鞘内注射TRESK基因重组腺病毒对坐骨神经分支选择性损伤大鼠的镇痛作用

目的研究鞘内注射TRESK基因重组腺病毒(p Ad/CMV/V5-DEST-TRESK)对坐骨神经分支选择性损伤(SNI)大鼠痛觉过敏的影响。方法雄性SD大鼠36只,随机分为6组(n=6):Ⅰ组为空白对照组;Ⅱ组为假手术组;Ⅲ组为SNI模型组;Ⅳ组大鼠制备SNI模型后鞘内单次注射生理盐水25μl;Ⅴ组和Ⅵ组大鼠制备SNI模型后,鞘内分别单次注射滴度为1.31×109TU/ml的阴性腺病毒和p Ad/CMV/V5-DEST-TRESK。各组大鼠于术前1 d及术后1 d、3 d、5 d、7 d、14d分别测定机械痛阈和热痛阈;术后14 d检测L4,5术侧背根神经节(DRG)的TRESK蛋白表达。结果Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组、Ⅵ组术后1 d、3 d、5 d、7 d、14 d的机械痛阈明显低于Ⅰ组(P0.05),Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组5 d、7 d、14 d的机械痛阈明显低于Ⅵ组(P0.05);与术前比较,Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组、Ⅵ组术后1~14 d的机械痛阈明显降低(P0.05)。Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组、Ⅵ组L4,5术侧DRG的TRESK蛋白表达明显低于Ⅰ组(P0.05),Ⅵ组L4,5术侧DRG的TRESK蛋白表达明显高于Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组(P0.05)。结论鞘内注射p Ad/CMV/V5-DEST-TRESK可上调SNI大鼠DRG的TRESK蛋白表达,减轻SNI大鼠的痛觉过敏。     

雷米芬太尼复合丙泊酚靶控输注用于纤维支气管镜检查

目的 探讨雷米芬太尼复合丙泊酚靶控输注全凭静脉麻醉在纤支镜检查中应用的临床效果观察.方法 将96例择期行纤维支气管镜检查的患者,随机分为两组,对照组为瑞芬太尼复合丙泊酚恒速输注组,TCI组为瑞芬太尼复合丙泊酚靶控输注组.结果 麻醉效果两组相比差异无显著性,但诱导时间、清醒时间和离院时间两组间差异有显著性(P<0.05).结论 丙泊酚复合瑞芬太尼靶控输注,麻醉诱导迅速,维持平稳,停药后清醒快,患者可以更早离院.     

靶控输注瑞芬太尼在小儿非肌松药气管插管中的应用

目的 观察不同血浆浓度的瑞芬太尼复合丙泊酚时,在小儿不使用肌松药所提供的气管插管条件和心血管反应.方法 45例择期手术忠儿,随机分为3组,血浆浓度分别为Ⅰ组2 ng/mL,Ⅱ组为3 ng/mL,Ⅲ组为4ng/mL.靶控输注瑞芬太尼5min后,开始靶控榆注丙泊酚(2.5ug/mL),10min后进行气管插管,失败后则增加瑞芬太尼靶控浓度1 ng/mL,10min后重复,再次失败则退出本研究.在瑞芬太尼输注前,丙泊酚开始榆注时置入喉镜前以及插管后1min,分别记录气管插管评分、平均动脉压和心率,同时记录不良反应和血管活性药物的使用.结果 第1次插管评分,2ng/mL组、3ng/mL组及4ng/mL组分别为(9.5±2.3)、(7.1±2.4)和(5.6±1.1)分;第1次插管成功率分别为9/15(60%)、11/15(73%)和(13/15)87%;第2次插管成功率分别为3/6(50%)、3/4(75%)和2/2(100%).各组心率均有下降,以3ng/mL和4ng/mL组尤其明显;动脉压显著下降则见于4 ng/mL组.2 ng/mL组患儿插管后较插管前相比心率与血压明显升高.高浓度瑞芬太尼组需用血管活性药物比例增加.结论 小儿固定丙泊酚TCI血浆浓度2.5ug/mL,不使用肌松药时,瑞芬太尼3、4ng/mL血浆浓度可基本满足插管条件.随瑞芬太尼TCI浓度增加,插管成功率提高,但同时心率减慢发生率也明显上升.     

