乙型肝炎病毒 DNA定值冻干血清用于荧光定量聚合酶链反应测定的研究

目的 研究冻干的定值系列血清及其在乙型肝炎病毒脱氧核糖核苷酸(HBV DNA)荧光定量聚合酶链反应测定中的应用价值。方法 制备系列冻干血清,用罗氏的内标定量方法进行定量。将定量系列血清和106拷贝/ml的样本寄发给不同试剂厂家,令其按要求稀释并检测。将定值系列血清的罗氏定量结果与各试剂检测的CT值做标准曲线,比较其定值结果与试剂盒中工作标准曲线的定值结果。结果 采用冻干定值系列血清作为荧光定量试剂盒定量测定的标准,标准曲线的线性回归系数均小于-0.99,斜率和截距与原试剂标准相近,使用该标准系列各试剂的检测结果间的变异(CV)大大降低。结论 该冻干定值系列血清可有效地用于临床HBV DNA的定量测定。     

双转基因小鼠模型中microRNA-153对RTN4的表达调控

目的 探讨mir-153在阿尔茨海默病发病机制中的作用.方法 通过microRNA芯片及Real-timePCR检测APPswe/PSAE9双转基因小鼠脑内mir-153的表达;构建高表达mir-153的稳转细胞系,通过western-blot检测稳转细胞系内RTN4的蛋白表达;构建野生型及突变型RTN4的3'UTR荧光素酶报告载体,分别将其与mir-153表达载体或microRNA阴性对照载体共转染入293T细胞内,检测海肾荧光素酶的相对活性以验证mir-153对RTN4 mRNA的作用靶点.结果 microRNA芯片及Real-time PCR检测均证实3月龄APP8we/PS△E9双转基因小鼠脑内mir-153的表达较同龄野生对照显著降低;在高表达mir-153的稳转细胞系内RTN4的蛋白水平明显降低;共转染野生型RTN4的3'UTR/mir-153表达载体可使海肾荧光素酶相对活性较共转染野生型RTN4的3'UTR/miRNA阴性对照质粒组显著降低(P＜0.05),而共转染突变型RTN4的3'UTR/mir-153表达载体组则较之无明显差异.结论 在3月龄APPswe/PS△E9双转基因小鼠脑内存在mir-153的异常表达;mir-153可调控RTN4的蛋白表达;mir-153对RTN4的表达调控是通过结合RTN4 3'UTR 839-845碱基处的作用位点而实现的.     

MicroRNA-153对靶基因下游信号分子GSK-3β表达水平及细胞抗损伤能力的影响

目的 mir-153可负调控阿尔茨海默病(Alzheimer'S disease,AD)主要致病基因APP及APLP2的蛋白表达,降低其胞内降解片段(intracellular domains,ICDs)的生成.因ICDs具有转录活化及促凋亡活性,本研究旨在探讨mir-153对这两个靶基因下游信号分子GSK-3β表达水平及细胞抗损伤能力的影响,以期进一步阐明mir-153在阿尔茨海默病发病机制中的作用.方法 构建mir-153稳转细胞系及mir-153转基因小鼠,Western blot检测该细胞系及小鼠脑内磷酸化GSK-3β、Tau及其总蛋白的表达;Aβ42肽和H2O2分别处理mir-153稳转细胞系,MTS法检测细胞增殖活性的改变,流式细胞术检测细胞凋亡水平的改变.结果 mir-153稳转细胞系中磷酸化GSK-3β及其总蛋白的表达下调,Tau磷酸化水平降低.mir-153转基因小鼠脑内,磷酸化GSK-3β及其总蛋白的表达降低,磷酸化Tau及其总蛋白水平均无明显变化.Aβ42肽和H2O2损伤作用下,mir-153稳转细胞系的增殖活性显著降低,凋亡水平增加.结论 mir-153可负调控靶基因下游信号分子GSK-3β的表达;高表达mir-153可降低细胞抗损伤的能力.     

轴突生长抑制因子重组疫苗预防免疫减轻阿尔茨海默症模型小鼠行为学损伤

目的研究轴突生长抑制因子重组DNA疫苗对转基因阿尔茨海默症小鼠的预防治疗。方法轴突生长抑制因子重组DNA疫苗肌肉注射APP/PS1双转阿尔茨海默症模型小鼠。设野生对照组、模型对照组、空载体对照组、疫苗组。水迷宫实验检测小鼠行为学差别。结果疫苗组小鼠在4.5月龄水迷宫实验中学习记忆能力较模型对照及空载体对照组有显著差异(P<0.05)。结论肌肉注射轴突生长抑制因子DNA重组疫苗能够改善小鼠学习记忆能力。     

