有血清和无血清培养基中BFU-E的比较研究

目的 :比较有血清和无血清培养基中BFU -E生长情况。方法 :分离脐血中单个核细胞 (MNC) ,接种于有血清和无血清甲基纤维素半固体培养基中生长 14～ 18d ,观察BFU -E ,并染色鉴定。结果 :有血清中约在培养 14～ 16d集落数达高峰 ,BFU-E为 ( 70 .3± 5 0 .5 ) /10 5MNC ,大部分BFU -E的细胞为 3 0 0～ 5 0 0个 ,小部分集落细胞超过 10 0 0个 ;无血清培养 16～ 18d集落数达高峰 ,BFU -E为 ( 3 6.5± 18.2 ) /10 5MNC ,集落形态与有血清基本相似 ,但集落体积普遍较小 ,细胞数约为 2 0 0～ 3 0 0左右。结论 :无血清培养基中生长时BFU -E数目及BFU -E平均细胞数均较有血清培养中少 ,血清中含有促进BFU -E生长与分化的因子     

低剂量羟基脲联合丁酸钠对K562细胞γ珠蛋白基因表达的作用

目的：探讨低剂量羟基脲（hydroxyurea,HU）与丁酸钠（sodium butyrate,NaB）联合诱导人白血病细胞株（K562）细胞对γ珠蛋白基因表达的作用。方法：以K562细胞株为研究对象,用不同浓度HU和／或NaB作用于K562细胞,台盼蓝拒染活细胞计数观察细胞生长;联苯胺染色了解细胞红系分化,RT—PCR测定珠蛋白基因γ-mRNA表达。结果：25μmol／L HU与100μmol／LNaB是最佳用药组合,其对细胞生长抑制率为（46．09±1．54）％,与HU100μmol/L（64．31±5．19）％、NaB500μmol／L（86．25±1．10）％比较差异有显著性（P〈0．05）;联苯胺染色阳性细胞率达（17．72±0．58）％,与HU100μmoL／L（15．72±0．27）％、NaB500μmol／L（14．32±0．74）％比较差异有显著性（P〈0．05）;与亲本细胞比较Gγ—mRNA表达上调（2．04±0．13）倍,Aγ-mRNA表达上调（1．27±0．01）倍,差异有显著性（P〈0．05）。结论：低剂量HU与NaB联合用药能使K562细胞γ珠蛋白基因表达上调,并减轻细胞生长抑制,为临床联合用药提供实验依据。     

异基因骨髓移植治疗慢性粒细胞性白血病3例报告

异基因骨髓移植治疗慢性粒细胞性白血病３例报告黄志光，李夏新，李春富，钱新华，冯晓勤，赵洪宁，张肇和我科于１９９３年５月至１９９４年４月对３例慢性粒细胞性白血病患者行异基因骨髓移植，均获成功，现报道如下：材料和方法一、患者和供者的一般情况３例患者均为男...     

丁酸钠对K562细胞系γ珠蛋白基因表达的诱导作用及机制

目的:研究丁酸钠对K562细胞系γ珠蛋白基因表达和胎儿血红蛋白合成的诱导作用及机制.方法:以丁酸钠(0.5 mmoL/L)诱导72 h的K562细胞为实验组,设K562亲本细胞和SB203580(10 μmol/L)处理1 h后用丁酸钠(0.5 mmoL/L)诱导72 h 的K562细胞为阴性对照组,设羟基脲(100 μmol/L)诱导72 h的K562细胞为阳性对照.分别提取细胞总RNA 和总蛋白.采用RT-PCR、Western blotting和联苯胺染色方法检测γ珠蛋白基因、胎儿血红蛋白和p38表达及p38磷酸化水平.结果:与K562亲本细胞和SB203580处理后丁酸钠诱导的K562细胞相比,丁酸钠诱导的K562细胞中G-γ珠蛋白、A-γ珠蛋白和胎儿血红蛋白的表达均明显上调(P<0.05),p38 mRNA和蛋白水平表达均无明显变化(P>0.05),但p38蛋白磷酸化水平显著增加(P<0.05).K562亲本细胞、SB203580处理后丁酸钠诱导的K562细胞和丁酸钠诱导的K562细胞中联苯胺阳性细胞百分率分别为(3.2±0.4)%、(12.7±0.2)%和(36.3±0.8)%(P<0.05).结论:丁酸钠可以诱导K562细胞高表达γ珠蛋白基因、合成胎儿血红蛋白,p38MAPKs的激活在丁酸钠诱导K562细胞高表达γ珠蛋白基因中发挥重要作用.     

特异性小分子干扰RNA抑制K562细胞肺耐药相关蛋白表达及其功能的研究

肺耐药相关蛋白（LRP）是与多药耐药（MDR）相关的糖蛋白。在儿童白血病及成人急性髓系白血病（AML）中，LRP表达是独立的预后决定因素之一，其过度表达造成患者对化疗不敏感，提示预后不良.近年来，小分子干扰RNA（siRNA）介导的RNA干扰（RNAi）既可以特异地降解同源mRNA序列，从而有效阻止相应蛋白质的表达，并且与相应的单链反义核酸相比，siRNA造成的基因抑制效率更高、特异性更好，所需有效浓度却大大减低。国内外学者将siRNA技术应用于消减慢性粒细胞白血病bcr／abl基因以及逆转p蛋白引起的MDR等的研究，取得了良好的效果。我们设计合成了LRP特异性siRNA-LRP，并转染丁酸钠（NaB）诱导的高表达LRP的K562细胞模型（K562／N），观察siRNA-LRP抑制LRP基因和蛋白表达、消除LRP改变细胞内药物蓄积和分布作用的效果，以期为逆转LRP介导的肿瘤细胞MDR、提高难治性和复发性白血病患者疗效探索新的方法，并探讨以siRNA介导的RNAi用于肿瘤细胞MDR治疗的可行性。     

