伴肝功能失代偿HCC的有效治疗方法,对HBV DNA阳性患者应该考虑抗病毒治疗.     

拟诊高血压肾硬化患者的临床病理分析

目的 探讨拟诊高血压肾硬化(HN)患者的临床特征及影响预后的因素，以期提高临床对该病诊断及治疗的认识。方法 回顾性分析我科63例最初拟诊HN且有肾活检诊断的患者的临床资料。根据肾脏病理学结果分为原发性肾炎(PN)组、良性肾小动脉硬化症(BN)组及恶性肾小动脉硬化症(MN)组，比较各组间临床参数及组织学特征。对确诊HN的患者分析影响其预后的临床及病理因素。结果 63例临床拟诊为HN的患者经肾组织活检病理诊断，37例(58.7%)为BN；12例(19.0%)为MN；14例(22.2%)为PN，HN诊断符合率为77.7%。BN组患者男性较多，年龄较大，高血压家族史比例及高血压病程明显高于PN组，而PN组尿蛋白定量高于BN及MN组。MN组左心室心肌重量指数(LVMI)高于PN组。BN组视网膜病变主要为0~Ⅱ级，占78%，而MN组则主要为Ⅲ~Ⅳ级。PN组球性硬化肾小球比率及小管慢性化指数(CI)积分均高于MN及BN组。MN及BN组肌内膜细胞增殖、小动脉玻璃样变等血管病变均较PN组明显，其中BN组改变最为显著。多因素回归分析提示收缩压(SBP)、尿蛋白定量、尿酸(UA)、总胆固醇(TC)是影响肾脏病进展的危险因素，优势比分别为2.563、2.467、2.323、2.357。结论 临床拟诊HN的患者不能排除PN。部分HN与PN患者临床表现相似，单纯依据病史及实验室检查难以区分。肾组织病理检查是确诊的最佳手段。 SBP、尿蛋白、TC、UA等因素可加速HN的病变进展。     

海南裂叶山龙眼叶超临界提取物化学成分的气相色谱-质谱联用分析（Ⅰ）

目的对海南裂叶山龙眼叶超临界提取物进行分析，为进一步开发利用该资源提供依据。方法采用CO2超临界流体萃取海南裂叶山龙眼叶的脂溶性部位，气相色谱-质谱联用（GC-MS）法鉴定化学成分，归一化法测定各成分相对含量。结果从海南裂叶山龙眼叶超临界提取物中共分离出55个组分，鉴定了其中20个化合物，占萃取物总量的89．78％，其中含量高于5％的有7个，主要为邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（15．42％）；百秋里醇（13．86％）；二十九碳烷（11．37％）；1-脱氢睾酮（7．83％）；3，5-二烯豆甾烷（6．79％）；3-甲基二环[4．1．0]庚烷（5．18％）；（1．α．，2．β，5．α．）-2，6，6-三甲基二环[3．1．1]庚烷（5．09％）。结论海南裂叶山龙眼叶的提取物中含有萜类、酯类、烷烃、激素、甾类、维生素、生物碱等各类化学成分，为海南裂叶山龙眼的开发奠定了研究基础。     

再次肝移植治疗移植肝失功能22例报告

目的 总结再次肝移植治疗移植肝失功能的临床经验。方法 回顾分析2004年1月至2006年6月期间中山大学附属第三医院施行22例再次肝移植受者的临床资料，结合文献加以讨论。再次肝移植的原因分别为移植术后胆道并发症（12例）、移植术后肝癌复发（4例）、肝动脉栓塞（2例）、肝动脉狭窄（2例）以及乙肝复发（2例）。再次移植率为3．62％，供肝植入均采用改良背驮式肝移植技术。结果 全组无手术死亡，8例随访至今分别存活21、14、8、3个月各1例，12、1个月各2例；14例存活2周到28个月不等。首次肝移植术后8～30d行再次肝移植病人围手术期病死率最高，为66．7％；1年内死亡10例，主要死亡原因为感染（60％）。结论 再次肝移植是移植肝失功能的惟一有效的治疗方法，正确掌握手术时机及适应证，钻研手术技巧，合理的个体化免疫抑制方案以及围手术期有效的抗感染治疗是提高再次肝移植病人存活率的关键。     

