生殖支原体黏附素蛋白模拟表位的筛选和鉴定

目的制备兔抗重组生殖支原体粘附素蛋白(rMgPa)的多克隆抗体(pAb),以期筛选MgPa的模拟表位。方法用rMgPa免疫新西兰兔以制备兔抗rMgPa的pAb,以此pAb为靶分子对噬菌体展示随机12肽库进行生物淘洗,随机挑取74个噬菌体克隆进行DNA测序与分析,用ELISA检测噬菌体与pAb结合的特异性。结果制备了兔抗rMgPa的特异性pAb,以此抗体为靶分子对噬菌体展示肽库进行生物淘洗后,特异性噬菌体克隆得到了明显富集。经对74个噬菌体克隆所展示的外源性多肽序列进行比较分析,共可大致分为3组一致性的核心序列:P-S-A-A/V-X-R-F/W-E/S-L-S-P,A-K-I/L-T/Q-X-T-L-X-L和K-S-L-S-R-X-D-X-I。ELISA结果说明36个噬菌体克隆能与pAb发生特异性结合,因此,这三组核心序列可能是MgPa的模拟表位。结论成功制备了兔抗rMg-Pa的pAb,并筛选到MgPa的3个可能的模拟表位,为进一步研究Mg的诊断与预防提供一定的实验依据。     

案例教学在临床免疫学及检验课堂教学中的应用。

为了改进临床免疫学和检验的教学方法,激发学生的学习兴趣,提高学习效果。将案例教学法引入临床免疫学和检验的教学中,在课堂上对临床病例进行分析和总结,使抽象的理论知识转化为可以感知的临床病例,激发了学生的学习兴趣,培养了学生主动学习和实践的能力,取得了良好的教学效果。     

东莞市横沥镇35岁及以上居民肥胖流行情况及其与高血压的关系

目的调查东莞市横沥镇≥35岁居民肥胖流行情况及其与高血压的关系。方法 2011年7月~2012年4月采用整群抽样的方法,对东莞市横沥镇≥35岁的10 036户籍居民进行问卷调查和身高、体重、腰围、臀围、血压测量。结果完成问卷调查、身体测量共9 880人。超重、肥胖、中心性肥胖患病率各为37.5%、16.5%、51.8%。男性超重患病率较女性高,差异有统计学意义(Ⅹ2=26.98,P<0.001),男女性肥胖及中心性肥胖患病率基本持平,差异均无统计学意义(均有P>0.05)。高血压患病率为34.6%。超重、肥胖、中心性肥胖人群中的收缩压/舒张压水平各为133.7/77.5 mmHg、138.5/80.4 mmHg、136.2/78.3 mmHg;高血压患病率各为38.4%、50.8%、45.2%。不同体质指数(body mass index,BMI)、腰围的收缩压/舒张压水平及高血压患病率差异均有统计学意义(均有P<0.05)。BMI超重、肥胖高血压的患病率分别是BMI正常的1.78倍(95%CI:1.56~2.02)、3.20倍(95%CI:2.71~3.80),中心...     

穿透支原体纤连蛋白结合蛋白的鉴定及分离纯化

目的 探讨穿透支原体对宿主细胞的黏附机制。方法 用去污剂Triton X-100提取穿透支原体蛋白，用配体免疫印迹试验鉴定纤连蛋白结合蛋白(FnBP)；然后制备纤连蛋白Sepharose 4B亲和柱，运用亲和层析技术从制备的样品中分离纯化FnBP，在非还原状态下进行十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)。结果 配体免疫印迹试验鉴定出一65kDa的蛋白条带，可特异性地结合Fn；亲和层析技术得到相应的FnBP的纯化产物。结论 FnBP与穿透支原体对宿主细胞的黏附过程有关。     

谷保防霉剂对稻谷霉菌的抑杀作用

目的：探讨谷保防霉剂对稻谷霉菌的抑杀效果。方法：用现场试验，模拟试验及对霉菌纯培养物熏蒸三种方法测定不同剂量谷保防霉剂对霉菌的抑杀效果。结果：当浓度为0．2％时，谷保防霉剂对粮食表面霉菌的抑制率可达95．9％，而对稻谷内部霉菌抑杀作用不明显，白曲霉有较强的耐能力。结论：谷保防霉剂能有效防止稻谷霉菌侵染，可应用于仓储粮食保存，特别当粮食水份含量高时。     

