大肠杆菌LTKA63突变体的构建及重组LTKA63免疫佐剂活性机理的研究

目的构建大肠杆菌不耐热肠毒素A亚单位(heat-labile enterotoxin subunit A,LTA)基因减毒突变体LTKA63及其原核表达系统,探讨重组LTKA63(rLTKA63)粘膜免疫佐剂活性的机制。方法采用高保真PCR从大肠杆菌44815株基因组DNA中扩增LTA基因,利用定位突变技术构建LTKA63突变体,T-A克隆后测序。采用无His-tag的原核表达载体pET-15b,构建LTKA63原核表达系统,通过SDS-PAGE鉴定表达产物。采用三色流式细胞术确定rLTKA63激活T细胞途径。结果从大肠杆菌44815株DNA模板中扩增获得预期大小的LTA基因条带。与报道的LTA序列比较,所克隆的LTA基因核苷酸和氨基酸序列相似性分别为99.03%~99.61%和98.33%~99.22%。LTA基因定位突变后获得序列正确的LT-KA63突变体。rLTKA63表达量占细菌总蛋白的15%左右。rLTKA63作用后Th1和Th2细胞较阴性对照组分别增加21.9%和36.2%。结论本文成功地构建了LTKA63原核表达系统,所表达的rLTKA能同时激活Th1和Th2细胞。     

血管外肺水与肺动脉嵌顿压在ARDS 患者液体管理中的价值比较

目的探讨血管外肺水(EVLW)与肺动脉嵌顿压(PAWP)在急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者液体管理中的不同价值.方法选择2009-01-2011-11符合 ARDS 诊断标准的29例患者为研究对象,随机分为 EVLW 液体管理组(15例)和PAWP 液体管理组(14例),分别维持 EVLW 在3~7ml/kg,PAWP 在8~12mmHg.对两组患者的28d 和60d 生存率、ICU 住院时间、机械通气时间、急性肺损伤评分和氧合指数进行比较.结果 EVLW 组和 PAWP 组患者28d 和60d 生存率的差异均无统计学意义(均 P=0.542);机械通气时间、ICU 住院时间分别为(10.13±3.02)、(12.53±3.50)、(12.64±2.89)、(15.50±2.50)d,差异均有统计学意义(均 P<0.05);EVLW 组氧合指数的改善优于 PAWP 组(P<0.01).结论 EVLW 相比较于 PAWP,在 ARDS 患者液体管理中的临床价值更为重要.     

氧合指数对急性呼吸窘迫综合征肺内分流的判定价值

目的研究氧合指数(PaO2/FiO2)用于反映急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)的肺内分流(Qsp/Qt)准确度下降程度。方法符合ARDS诊断标准患者12例,气管插管呼吸机支持,采用肺保护性通气策略(Vt6ml/kg),留置Swan-Ganz导管,采用低流速法测定准静态肺压力-容积曲线。逐步调整PEEP水平,观察血流动力学、呼吸力学的变化,分别留取外周及肺动脉血行血气分析,分别计算Qsp/Qt和PaO2/FiO2,对结果进行回归分析。结果①Qsp/Qt和PaO2/FiO2两者之间存在线性相关,但决定系数r2只有0.432,相关性偏小;②Qsp/Qt(%)的多元回归方程:y=56.542-3.371x1-0.056x2+0.594x3+2.84x4,x1为PaO2/FiO2,x2为Hgb,x3为PAWP,x4为CI,校正r2=0.538,(P<0.01)。结论用PaO2/FiO2测算ARDS的Qsp/Qt精确度下降,决定系数r2只有0.432,Qsp/Qt除外PaO2/FiO2还受Hgb、肺动脉楔压(plumonary artery wedge pres-sure,PAWP)及心脏指数(cardiac index,CI)等影响。     

TNF-α、Pro-BNP在脓毒症心功能障碍中的作用

目的 脓毒症一旦出现心功能障碍死亡率高，所以早期诊断有重大的临床意义，本文探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、B型脑钠肽前体(Pro-BNP)在脓毒症心功能障碍中的作用。 方法 选择2015年8月—2016年10月收住杭州市第一人民医院的脓毒症心功能障碍患者50例入院后24 h检查心脏超声，根据左室射血分数(LVEF)分为LVEF＞40%组和LVEF≤40%组,根据预后分为存活组和死亡组，检测TNF-α浓度、Pro-BNP浓度、心肌肌钙蛋白I (TNI)水平；记录急性生理与慢性健康(APACHEⅡ)评分，测量左室收缩末期内径(LVSD)，分析TNF-α、Pro-BNP与APACHEⅡ评分及LVEF的相关性，用ROC曲线分析TNF-α、Pro-BNP对于心功能障碍诊断的特异性和敏感性。 结果 LVEF＞40%组TNF-α、Pro-BNP、APACHEⅡ评分均小于LVEF≤40%组，差异有统计学意义；存活组TNF-α、TNI小于死亡组，2组Pro-BNP、LVSD比较P<0.01；存活组的LVEF (40.03±1.50)高于死亡组(38.76±2.86)，但差异无统计学意义。TNF-α、Pro-BNP与APACHEⅡ评分存在相关性(r=0.88，P<0.05；r=0.70，P<0.05)，TNF-α、Pro-BNP与LVEF呈负相关(r=-0.76,P<0.05；r=-0.79,P<0.05)，TNF-α的ROC曲线下面积0.772，Pro-BNP的ROC曲线下面积0.771。 结论 脓毒症心功能障碍患者TNF-α、Pro-BNP升高，TNF-α、Pro-BNP升高提示预后不良。      