社区空巢老人焦虑抑郁状况及其影响因素调查

目的探讨社区空巢老人的焦虑、抑郁状况，并分析其主要影响因素。方法采用焦虑自评量表（SAS）、老年抑郁量表（GDS-15）和一般情况问卷，对上海市闸北区芷江西社区的229名空巢老人进行入户调查。结果229名空巢老人中，63名（27．5％）存在焦虑症状，35名（15．3％）有抑郁症状。Logistic多元回归分析发现，影响空巢老人焦虑症状发生的主要因素为躯体疾病、宗教信仰、娱乐活动；影响其抑郁症状发生的主要因素包括躯体疾病、既往职业、子女探望间隔时间、亲友联系。结论空巢老人的焦虑、抑郁发生率较高，严重影响了其心理健康；主要影响因素为躯体疾病种类多、子女探望时间间隔长、既往无职业、与亲友联系少等；政府、民政部门、医护人员、社区居委会及家庭成员应高度重视空巢老人的心理状况，制定相应的干预体系和干预措施。     

FK506-壳聚糖膜与体外培养雪旺细胞生物相容性的研究

目的 探讨FK506-壳聚糖膜片与培养的雪旺细胞生物相容性.方法 将生长状况和纯度较好的第3代雪旺细胞,分别传代接种于含有FK506-壳聚糖膜片、单纯壳聚糖膜片的培养皿中培养,以盖玻片作为对照组.计算3组雪旺细胞倍增时间、雪旺细胞纯度;用MTT法比较不同膜片上雪旺细胞的生长活力,绘制生长曲线;S-100免疫荧光染色.结果 雪旺细胞倍增时间对照组为5.9 d,单纯壳聚糖膜片及FK506-壳聚糖膜片组均为4.0 d;雪旺细胞纯度分别为80%、89%,93%;雪旺细胞增殖情况以FK506-壳聚糖组最佳,单纯壳聚糖组次之,对照组最差;各组雪旺细胞均呈S-100阳性,FK506-壳聚糖组与单纯壳聚糖组雪旺细胞排列呈典型的漩涡状或栅栏状.结论 FK506-壳聚糖膜片具有更显著的组织相容性与生物功能性,并保持了雪旺细胞的生物学特性.     

小针刀辅助自体脂肪颗粒移植在面部除皱及凹陷充填中的应用

目的探讨小针刀辅助自体脂肪颗粒注射除去额部、眉间、鼻唇沟等部位皱纹及充填面部凹陷的效果。方法利用自制小针刀,离断真皮与其下方的"纤维粘连",然后用自体脂肪颗粒注射除皱和充填凹陷部位。结果本组共68例。修复面积最大约10cm×8cm,最小约1.5cm×0.5cm。随访45例,随访时间3～18个月,效果满意或基本满意。结论小针刀辅助自体脂肪移植具有操作简单、快捷、价廉、安全、无排异、不留瘢痕、术后恢复快等优点,患者易于接受,是除去额部、眉间、鼻唇沟等部位皱纹及填充面部凹陷的有效方法。     

完全性胸腹腔内脏反位合并十二指肠壶腹周围癌一例报告与文献复习

目的总结完全性胸腹腔内脏反位合并十二指肠壶腹周围癌的临床诊治方法。方法报道2006年3月收治的1例极为罕见的完全性胸腹腔内脏反位合并十二指肠壶腹周围癌行胰十二指肠切除术的病例,并复习国内外相关文献。结果本例患者病理诊断为十二指肠乳头及壶腹部腺癌Ⅰ-Ⅱ级。术后1周胆红素降至正常;但2周后出现胃-空肠吻合输出袢粘连性不完全性梗阻,经内镜下置管、鼻饲、营养支持、针灸等处理,40d后痊愈出院。经检索,全球自1936-2006年间报道的全胸腹腔内脏反位合并恶性肿瘤的患者仅15例;其中只有5例全胸腹腔内脏反位合并胰头与壶腹周围癌的报道。结论完全性胸腹腔内脏反位合并肿瘤时,若无明显禁忌证,应同样予以积极的外科治疗,术中操作应注意完全相反的解剖学结构。