成人脂肪间充质干细胞体外定向诱导分化为心肌样细胞的实验观察

目的:探索成人脂肪组织来源的间充质干细胞(ADMSCs)体外分离、培养方法,并化学诱导使其向心肌细胞分化,为心肌再生医学提供理想的种子细胞来源. 方法:体外分离成人ADMSCs并进行传代培养,5-氮胞苷(5-aza)诱导其向心肌细胞分化. 分别于诱导后14,21,28 d时用免疫细胞化学染色、RT-PCR法进行心肌细胞鉴定. 结果:ADMSCs经5-aza诱导后14 d时细胞形态趋向于心肌细胞,诱导28 d免疫细胞化学显示心肌特异性肌钙蛋白I(cTN-I)、结蛋白(Desmin)表达阳性,RT-PCR检测心肌β-肌球蛋白重链(Cardiac β-MHC)基因表达阳性. 结论:成人脂肪组织存在丰富的间充质干细胞且易于分离扩增,体外5-aza诱导可使其向心肌细胞分化,可做为心肌再生医学的理想种子细胞.     

中药灯盏细辛中酚酸类化合物的结构与活性研究

目的 研究中药灯盏细辛的化学成分。方法 利用硅胶柱层析等分离手段从灯盏细辛[Erigeron breviscapus(Vant.)Hand-Mazz]的醋酸乙酯部位分离得到2个化合物，采用波谱方法（IR，MS，^1H-NMR,^13C-NMR,2D-NMR)鉴定了它们的结构。结果 2个酚酸类化合物分别为：5－O－咖啡酰基－奎宁酸甲酯（I）和4－O－咖啡酰基－奎宁酸甲酯（Ⅱ），结论 化合物Ⅰ，Ⅱ为首次从灯盏细辛中分得的酚酸类化合物。药理活性研究显示，化合物Ⅰ，Ⅱ可明显抑制VEGF诱导的血管高通透性（P＜0．001）。     

The incidence of prostate cancer in a screening population with a serum prostate specific antigen between 2.5 and 4.0 ng/ml: relation to biopsy strategy

PURPOSE: It has recently been suggested that the diagnostic threshold for the prostate specific antigen (PSA) assay be lowered to enhance prostate cancer detection. A 22% incidence of prostate cancer has been reported in men with PSA between 2.5 and 4.0 ng/ml. We designed a study to confirm this observation. MATERIALS AND METHODS: Men who participated in our free early detection program and who had serum PSA between 2.5 and 4.0 ng/ml were asked to undergo prostate biopsy. Of 268 eligible men 151 (56%) agreed to participate in this free trial. All men underwent biopsy using an 11-core multisite directed biopsy scheme. All biopsy cores were color coded for location specificity and examined by 1 pathologist. RESULTS: Cancer was identified in 24.5% (37 of 151) of the men biopsied. The median age of men with cancer was 62 years (range 43 to 74). Conventional systematic sextant biopsies, which accounted for 6 of the 11 cores, detected 73.0% (27 of 37) of the cancers and the alternate site biopsies identified the remaining 10. Gleason score was 6 in 25 men, 3 + 4 in 5, 4 + 3 in 4 and 8 or greater in 3 (median Gleason score 6). There were 14 men who had 1 core positive for cancer, 9 had 2 and 14 had more than 2 (median number of positive cores 2). Of the 14 men with 1 positive core 11 had a less than 3 mm focus of cancer and 8 had only a positive alternate site biopsy. There were 11 cases of abnormal results on digital rectal examination, 5 of which were cancer, and 31 cases of abnormal results on ultrasonography, 13 of which were cancer. Median biological variability in PSA was +/-15% (range 0.4% to 440.0%). CONCLUSIONS: We found a significant incidence of cancer (24.5%, 37 of 51) in men with serum PSA between 2.5 and 4.0 ng/ml. In our study 67.6% of the detected cancers were significant based on the biopsy data. If the PSA threshold is lowered the conventional systematic sextant technique may be preferable to an extended strategy.     

携带HGF基因的减毒沙门氏菌对大鼠胃溃疡愈合及CD34表达的影响

目的:通过对乙酸性胃溃疡大鼠口服携带肝细胞生长因子(HGF)基因的减毒鼠伤寒沙门氏菌(St)后检测胃溃疡愈合情况及局部和CD34蛋白表达的研究,探讨基因药物St-HGF对乙酸性大鼠胃溃疡的治疗作用.方法:建立乙酸性胃溃疡大鼠77只,并随机选出5只,给予携带绿色荧光蛋白(GFP)基因的st后观察GFP在大鼠胃壁中的分布,剩余大鼠随机分为3组(n=24):St-HGF治疗组,St治疗组,NaHCO3对照组;增菌后各组动物于造模第2日起灌胃相应药物,隔日一次,分别于给药后7,14,21 d取胃溃疡组织行HE病理组织学观察,免疫组化法检测CD34蛋白的表达.结果:给药后7 d光镜下溃疡部位黏膜消失,局部有大量坏死组织,各组胃黏膜上皮爬行不明显;给药后14,21 d,St-HGF组黏膜上皮增生较另两组快(P<0.01);给药后7,14,21 d,CD34蛋白在St-HGF组的表达高于另两组(P<0.05),组间有统计学差异.结论:St-HGF可促进实验性大鼠胃溃疡黏膜上皮修复和溃疡面血管增生,加快溃疡愈合.     