暴发性心肌炎不可逆心脏骤停体外膜肺氧合（ECMO）治疗

目的观察体外膜肺氧合（ECMO）治疗暴发性心肌炎心脏骤停的效果。方法二例暴发性心肌炎患者住院治疗过程中出现心脏节律和传导异常,随即出现心脏骤停,立即给予ECMO（VA模式）治疗。结果给ECMO治疗,辅助平均157．5h后,二例均完全恢复。结纶暴发性心肌炎出现新的心律失常可能预示不可逆心脏骡停,在CPR基础上早期ECMO治疗是成功的关键。     

生物阻抗法与热稀释法测心排血量的比较

目的探讨生物阻抗法与热稀释法测心排血量(CO)的准确性和相关性。方法对11例危重病患者经颈内静脉置入右心漂浮导管,利用GE MARQUE SORLAR 8000M心电系统计算CO,并按标准方法连接胸腔阻抗法血流动力学监测仪,比较2种方法测定CO的相关性和准确性。结果11例共进行39次配对测量CO,热稀释法测得CO为(5.52±2.60)L/min,阻抗法测得CO为(4.59±1.32)L/min。2种测得结果进行相关性分析,r=0.69,P<0.001;配对资料t检验,t=3.95,P<0.001,说明2组数据具有统计学差异。结论阻抗法和热稀释法测CO具有良好的正相关性,但是前者准确性尚不够,临床中尚不足以替代热稀释法测量CO。     

急性心包炎心电图酷似急性心肌梗死样改变2例

急性心包炎的演变有4个阶段,阶段Ⅰ伴有胸痛发作时的心电图改变,表现为ST段抬高,与急性心肌梗死中抬高的ST段不同[1]。及早鉴别两者差异,有助于急性心包炎的早诊断、早治疗。1病历介绍例1:女,30岁,因咽痛2d,伴胸痛2h于2004年7月19日就诊。胸痛呈缓慢持续性加重,伴胸闷,无明显呼     

乌司他丁对心肺转流术心脏手术患者肺损伤的保护作用

心肺转流术(CPB)后通常会出现一种早期难以解释的肺部并发症"泵肺"(pumplung).在进行冠状动脉(冠脉)旁路移植术(CABG)时,其他器官还会出现问题,这与CPB有关,本研究通过观察乌司他丁对CPB心脏手术患者急性肺损伤(ALI)的呼吸力学和氧代i射的影响,探讨其疗效和安全性.     

15例体外膜肺氧合患者躁动的原因分析及护理对策

分析2009年1月—2016年2月本科室收治的15例体外膜肺氧合患者躁动原因与护理对策。分析原因与全身管道多、机械通气等刺激引起舒适度改变、供氧不足、药源性谵妄有关。护理对策包括：做好各管道的管理,减少机械通气引起的不适,使用密闭式吸痰管,加强雾化吸入,必要时鼓肺,进行体温的监护,加强护士对镇痛镇静药物使用时的安全意识,加强谵妄的评估等。本组7例患者痊愈出院,2例死亡,5例病情危重或因费用问题放弃治疗自动出院,1例病情加重仍在住院正在全力救治中。     

体外膜肺氧合治疗暴发性心肌炎患者的临床研究

目的探讨体外膜肺氧合（ECMO）对暴发性心肌炎（FM）患者的临床治疗效果。 方法收集2009年9月至2015年10月入住杭州市第一人民医院危重病医学科的8例FM患者,所有患者均为常规治疗疗效不佳,遂立即行静脉-动脉模式ECMO（VA-ECMO）辅助治疗。观察患者疗效,并对患者治疗前后肌酸激酶、肌酸激酶同工酶（CKMB）、肌钙蛋白Ⅰ、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）、血肌酐、血乳酸、心胸比例及左室射血分数（LVEF）进行比较。并根据股动静脉置管法将所有患者分成外科手术组及超声组,每组4例,比较两组患者置管时间及并发症的发生情况。 结果6例患者心功能恢复正常,成功撤机,2例患者由于心功能无法逆转最终死亡。ECMO辅助治疗后肌酸激酶[（586 ± 461）U/L vs.（90 ± 38）U/L,t = 2.721,P = 0.042]、血肌酐[（153 ± 70）μmol/L vs.（966 ± 20）μmol/L,t = 3.866,P = 0.012]、血乳酸[（6.25 ± 3.67）mmol/L vs.（1.23 ± 0.29）mmol/L,t = 3.236,P = 0.023]及LVEF[（0.21 ± 0.16）vs.（0.47 ± 0.05）,t = 4.416,P = 0.007]较治疗前比较,差异均有统计学意义。同时,采用外科手术切开直视下股动静脉置管方法,所需时间为（72 ± 10）min,超声引导下紧急留置了股动静脉管,所需时间为（24 ± 5）min。两种方法比较,差异有统计学意义（t = 7.908,P = 0.004）,且无其他不良反应及并发症发生。 结论ECMO是抢救FM的一种有效机械辅助方法,且联合超声引导下的股动静脉置管技术救治效果更好。