东莞市东部地区35岁以上居民血脂水平及分布特征

目的探讨东莞市东部地区35岁以上居民血脂水平及分布特征。方法 2011年7月至2012年4月,采用整群抽样的方法,对东莞市横沥镇35岁及以上的19 058户籍居民进行问卷调查及总胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triacylglycerol,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)检测。结果完成问卷调查、血脂检测共9 921人。血脂异常标化患病率为35.47%。TC、TG、HDL-C、LDL-C浓度分别为(5.20±1.02)mmol/L、(1.56±1.34)mmol/L、(1.49±0.38)mmol/L、(3.03±0.90)mmol/L。血脂异常类型以高TG、高TC为主。男性49岁以下年龄段组的TC、LDL-C浓度及LDL-C血症患病率较女性同年龄段组高,50岁以上较女性低,差异有统计学意义(P<0.05)。男女间TC、TG、HDL-C浓度及高TC、高TG、低HDL-C血症患病率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论东莞市东部地区35岁以上居民TC、TG、LDL-C浓度及高TC、高TG、高LDL-C患病率较高;血脂异常类型以高TG、高TC为主;中年男性及更年期以后女性血脂水平较高。     

抗扎伊尔型埃博拉病毒单克隆抗体的制备和鉴定

目的 采用扎伊尔型埃博拉病毒核蛋白(EBOV NP)的合成多肽为免疫原制备鼠源单克隆抗体,并用4种埃博拉流行株核蛋白基因的真核表达蛋白对制备的单克隆抗体进行特异性分析。方法 用人工合成的扎伊尔型埃博拉病毒核蛋白多肽免疫动物,进行细胞融合后筛选阳性杂交瘤细胞。构建埃博拉病毒4种亚型的真核表达载体转染HEK293T细胞以表达目的蛋白,再以真核表达蛋白为抗原,用免疫印迹方法分析扎伊尔型埃博拉病毒单克隆抗体的特异性。结果 完成了抗扎伊尔型单克隆抗体的制备,共得到能分泌抗扎伊尔型埃博拉病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞12株,小鼠腹水抗体效价介于1∶10⁴~1∶10⁵,其中3株杂交瘤细胞株分泌的抗扎伊尔型埃博拉病毒单克隆抗体与其他3种亚型无交叉反应,抗体效价高、特异性好。结论 成功制备抗扎伊尔型埃博拉病毒单克隆抗体,为建立快速检测埃博拉病毒的方法奠定基础。     

肺炎衣原体热休克蛋白10的表达及对炎症因子的诱生作用

目的在大肠杆菌中表达肺炎衣原体(Cpn)热休克蛋白10(Hsp10),并观察该蛋白诱生巨噬细胞(MΦ)分泌TNF-α和IL-6等促炎因子的作用。方法将Hsp10基因克隆于pQE30载体,在大肠杆菌(E.coli)M15中表达重组蛋白rHsp10,经亲和层析获得纯化rHsp10。以不同浓度的rHsp10作用于小鼠MΦRAW264.7,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞因子TNF-α和IL-6。结果成功构建了pQF30/Hsp10基因,并在大肠杆菌M15中得到高效表达,该蛋白能诱导小鼠MΦ以时间、剂量依赖方式分泌TNF-α和IL-6。结论表达并纯化的rHsp10蛋白能诱导MΦ分泌TNF-α和IL-6等促炎因子。     

中国南方部分城市泌尿生殖道沙眼衣原体基因分型研究

目的 了解中国南方4个城市性病高危人群中沙眼衣原体(Ct)基因型的分布特征。方法 从衡阳、上海、广州、江门四个城市的性病门诊收集1180份泌尿生殖道标本,经质粒PCR筛选后,阳性者用巢式PCR扩增Ctomp1基因片段,酶切omp1扩增产物,分析Ct各临床株omp1基因的限制性片段长度多态性(RFLP),将临床株分型。结果 Ct质粒PCR阳性者301份,用于分型者286份。通过RFLP分型,共检出10个基因型,其中常见的是E(30.8%)、J(23.8%)、D(17.5%)、F(10.5%)、G(6.2%)型,并且不同城市间基因型的分布差异无统计学意义(χ²=0.981,P>0.05)。结论 4个城市存在Ct多种基因型,并且基因型的分布大致相同。     

高血压非糖尿病人群高血压肾病的流行病学研究

目的:调查高血压非糖尿病人群高血压肾病(HN)病情及相关因素。方法:用整群抽样法对东莞市横沥镇35岁及以上的7 735名户籍居民进行高血压糖尿病横断面调查。对筛查出的2 023名高血压非糖尿病患者进行肾脏损伤指标及相关因素的检测。结果:资料完整的802名高血压非糖尿病患者中,白蛋白尿发生率为20.3%;肾功能下降2.7%;高血压视网膜病变75.8%;HN患病率14.7%。HN患病率随收缩压/舒张压水平的升高而显著增高(P<0.05)。左心室肥厚较无左心室肥厚、高尿酸血症较尿酸正常者的HN患病率显著增高(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示:收缩压、左心室肥厚、高尿酸是HN的相关因素。结论:在高血压非糖尿病人群中,HN发病与患者收缩压、左心室肥厚、高尿酸相关。