以睡眠障碍为主要表现的病毒性脑炎1例分析

对以睡眠障碍为主要表现的病毒性脑炎1例分析如下。1病历摘要男,1岁零4月龄。因睡眠减少2d于2011-01-24入院,患儿每天平素睡眠10～14h,近2d出现睡眠减少,约2h/d,偶有烦吵,喜抓头,偶咳,无发热,无呕吐,无腹泻,精神食欲一般,以睡眠减少原因待查收入。既往多次支气管炎史,上周曾因支气管炎住院治疗。查体:BP 80/60mm Hg,R 25次/min,P 96     

浅谈急性白血病的临床治疗策略

目的 讨论急性白血病的临床治疗.方法 根据患者临床表现结合检查结果进行诊断并治疗.结论 高白细胞血症(白细胞>100×109/1)不仅会增加病人的早期死亡率,而且也会增加髓外白血病的发病率和复发率.一旦出现可使用血细胞分离机,单采清除过高的白细胞,同时给以化疗药物和水化,并预防高尿酸血症、酸中毒、电解质平衡紊乱和凝血异常等并发症.     

中重度牙周炎伴缺血性脑卒中血清超敏C-反应蛋白和同型半胱氨酸检测

目的 观察中重度牙周炎伴缺血性脑卒中患者血清超敏C-反应蛋白（hs-CRP）、同型半胱氨酸（HCY）水平变化,探讨中重度牙周炎与缺血性脑卒中相关关系。方法 2012年4月至2013年1月在辽宁省人民医院口腔科就诊的患者中选取中重度牙周炎（A组）、缺血性脑卒中（B组）、中重度牙周炎伴缺血性脑卒中（C组）各50例,另选取健康人群（D组）50名,分别记录菌斑指数（PLI）、牙周探诊深度（PD）和附着丧失（AL）,采用散射比浊法和化学发光法检测血清hs-CRP和HCY。结果 A、C两组间PD、AL差异无统计学意义（P＞0.05）。A、B、C组的PLI均高于D组,差异有统计学意义（P＜0.05）。A、B、C组hs-CRP和HCY均高于D组,C组hs-CRP高于A、B组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论 牙周炎与缺血性脑卒中间存在一定关联,hs-CRP和HCY可作为中重度牙周炎和缺血性脑卒中临床试验的重要参考指标。     

全国医院血站人类免疫缺陷病毒抗体检验室间质量评价

为了预防和控制人类免疫缺陷病毒(ＨＩＶ)在我国的传播,根据卫生部医政司的要求,卫生部临床检验中心于1996年进行了“全国医院血站系统血清ＨＩＶ抗体检验开展情况调查”[1],了解到虽然国内许多医院和血站都已开展血清ＨＩＶ抗体检验,但是检验水平相对较低,因此,开展ＨＩＶ抗体检验室间质量评价工作有着重要意义。自1997年起,卫生部临床检验中心在全国医院血站系统开展了血清ＨＩＶ抗体检验的室间质量评价(简称质评),现将2年多来的室间质评结果总结如下。材料和方法　　一、材料1质控样品:由卫生部临床检验中心制备提供。2质控样品制备用试…     

标本处理对聚合酶链反应测定乙肝病毒核酸的影响

目的 研究对血清标本进行乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ聚合酶链反应（ＰＣＲ）测定前的最佳标本处理方法。方法 使用煮沸裂解方法和核酸纯化方法同时处理２份ＨＢＶ ＤＮＡ含量不同血清标本及３份溶血和正常血清标本,比较荧光定量ＰＣＲ测定的重复性及测定值的差异。结果 煮沸裂解法处理２份标本所得结果的重复性（变异系数ＣＶ分别为０．２１６５和０．３２６２）明显差于对样本进行核酯纯化后的测定重复性（ＣＶ分别为０．０６９９和０．１０９２）;并且,当标本中血红蛋白含量大于５．８９ｕｇ／Ｌ时（肉眼未见有明显溶血）,采用煮沸裂解法处理标本所得ＨＢＶ ＤＮＡ量较核酸纯化方法所得值低约２个数量级（Ｐ〈０．０５）。结论 在ＨＢＶ ＤＮＡ ＰＣＲ检测时,煮沸裂解法不适合用来处理血清标本,而应使用核酸纯化方法。     

地黄饮子加味联合盐酸多奈哌齐治疗脑小血管病性认知功能障碍疗效观察

目的:观察地黄饮子加味联合盐酸多奈哌齐治疗脑小血管病(cerebral small vessel disease,CSVD)性认知功能障碍的疗效.方法:80例随机分为对照组和观察组各40例.两组均用盐酸多奈哌齐治疗,观察组加用地黄饮子加味治疗.结果:观察组总有效率高于对照组(P＜0.05).治疗后两组MMSE和MoCA...