SA/mIL15双功能融合蛋白的制备及其生物学鉴定

目的:制备链亲和素(SA)标记的鼠白细胞介素-15融合蛋白SA-mIL15和mIL15-SA,并研究其生物学功能。方法:构建pET24a-SA-L-mIL15和pET21a-mIL15-L-SA重组表达质粒,在大肠杆菌中表达融合蛋白SA-mIL15和mIL15-SA,对所表达的蛋白分别采用镍金属螯合(Ni-NTA)层析和阴离子交换(DEAE)层析进行纯化,透析复性。MTT法检测融合蛋白对ConA刺激的小鼠脾淋巴细胞增殖活性,流式细胞术(FCM)分析融合蛋白对生物素化的小鼠前列腺癌(RM-1)细胞表面锚定修饰效率。结果:SA-mIL15和mIL15-SA在大肠杆菌中实现了高效表达,约占细菌总蛋白的20%。制备的SA-mIL15和mIL15-SA融合蛋白纯度达到95%,并具有双重活性,即:mIL15促进ConA激活的小鼠脾淋巴细胞的增殖活性和SA介导的高效结合至表面已生物素化的RM-1细胞的功能(表面锚定修饰效率均大于95%)。其中,SA-mIL15双功能融合蛋白促进ConA激活的小鼠脾淋巴细胞增殖活性为1×106IU/mg,mIL15-SA活性为2×105IU/mg。结论:SA/mIL15双功能融合蛋白具有双重活性,为mIL15表面锚定修饰的肿瘤细胞疫苗的研制奠定了基础。     

七项血清自身抗体联合检测在肺癌诊断中的价值

目的分析7项血清自身抗体P53、PGP9.5、SOX2、GAGE7、GBU4-5、MAGEA1和CAGE在肺癌患者中的临床诊断价值。方法采用ELISA法检测114例肺癌患者和194例肺部良性病变患者血清中7项自身抗体的表达水平并比较两组阳性表达率的差异,通过绘制ROC曲线比较7项自身抗体单项及联合检测在肺癌中的诊断效能,分别分析7项自身抗体与肺癌患者的临床病理特征的关系。结果肺癌组7项自身抗体表达水平及阳性率均明显高于非肺癌组,差异均具有统计学意义(P0.05),7项自身抗体联合检测诊断肺癌患者灵敏度为57.89%,特异度为82.13%,AUCROC为0.69,其灵敏度和AUCROC均高于各自身抗体单项检测,并且GAGE7、MAGEA1和CAGE与肺癌患者的TNM分期具有相关性(χ~2=11.897,χ~2=8.720,χ~2=9.146;P=0.008,P=0.033,P=0.027)。结论 7项血清自身抗体联合检测可有效提高肺癌辅助诊断水平。     

卡培他滨节拍化疗联合三维适形放疗对晚期老年食管癌患者血清肿瘤标志物、VEGF、CRP及基质金属蛋白酶水平的影响

目的观察在晚期老年食管癌患者中,应用卡培他滨节拍化疗联合三维适形放疗的方案对其临床疗效、不良反应及对血清肿瘤标志物、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、C反应蛋白(c-reactionprotein,CRP)及基质金属蛋白酶水平的影响.方法回顾性分析2011-04/2016-04温州医科大学附属第一医院收治的130例晚期老年食管癌的临床资料,其中60例患者给予PF化疗方案(顺铂75 mg/m~2,d1,5-氟尿嘧啶1 g/m~2,d1-d4;每28 d一个化疗疗程,共二个疗程)联合同期三维适形放疗,将其作为对照组,70例患者给予卡培他滨节拍化疗方案(0.6 g/m~2,bid,早晚餐后口服,每28 d 1个化疗疗程,共2个疗程)联合同期三维适形放疗,将其作为观察组.然后将两组患者的临床疗效、不良反应及血清肿瘤标志物、VEGF、CRP及基质金属蛋白酶水平等指标进行比较.结果经过治疗后,观察组患者的治疗总有效率明显高于对照组(82.86%vs 65.0%),差异有统计学意义(P0.05);在治疗前,两组患者的CA125、CA19-9、CEA、VEGF、CRP、MMP-2、MMP-9水平无明显差异,无统计学意义(P0.05);在治疗后,观察组患者的CA125、CA19-9、CEA、VEGF、CRP、MMP-2、MMP-9水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);观察组患者的白细胞减少、消化道反应、肝功能损害发生率明显低于对照组.结论在晚期老年食管癌患者中应用卡培他滨节拍化疗联合三维适形放疗的治疗方案,能够显著提高临床疗效,有效降低其血清肿瘤标志物、VEGF、CRP及基质金属蛋白酶水平,且具有较高的用药安全性.     

糖尿病视网膜病变患者的生活质量及其影响因素

目的：分析糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)患者的生活质量(quality of life,QOL)及其影响因素。

方法：分别采用一般情况问卷、视功能损害眼病患者生活质量量表(scale of quality of life in patients with visual impairment,SQQL-VI)和社会支持评定量表对103例DR患者进行问卷调查。采用向后逐步多重线性回归分析法分析年龄、性别、文化程度及社会支持度等因素对DR患者生活质量的影响。

结果：DR患者的SQQL-VI量表中总生活质量评分为 63.59±9.58分,症状与视功能评分为53.13±8.51分,身体机能评分为28.39±3.86分,社会活动评分为27.95±3.63分,精神心理方面评分为27.78±3.85分。单因素分析结果显示,不同年龄、文化程度、职业、家庭月收入、医疗费用负担方式、糖尿病病程和社会支持度DR患者的生活质量评分的差异有统计学意义(P<0.05)。多重线性回归分析显示,年龄、文化程度、医疗费用负担方式、糖尿病病程及社会支持度是DR患者生活质量的独立影响因素。