硬膜外阻滞期间反馈靶控输注异丙酚清醒镇静的临床研究

目的评价脑电双频谱指数(BIS)作为反馈靶控输注异丙酚在硬膜外阻滞期间清醒镇静的可行性。方法将50例在硬膜外阻滞下完成择期手术的病人,随机分为靶控输注组(TCI组),反馈靶控输注组(FTCI组),每组25例。以1.0μg/kg为初始靶控浓度开始输注,在效应室异丙酚浓度达到平衡后3min,将靶控浓度增加至1.8μg/ml。TCI组整个手术过程中维持此浓度不变。FTCI组5min后开启BIS反馈系统,当BIS>75时,持续进行TCI,BIS<75停止TCI。整个调控由脑电监测仪器控制输注泵自动完成。记录两组病人麻醉前(T1)、开启BIS反馈系统前(T2)、切皮时(T3)、腹腔探查时(T4)、手术60min时(T5)、术毕停异丙酚输注时(T6)、病人清醒时(T7)等各时点BIS、MAP、HR、SPO2的参数及OAA/S评分,并记录两组病人麻醉时间、异丙酚总用量、平均给药速度、意识恢复时间,计算术中OAA/S、BIS、MAP、评分的最大值和最小值之差,分别表示为△OAA/S、△BIS、△MAP。随访有否术中知晓。结果与T1比较,两组患者在T2时BIS、MAP、HR均下降(P<0.05),T4时MAP、HR升高(P<0.05)。与FTCI组比较,TCI组患者在T4时BIS、MAP、HR升高,而在T6时上述几项指标均下降(P<0.05),术中△OAA/S、△BIS、△MAP升高(P<0.05)。FTCI组病人异丙酚总用量犤(410±33)mg犦显著低于TCI组犤(528±59)mg犦(P<0.01)。结论应用BIS值反馈靶控输注异丙酚在硬膜外阻滞期间的清醒镇静,可更加合理地评估镇静的深度,防止术中知晓,减少异丙酚用量,加快病人清醒,安全有效,较TCI更适用于临床。     

恩丹西酮、地塞米松联合应用防治腹腔镜术后PCIA恶心呕吐的临床观察

目的观察恩丹西酮、地塞米松联合用于防治腹腔镜手术后病人静脉自控镇痛(PC IA)的恶心、呕吐效果。方法择期行腹腔镜手术ASAⅠ-Ⅱ级病人140例随机分为4组:Ⅰ组:对照组,30例,术后静注生理盐水5 m l;Ⅱ组:恩丹西酮组,35例,术后静注恩丹西酮4 mg;Ⅲ组:地塞米松组35例,术后静注地塞米松10 mg;Ⅳ组:联合组,40例,术后静注恩丹西酮4 mg 地塞米松10mg。术后均接术后自控镇痛泵(PCA)开始止痛,观察术后24 h恶心呕吐情况。结果24 h内Ⅰ组恶心13例,呕吐10例;Ⅱ组恶心8例,呕吐5例;Ⅲ组恶心10例,呕吐3例;Ⅳ组恶心4例,呕吐1例。后3组恶心呕吐发生率明显低于对照组(P<0.01〉,第Ⅳ组又明显低于第Ⅱ、Ⅲ组(P<0.05)。结论恩丹西酮与地塞米松均能降低腹腔镜手术后PC IA的恶心、呕吐发生率,但二者联合应用效果更佳。     

大鼠TRESK基因重组腺病毒载体的构建

目的 构建大鼠TRESK基因重组腺病毒载体.方法 从大鼠背根神经节细胞中克隆TRESK全长cDNA,进行PCR鉴定及DNA测序验证,构建以CMV启动子转录调控的pAd/CMV/V5DEST-TRESK.转化DH5α大肠杆菌,挑选阳性重组克隆行PCR鉴定并行DNA测序.将测序正确的质粒经PacⅠ酶切线性化,转染包装293T细胞,包装产生腺病毒,逐孔稀释滴度法测定病毒滴度.结果 从大鼠背根神经节细胞中克隆的TRESK全长cDNA为781 bp,DNA测序验证DNA序列与GeneBank 中收录的大鼠TRESK序列完全一致.以pAD-GFP空载体为对照,pAD/CMV/V5-DEST-TRESK gDNA为模板的PCR扩增,目的 片段781 bp,鉴定结果 与预期相符.腺病毒滴度为1.31×109 TU/ml.结论 本研究成功地构建了大鼠TRESK基因重组腺病毒载体:pAD/CMV/V5-DEST-TRESK.

Abstract：

Objective To construct rat TRESK gene recombinant adenovirus expression vector.Methods TRESK full-length cDNA was cloned from rat dorsal root ganglion cells and confirmed by RT-PCR and sequencing. pAd/CMV/V5-DEST-TRESK was then constructed under the control of CMV-promotor. DH5α colibacillus was translated and the positive recombinants were subsequently identified by PCR and DNA sequencing. 293T cells were cotransfected and packed to produce adenovirus. Results The titer of virus was tested using Hole-by-dilution titer method. The full length of TRESK from rat dorsal root ganglion cells is 781 bp. It was demonstrated that the DNA sequencing was completely consistent with TRESK sequencing of rat recorded in GeneBank. The PCR amplification of the pAd/CMV/V5-DEST-TRESK gDNA was matched with pAD-GFP blank vector as anticipated. The titer of the concentrated virus was 1.31×109 TU/ml. Conclusion Rat TRESK gene recombinant adenovirus vector is constructed successfully.