新生儿危重病例评分与新生儿急性生理学评分围产期补充Ⅱ的应用比较

目的探讨新生儿危重病例评分(NCIS)与新生儿急性生理学评分围产期补充Ⅱ(SNAPPE-Ⅱ)两种评分系统预测危重新生儿死亡放弃风险的准确度及临床实用性。方法 269例危重新生儿根据病情转归分为死亡放弃组及好转治愈组,比较两种评分系统预测死亡放弃风险的准确度。结果死亡放弃组患儿的SNAPPE-Ⅱ得分明显高于好转治愈组患儿,差异有统计学意义(P0.001),两组患儿NCIS评分的差异无统计学意义(P=0.091),而符合单项指标的患儿死亡放弃风险明显高于不符合单项指标患儿(P=0.005)。结论 SNAPPE-Ⅱ在危重新生儿死亡放弃风险的早期预测中具有更高的准确性,NCIS中单项指标对预测病情转归有指导意义。     

绞股蓝多糖对免疫功能的影响

绞股蓝多糖（２５,５０１００ｍｇ／ｋｇ,ｉｐ）能明显提高小鼠碳粒廓清速率,其Ｋ值分别为０．０５１７±０．０１１７,０．０４１９±０．０１１９,０．０５７６±０．０４８,与对照组（ＮＳ）０．０１６９±０．０１１７相比有显著差异（Ｐ＜０．０５）。能增强肝癌Ｈｅｐｓ小鼠ＮＫ细胞活性,其活性（％）分别为２１．４０±４．００,４１．１９±１１．５６,４９．６５±５．０６,除２５ｍｇ／ｋｇ剂量组外,均显著高于对照组１７．９９±２．３５（Ｐ＜０．０５）,而对肉瘤Ｓ１８０小鼠ＮＫ细胞活性无明显影响。另外对小鼠血清溶血素和Ｓ１８０小鼠脾指数有显著提高作用,但对Ｈｅｐｓ小鼠脾和胸腺指数、Ｓ１８０小鼠胸腺指数和脾淋巴细胞转化无显著作用。     

新生儿免疫球蛋白重链可变区基因重排研究

目的探讨不同胎龄新生儿免疫球蛋白（Ig）重链可变区（VH）基因重排情况。方法排除宫内感染的新生儿,其中胎龄27周4例,28～32周9例、33～36周12例、37～42周13例,提取其外周血RNA、进行逆转录PCR（RT-PCR）扩增其IgVH基因、6％变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染显色。结果各个胎龄VH1-VH7各家族均有多个重排条带表达,同一个VH家族重排基因的平均中分子量在各个胎龄组间差异无显著性。结论27～42周新生儿IgVH基因VH1～VH7家族重排均具有多样性;对同一个V。家族来说,28～42周各胎龄组IgVH基因重排无显著性差异。     

丁酸钠诱导K562细胞红系分化基因表达谱分析

目的 分析丁酸钠(NaB)诱导K562细胞后的差异表达基因,筛选出与红系分化相关基因,探索NaB的作用机制.方法 应用Affymetrix公司的人类全基因组HG-U133 Plus 2芯片,检测0.5 mmol/L NaB诱导K562细胞48 h的珠蛋白基因变化及差异表达基因,筛选出与红系分化相关基因.应用反转录(RT)-PCR检测ε、γ、β、δ4个珠蛋白基因及2个红系分化相关基因KLF1及KLF3的表达,验证基因芯片结果 .结果 表达谱基因芯片结果分析显示:总探针组54 675个芯片中,阳性表达数23 175(42.4%),阴性表达数30693(56.1%).信号比对数值(SLR)结果显示,表达上调(SLR>1)433个,包含340个不同的基因;表达下调(SLR<-1)171个,包含144个不同的基因.生物学功能分类发现所涉及的基因主要包括参与细胞及大分子代谢、细胞信号、生物学调节、细胞发育及细胞增殖等.7个珠蛋白中ε、Aγ、Gγ、β、δ珠蛋白基因表达均上调,而α及ζ珠蛋白基因无明显改变;表达上调或下调且与红系分化相关的有ALAS2、EGR1、LMO2、RUNX1、KIT、GYPA、GATA-2、KLF1及KLF3等29个基因.RT-PCR验证基因芯片结果 可靠.结论 NaB诱导K562细胞向红系分化;NaB可能通过调节ALAS2、EGR1、LMO2、RUNX1、KIT、GYPA、GATA-2、KLF1及KLF3等与红系分化相关的基因调控γ珠蛋白合成.     

癌康冲剂抗癌作用及对免疫功能影响的实验研究

通过动物实验,研究癌康冲剂的抗癌作用和对免疫功能的影响。方法：抗癌作用现察,建立小鼠移植性肿瘤模型（Ｓ１８０、Ｕ１４和Ｈｅｐｓ）,测定其抑瘤率;免疫功能测定,采用免疫器官称重法、碳粒廊清指数、脾淋巴细胞转化、ＮＫ细胞活性和血清溶血素的测定来判断免疫功能的强弱。结果：癌康冲剂３组对Ｓ１８０、Ｕ１４和Ｈｅｐｓ均有明显的抑制作用,同时能提高免疫器官重量、碳粒廓清指数、脾淋巴细胞转化、ＮＫ细胞活性和血清溶血素的生成。结论：癌康冲剂不仅能抑制肿瘤细胞的生长,而且有提高机体免疫功能的作用,可配合放疗、化疗作为综合治疗癌症的中药制剂。