结论：DR患者的生活质量较差,年龄、文化程度、医疗费用负担方式、糖尿病病程及社会支持是其主要影响因素,可通过减少经济负担、增加社会支持改善DR患者的生活质量。     

根治性宫颈切除治疗早期宫颈癌临床价值的循证评价

目的系统评价根治性宫颈切除术治疗早期宫颈癌的安全性及保留生育功能的可行性。方法 我们系统检索PubMed、Embase、Cochrane Library以及中文全文数据库,对2000年1月至2009年12月国内外公开发表的所有有关根治性宫颈切除术治疗早期宫颈癌的文献进行回顾,对符合纳入标准的临床对照试验,采用Stata 9.2软件进行Meta分析,对无对照的临床研究则采用描述性分析,主要评价指标为生存率。结果 共纳入4篇根治性宫颈切除术和根治性全子宫切除术治疗早期宫颈癌生存率比较的临床对照试验和17篇无对照的临床研究,结果显示,根治性宫颈切除术和根治性全子宫切除术治疗早期宫颈癌的生存率差异无统计学意义,根治性宫颈切除术术后总妊娠率为47%。结论 宫颈根治切除术不会降低早期宫颈癌患者术后生存时间,不增加术后复发率,且能维持正常的妊娠及生育功能,提高患者生存质量,因而是安全可行的,但需要更多高质量的临床随机对照试验进一步验证。     

siRNA对HL-60细胞c-myc蛋白表达的影响

 目的　研究小干扰RNA（siRNA）对白血病细胞c-myc蛋白表达的影响,探寻白血病基因治疗的新方法。方法　应用针对c-myc的siRNA转染HL-60细胞,分别收集转染后24、48和72 h细胞及对照组细胞,提取细胞总蛋白,用Western blotting方法检测c-myc蛋白的表达情况。结果　与对照组相比,转染c-myc siRNA后,细胞c-myc蛋白表达水平明显下降,且c-myc蛋白含量随作用时间的延长而逐渐降低,转染24 h后c-myc 蛋白含量下降约42 %,48 h下降66 %,72 h下降78 %;单因素方差分析显示与对照组相比,差异均有统计学意义（P < 0.05）。结论　c-myc siRNA能降低HL-60细胞c-myc蛋白的表达,其作用具有序列特异性和时间依赖性,有望成为白血病靶向基因治疗的新工具。     

成人变应性鼻炎对中耳功能的影响

目的探讨成人变应性鼻炎对中耳功能的影响。方法对成人变应性鼻炎患者100例(变应性鼻炎组)(轻度组50例,中-重度组50例)和健康成人无变应性鼻炎50例(对照组)行鼓膜检查、鼓室导抗图和纯音听阈的测定,并对结果进行统计学分析。结果变应性鼻炎组鼓膜异常率为42.5%,鼓室导抗图异常率为41.0%,听力减退率为48.5%;对照组鼓膜异常率16.0%,鼓室导抗图异常率13.0%,听力减退率12.0%,二者相比差异有统计学意义(P<0.01)。轻度组与中-重度组鼓膜病变率、鼓室导抗图异常率和听力减退率之间比较差异有统计学意义(P<0.01)。轻度组与对照组鼓膜病变率、鼓室导抗图异常率相比差异无统计学意义(P>0.05),听力减退率相比差异有统计学意义(P<0.01)。中-重度组与对照组鼓膜病变率、鼓室导抗图异常率和听力减退率之间差异有统计学意义(P<0.01)。结论成人变应性鼻炎引起中耳功能的改变、中耳病变的发生率较健康成人显著提高,症状越重,发病率越高且程度越重。     

枸杞多糖对大鼠视网膜光损伤的形态及功能的影响

目的探讨枸杞多糖（LBP）对视网膜光损伤形态及功能的影响。设计实验性对照研究。研究对象SD大鼠60只,每组10只。方法建立视网膜光损伤模型,未治疗组于光照前、光照后1天、6天及14天行暗视闪光视网膜电图（ERG）检查,检查完后取每组大鼠眼球上方中央部视网膜行组织病理学检查。于光照前24h及0．5h腹腔注射LBP和生理盐水分别作为LBP治疗组及阳性对照组,光照后1天行暗视闪光ERG,后取眼球上方中央部视网膜标本行组织病理学检查。主要指标ERGb波振幅,视网膜形态学。结果在未治疗组,光照后各时间点标本与正常组对比ERGb波振幅明显下降,第1天降至29．97％,而第6天、第14天b波振幅无继续下降。第1天标本组织形态学显示其损伤最严重,第6天、第14天标本形态上则慢慢恢复。LBP治疗组,ERGb波振幅较阳性对照组明显升高（P=0．005）,视网膜形态学未见明显凋亡改变。结论LBP对大鼠视网膜光损伤的功能和形态损害具有防护作用。（眼科,2009,18：229-233）     

内蒙古自治区水灾地区健康人群麻疹抗体水平监测

为了解 1998年水灾后麻疹流行情况 ,对灾区健康人群麻疹抗体进行了监测 ,结果麻疹IgG抗体阳性率为 78 0 3% ,抗体几何平均滴度倒数 (GMRT)为 12 7,IgG抗体≥ 1:80 0的占 42 2 5 % ,≤ 1:2 0 0的占 5 7 75 % ,提示近年要密切注意麻疹暴发或流行的可能性