青海高原地区胃癌患者MICA基因在mRNA及其蛋白水平表达

目的:研究青海高原地区胃癌组织中MICA基因在mRNA水平与其蛋白表达及相关关系.方法:采用RT-PCR技术检测41例高原地区胃癌组织和相应的癌旁粘膜组织中MICA mRNA表达,采用免疫组化SP法检测MICA蛋白在胃癌和癌旁组织中的表达,Spearman相关关系检验分析它们之间的相关性.结果:青海高原地区胃癌组织MICA mRNA的表达水平高于癌旁组织(P＜0.05).胃癌组织MICA蛋白表达在癌旁组织中为(26.9%,11/41)与胃癌组织阳性率为87.8%(36/41),高分化组(75.0%,6/8),中分化组(83.3%,10/12),低分化组(95.2%,20/21),之间差异有统计学意义(P＜0.05),而与肿瘤发生的性别、年龄、淋巴结转移无关(P＞0.05).Spearman相关分析显示,MICA蛋白表达水平与mRNA的表达水平呈正相关(P＜0.01).结论:MICA的过度表达在青海高原地区胃癌的发生发展过程中起着重要作用,胃癌组织中MICA mRNA以及蛋白水平的升高之间存在密切正相关.     

体外受精-胚胎移植足月妊娠胎盘中表皮生长因子受体的表达

①目的探讨体外受精-胚胎移植(IVF-ET)足月妊娠胎盘中表皮生长因子受体(EGFR)的表达及其变化。②方法取IVF-ET足月分娩的胎盘组织标本30例,并以30例相同孕周自然妊娠分娩的胎盘组织标本为对照组,应用免疫组织化学SP法染色,通过Fromowitz综合计分法检测EGFR。③结果EGFR主要表达于胎盘的合体滋养细胞(ST)的胞膜和胞浆中,染色强度以刷状缘最强,IVF-ET组胎盘EGFR染色强度较正常对照组增强,差异有统计学意义(P<0.05);IVF-ET组胎盘重量和新生儿体重与正常对照组比较,无显著性差异(P>0.05);新生儿出生体重与胎盘重量呈高度相关性(r=0.709,P<0.01)。④结论IVF-ET组胎盘EGFR表达增强,可能与COH药物作用或黄体支持中母体体内超生理剂量孕酮的作用有关。     

Ad-HGF对肺泡Ⅱ型上皮细胞的转染表达及增殖效应

目的:观察Ad-HGF对肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ细胞)的转染表达及增殖效应.方法:以不同转染强度(50,100,200 MOI)Ad-GFP转染原代培养大鼠ATⅡ细胞,感染后48 h用流式细胞仪检测转染效率.并以最佳感染强度Ad-HGF转染ATⅡ细胞,ELISA方法检测转染后48, 72 h上清中HGF的表达水平.用MTT法检测表达产物对肺泡上皮细胞的效应.结果:感染强度为100 MOI时,对ATⅡ细胞的转染效率已达89.61%,以100 MOI的Ad-HGF转染6×105细胞后48, 72 h上清中HGF的表达分别为(249.4±1.8) ng和(168.0±26.1)ng,且表达产物对ATⅡ细胞有明显的促增殖作用.结论:Ad-HGF可有效转染ATⅡ细胞并在细胞中表达,表达产物对该细胞有明显的促增殖作用.     

生存素、MMP-2和nm23在胃黏膜及胃癌组织中的表达

目的 探讨生存素、MMP-2和nm23蛋白在胃黏膜及胃癌组织中的表达及相关性.方法 应用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶免疫组化法检测正常胃黏膜、不典型增生胃黏膜及胃癌组织中的生存素、MMP-2和nm23蛋白的表达.结果 正常胃黏膜、不典型增生胃黏膜及胃癌组织中生存素和MMP-2阳性率呈增加趋势,nm23蛋白呈递减趋势;生存素、MMP-2及nm23的表达与胃癌组织浸润深度和有无淋巴结转移密切相关(P<0.05),与有无脉管侵犯、年龄及性别无关(P<0.05);生存素与MMP-2表达呈正相关(r=0.957,P<0.001),生存素及MMP-2均与nm23表达呈负相关(r=-0.957,P<0.001).结论 生存素与MMP-2的高表达可能是胃癌发生发展的重要因素之一,可以作为判断胃癌有意义的生物学标志物.     

二维及频谱多普勒诊断甲状腺肿瘤的应用价值

目的:应用二维及频谱多普勒检测甲状腺肿瘤血管,并进行分析,探讨其在甲状腺肿瘤诊断和鉴别诊断中的价值,更好地为临床服务。方法:入选35例甲状腺良性肿瘤(结甲21例,腺瘤14例)和21例甲状腺癌患者术前均行二维及频谱多普勒检查,包括最高流速(Vmax),阻力指数(RI)。对良恶性肿瘤的二维图像特征及血流动力学参数差异进行分析。结果:甲状腺良恶性肿瘤的二维图像特征及血流动力学参数(Vmax、RI)存在极显著差异(P<0.01)。结论:二维及频谱多普勒对鉴别甲状腺良恶性肿瘤具有重要意义。     

心肺复苏中即时气管插管与延时气管插管的救治效果对比

【目的】总结研究急诊医护人员在心肺复苏无困难情况下实施即时气管插管的重要性。【方法】对107例心肺复苏患者随机分为治疗组为无困难插管组（即时插管）54例和对照组为困难插管组（延时插管）53例，通过观察两组患者心肺复苏成功率与存活率，比较即时插管与延时插管的救治效果。【结果】即时插管的患者心肺复苏的成功率为40．7％，存活率为18．5％；延时插管的患者心肺复苏的成功率为11．3％，存活率为1．9％，两组相比较差异显著（P〈0．05）。【结论】急诊医护人员在心肺复苏患者咽部无障碍的情况下即时气管插管可提高心肺复苏的成功率与患者的存活率。